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- 文献和实验
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- 保存条件:
-20°-20°C
- 保质期:
1-3年
- 库存:
999
- 供应商:
亦高生物
- 规格:
I2521-5ML

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文献和实验、在立体显微镜下,可以看到明显的 3D 结构。使用 200μl 移液器吸头从每个孔中收集球状体,并将大约 50 个球状体集中到 5ml 微量离心管中。 中肠和后肠球状体生长成人肠类器官 11、收集球状体后,将微量离心管垂直放置在管架上 10min,此时球体通过重力沉降到离心管底部。吸出上清,控制总体积在 25μl 左右。 12、将冻存的 Matrigel 在 4℃ 下过夜解冻,添加 B-27 补充剂(终浓度 1×)、R-spondin1 (终浓度 500ng/ml),Noggin (终浓度100
,此时只可记为一个细胞。如果团块很多,则可能需要重新吹打甚至消化直至绝大多数细胞为单个细胞血细胞计数器计数原则计算细胞数:血细胞计数器的机构示意图 由血细胞计数器的构造可以看出,血细胞计数器每个大方块可以容纳的体积为: 1 mm2×0.1 mm = 0.1 mm3 = 10-4 cm3 = 10-4 ml也即每个大方块的体积为万分之一毫升,因此在计算每毫升液体中的细胞数时需要乘以104。在常规没有使用台盼兰染色时,可以以下面公式计算每毫升培养基中细胞的个数:每毫升培养基中细胞的个数 = 每个方块内细胞
%detrose贮液单独灭菌,4℃保存) 2g 加ddH2O至90mL,调pH值至4-5,定容至95mL,高温灭菌(121℃,15min)。待温度降至55℃时,加入5mL预热(至少室温放置30min)无菌的40%detrose贮液。 (2)YPD(YPED)固体培养基(可用于保菌或培养,100mL) 在YPD液体培养基的营养物中加入2g琼脂粉,加ddH2O至90mL,调pH值至5.8,定容至95mL,高温灭菌(121℃, 15min)。待温度降至55℃时,加入5mL预热
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