转印滤纸和蓝色冷却装置

western-blot实验方法

中。将预冻的冷却装置放入槽内。 缓慢倒入约650 mL转膜缓冲液。 （10）盖好盖子，接上电源。根据蛋白分子量来调节工作电流，一般使用100 V（350mA），转移60 - 90 min。 （11）转膜结束后，断开电源，拆卸转膜夹子，逐一掀去各层。将膜用1 × 丽春红染色5 min，用水冲洗3 次，观察蛋白转印是否完全。同时也可将凝胶用考马斯亮蓝染色，胶上无蓝色条带则说明蛋白转印完全。 （12）免疫反应： I 封闭：用镊子将膜移至含有25 mL 封闭液的平皿中，用脱色摇床室温缓慢摇匀

植物体内可溶性蛋白质含量的测定(考马斯亮蓝法和LOWRY法)

铜溶液），可与蛋白质中的肽键起显色反应；试剂乙为磷钨酸和磷钼酸混合液，在碱性条件下极不稳定，易被酚类化合物还原生成钼蓝和钨蓝混合物而呈蓝色反应，因此蛋白质的酪氨酸和胱氨酸等可显色，颜色深浅与蛋白质含量成正比。【仪器与用具】试管若干；刻度吸管 0.5ml ， 1ml ， 10ml ；定量加样器；圆底烧瓶；冷凝管一套（带橡胶管）；微量滴定管；小烧杯；微量进样器 50 μ l ；分光光度计。【试剂】Na2 WO4 ・ 2H2 O ； Na

LOWRY法和考马斯亮蓝法测定植物可溶性蛋白含量对比

被酚类化合物还原生成钼蓝和钨蓝混合物而呈蓝色反应，因此蛋白质的酪氨酸和胱氨酸等可显色，颜色深浅与蛋白质含量成正比。 【仪器与用具】 试管若干；刻度吸管0.5ml，1ml，10ml；定量加样器；圆底烧瓶；冷凝管一套(带橡胶管)；微量滴定管；小烧杯；微量进样器50μl；分光光度计。 【试剂】 Na2WO4·2H2O；Na2MoO4·2H2O；85% H3PO4；浓HCl；Li2SO4·H2O；溴水；酚酞指示剂；Na2CO3；NaOH；CuSO4·