微量样本DNA提取试剂盒（磁珠

微量样本DNA提取试剂盒（磁珠法）

（仅用于科学研究）

产品编号：

FYG-6001-100T

FYG-6001-500T

存储条件：

室温避光保存；有效期1年。

产品组分：

产品简介：

本试剂盒采用独特配方的裂解缓冲液释放样本中的DNA，并使DNA与高吸附作用的磁珠结合，能从微量样本中分离纯化得到高质量的DNA样本。裂解缓冲液结合蛋白酶K可对动物来源的细胞进行裂解和消化，将DNA充分释放；DNA吸附磁珠对核酸具有很强的亲和力，能快速吸附DNA，通过洗涤等步骤快速纯化。整个过程便捷、有效、安全，DNA得率高，质量稳定，适合PCR、qPCR、文库构建等多种后续实验。

适用样本：血液、细胞、唾液、口试子

适用研究：SNP检测、PCR鉴定、qPCR检测等

自备耗材和设备：

磁力架（适配1.5 ml、2 ml离心管）；

异丙醇；

无水乙醇。

操作过程：

1.        实验准备：

首次使用时，须向漂洗液C中加入无水乙醇，无水乙醇占比70%。加入乙醇后在相应位置进行标注。

DNA吸附磁珠使用前充分混匀。

观察各溶液状态，若溶液中产生沉淀，可37℃水浴10分钟进行沉淀的溶解。

2.        样本处理：

2.1. 血液样本：取200 μl全血，加入200μl裂解液和10μl蛋白酶K，充分混匀，65 ℃孵育10分钟。

2.2. 细胞样本：取10⁶个细胞的细胞悬液，10000 rpm离心2分钟，弃上清。加入400 μl裂解液和10 μl蛋白酶K，充分混匀，65 ℃孵育10分钟。

2.3. 唾液：取200 μl唾液，加入200 μl裂解液和10 μl蛋白酶K，充分混匀，65 ℃孵育10分钟。

2.4. 口试子：向口拭子中加入500 μl裂解液和10 μl蛋白酶K，充分混匀，65 ℃孵育10分钟。12000 rpm离心2分钟，吸取400 μl水相备用。

3.        DNA提取：

3.1. 磁珠孵育：向处理后的样本中，加入280 μl异丙醇，随后加入10 μl已经充分混匀的DNA吸附磁珠；关闭盖子，涡旋混匀，室温孵育5分钟，期间上下颠倒混匀10秒钟，使磁珠和核酸充分结合。孵育结束后瞬时离心。

3.2. 弃液：将离心管置于磁力架上静置1分钟，待溶液彻底澄清后，用移液器小心去除液体。

3.3. 蛋白漂洗：加入500 μl蛋白漂洗液，关闭盖子，将离心管从磁力架上取下，上下颠倒混匀30秒钟，使磁珠充分悬浮。瞬时离心。

3.4. 弃液：将离心管置于磁力架上静置1分钟，待溶液彻底澄清后，用移液器小心去除液体。

3.5. 漂洗：加入500 μl漂洗液，关闭盖子，将离心管从磁力架上取下，上下颠倒混匀30秒钟。瞬时离心。将离心管置于磁力架上静置1分钟，待溶液彻底澄清后，用移液器小心去除液体。

3.6. 重复步骤（3.5漂洗）1次。

3.7. 晾干：用10 μl移液器吸取残留的漂洗液，室温晾干3分钟。

3.8. DNA洗脱：将离心管从磁力架上取下。加入60 - 100 μl DNA洗脱液，用移液器吹打使磁珠重新悬浮。瞬时离心。65 ℃孵育5分钟，期间轻轻晃动一次使DNA充分洗脱。

3.9. DNA收取：将离心管放置于磁力架上静置2分钟，待溶液彻底澄清后，小心将液体转移至新的离心管中，该液体即获取的DNA溶液。将DNA溶液置于适当条件保存，或直接用于后续实验。

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