- ￥1947.90
- 阿拉丁
- 上海
- M669899
- 2025年07月11日
企业认证
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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件：
室温
- 英文名：
Magbead Tissue DNA Kit
- 库存：
期货
- 供应商：
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- 规格：
M669899-96T
产品内容
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产品简介
该试剂盒提供了一种简单、快速、高效的从新鲜组织中提取DNA的方法。组织裂 解后， DNA结合于硅基包被磁珠表面。漂洗后，高纯度的DNA洗脱于EB或去离子水 中。经过纯化的DNA可以直接用于PCR、 Real-time PCR、 SNP基因分型、 STR基因 分型、二代测序和药物基因组学研究等。
自备仪器、试剂
1. 全自动核酸提取仪
2. 无水乙醇、异丙醇
3. 96 DW Plate、 8 channel Comb
实验前准备及重要注意事项
1. 第一次使用前应按试剂瓶标签说明先在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙
醇。
2. 使用前请检查Buffer GTL和 Buffer GL是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉 淀，请将Buffer GTL和Buffer GL于56℃水浴重新溶解。
3. 如果下游实验对RNA污染比较敏感，可以在加入Buffer GL前加入2 μL DNase-Free 的RNase A（100 mg/mL ），试剂盒中的RNase A如果长时间不用，建议-20 ℃保 存。
4. 实验开始前将水浴锅或恒温混匀仪预热至56℃。
5. Magbeads PN严禁冰冻和高速离心，否则可能会对Magbeads PN造成不可逆的损 害。 Magbeads PN每次使用时请充分振荡混合均匀。
操作步骤（手动）
1. 称取20-30 mg组织，将组织在液氮中磨碎或使用组织匀浆机打碎，将打碎的组织 转移到1.5 mL 离心管中。
2. 向上述管中加入180 μL Buffer GTL和20 μL Proteinase K之后将离心管固定于 56℃、 1200 rpm恒温混匀仪上震荡裂解1小时或56℃水浴过夜至固体组织充分裂解， 即为Lysate。
3. 可选步骤，如果少量RNA的存在会对下游实验造成影响，建议向Lysate中加入2μL 浓度为100 mg/mL 的RNase A溶液，震荡混匀，室温放置2 min。
4. 向Lysate中加入200 μL Buffer GL，涡旋振荡混匀。
5. 向离心管中加入200 μL 异丙醇与10 μL Magbeads PN后涡旋震荡混匀5秒钟，之 后将离心管固定于25℃、 1600 rpm的恒温混匀仪上震荡结合10分钟。
6. 将离心管固定于磁力架上静置1分钟，之后弃去溶液。
7. 向离心管中加入750 μL Buffer GW1（使用前请检查是否已加入无水乙醇），涡旋 震荡5秒钟后放于25℃、 1600 rpm的恒温混匀仪上震荡结合2分钟。
8. 将离心管固定于磁力架上静置1分钟，之后弃去溶液。
9. 重复步骤7-8。
10. 向离心管中加入750 μL Buffer GW2（使用前请检查是否已加入无水乙醇），涡 旋震荡5秒钟后放于25℃、 1600 rpm的恒温混匀仪上震荡结合2分钟。
11. 将离心管固定于磁力架上静置1分钟，之后弃去溶液。
12. 重复步骤10-11。
13. 离心管短暂离心后，将其重新固定于磁力架上用移液器去除管底溶液，之后开盖 室温放置5-10分钟使乙醇充分挥发。
14. 向离心管中加入50-200 μL Buffer EB后涡旋震荡使磁珠充分悬浮于洗脱液中，之 后将离心管固定于56℃、 1600 rpm的恒温混匀仪上震荡洗脱10分钟。
15. 将离心管固定于磁力架上静置2分钟，之后将洗脱液转移至新的离心管中-20℃保 存备用。
操作步骤（与全自动核酸提取仪匹配）
1. 称取20-30mg组织，将组织在液氮中磨碎或使用组织匀浆机打碎，将打碎的组织 转移到1.5 mL 离心管中。
2. 向上述管中加入180 μL Buffer GTL和20 μL Proteinase K之后将离心管固定于 56℃、1200 rpm恒温混匀仪上震荡裂解1小时或56℃水浴过夜至固体组织充分裂 解，即为Lysate。
3. 可选步骤，如果少量RNA的存在会对下游实验造成影响，建议向Lysate中加入2μL 浓度为100 mg/mL 的RNase A溶液，震荡混匀，室温放置2 min。
4. 向Lysate中加入200 μL Buffer GL，涡旋振荡20 s，此刻离心管中液体即为Mixture。
5. 按下表向96 DW深孔板中加入试剂：
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注意：
在1&7列中，可先将异丙醇与Magbeads PN按比例混匀后再加入。
6. 将磁套与96 DW深孔板放入CWE2100中，运行“FFPE/Tissue DNA程序”。
7. 约32分钟后程序运行结束，将96DW深孔板和磁套从仪器中取出，把“6&12 Colume”中的洗脱产物转移至离心管中-20℃保存备用。
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