- ￥2097.90
- 阿拉丁
- 上海
- M669913
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
室温
- 英文名：
Magbead Plant DNA Kit
- 库存：
期货
- 供应商：
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- 规格：
M669913-96T
|
产品简介
该试剂盒提供了一种简单、高效的植物DNA提取方案。植物细胞经物理方法破碎后，裂解产 物中的DNA在高盐存在时结合于硅基包被的磁珠表面。漂洗后， DNA被洗脱于Buffer TB或去离子 水中。提取得率与样品类型以及细胞破碎效果有很大关系，提取得到的DNA可用于二代测序、 PCR检验等下游实验。
自备仪器、试剂
1. CWE2100或CWE9600
2. 96 DW Plate, 8 tip Com, Spin tips pack
3. 无水乙醇
实验前准备以及注意事项
1. 第一次实验前按照试剂瓶标签上的说明向Buffer GW1中加入指定用量的无水乙醇；
2. 客户需配置75%乙醇用于漂洗；
3. Magbeads PN严禁冰冻、高速离心。冰冻、高速离心可能会对Magbeads造成不可逆的损害。
操作步骤
手动操作
1. 植物材料的破碎：
方案1：
1)称取经液氮充分研磨好的新鲜植物样品粉末约50-100 mg或干燥样品粉末约30 mg，迅速转 移到预先装有400 µL Buffer PLS和5 µL RNase A（10 mg/mL）的离心管中，迅速颠倒混匀 后，瞬时离心，置于恒温混匀仪70℃, 1600 rpm ，10 min。（提取多糖多酚植物在Buffer PLS中加入β巯基乙醇，使其终浓度为5%，可提高核酸提取效果）
方案2：
1）向2.0 mL离心管中加入50 -100 mg新鲜植物材料或20 mg干燥植物材料；
2）用液氮速冻后用玻璃将植物材料充分研磨至粉状；
向离心管中加入400 μL Buffer PLS和5 µL RNaseA（10 mg/mL），迅速颠倒混匀后置于恒温 混匀仪70℃, 1600 rpm ，10 min。（提取多糖多酚植物在Buffer PLS中加入β巯基乙醇，使其 终浓度为5%，可提高核酸提取效果）
方案3：
1）向2.0 mL离心管中加入50 -100 mg新鲜植物材料或20 mg干燥植物材料；
2）向离心管中加入400 μL Buffer PLS、5 μL RNaseA (10 mg/mL)和1颗钢珠，之后立即将离 心管固定于组织破碎仪中震荡破碎；
3）将离心管从组织破碎仪中取出后，瞬时离心，置于恒温混匀仪70℃, 1600 rpm ，10 min。
2. 12,000 rpm (~13,400×g)离心4 min后，转移全部上清至新的1.5 mL离心管中。
3. 向1.5 mL离心管中加入550 μL BufferZB和20 µL Magbeads PN，颠倒混匀30 s，瞬时离心， 室温静置5 min，其间颠倒混匀数次。
4. 瞬时离心，将离心管转移至磁力架吸附1min（直至溶液澄清），之后弃去溶液，期间避免接 触磁珠。
5. 将离心管从磁力架上取下，加入650 µL Buffer GW1，涡旋混匀10 s，重悬磁珠，之后将离心管 固定于25℃、 1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀2 min或涡旋震荡1 min。
6. 将离心管固定于磁力架上静置1 min，之后充分弃去溶液；
7. 重复步骤5-6；
8. 将离心管从磁力架上取下，加入650 µL 75%乙醇，涡旋混匀10 s，重悬磁珠，之后将离心管固 定于25℃、 1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀2 min或涡旋震荡1 min。
9. 将离心管固定于磁力架上静置1 min，之后充分弃去溶液
10. 重复步骤8-9；
11. 将离心管短暂离心后用移液器再次去除管底溶液，之后室温放置5-10 min 使乙醇充分挥发； 12. 向离心管中加入100 μL Buffer TB，涡旋震荡时磁珠充分悬浮与洗脱液中后将其放于65℃、
1600 rpm的恒温混匀仪上震荡裂解10分钟，或在65℃水浴锅中孵育10 min，期间涡旋震荡4次。
13. 将离心管固定于磁力架上静置2 min，待磁珠充分吸附于离心管侧壁后将洗脱液转移至新的离
心管中-20℃保存备用。
与CWE2100匹配
1. 植物材料的破碎：
方案1：
1)称取经液氮充分研磨好的新鲜植物样品粉末约50-100mg或干燥样品粉末约30mg，迅速转 移到预先装有400 µL Buffer PLS和5 µL RNase A（10 mg/mL）的离心管中，迅速颠倒混匀后， 瞬时离心，置于恒温混匀仪70℃, 1600 rpm ，10 min。（提取多糖多酚植物在Buffer PLS中加入β巯基乙醇，使其终浓度为5%，可提高核酸提取效果）
方案2：
1) 向2.0 mL离心管中加入50 -100 mg新鲜植物材料或20 mg干燥植物材料；
2) 用液氮速冻后用玻璃将植物材料充分研磨至粉状；
3) 向离心管中加入400 μL Buffer PLS和5 µL RNaseA（10 mg/mL），迅速颠倒混匀后置于恒 温混匀仪70℃, 1600 rpm ，10 min。（提取多糖多酚植物在Buffer PLS中加入β巯基乙醇，使 其终浓度为5%，可提高核酸提取效果）
方案3：
1) 向2.0 mL离心管中加入50-100 mg新鲜植物材料或20 mg干燥植物材料；
2) 向离心管中加入400 μL Buffer PLS、5 μL RNase A (10 mg/mL)和1颗钢珠，之后立即将离 心管固定于组织破碎仪中震荡破碎；
3) 将离心管从组织破碎仪中取出后，瞬时离心，置于恒温混匀仪70℃, 1600rpm ，10 min。 2. 12,000 rpm (~13,400×g)离心4 min后，转移全部上清至96 DW深孔板中；
3. 按下表向96 DW深孔板中加入试剂：
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4. 将96 DW深孔板以及磁棒套放于CWE2100仪器中，运行Cowin Plant程序。
5. 约50 min后程序运行结束，取出深孔板与磁套。将6&12列中的裂解产物转移至1.5 mL离心管 中-20℃保存备用。
与CWE9600匹配
1. 方案1：
1) 称取经液氮充分研磨好的新鲜植物样品粉末约50-100 mg或干燥样品粉末约30 mg，迅速转 移到预先装有400 µL Buffer PLS和5 µL RNase A（10 mg/mL）的离心管中，迅速颠倒混匀 后，瞬时离心，置于恒温混匀仪70℃, 1600 rpm，10 min。（提取多糖多酚植物在Buffer PLS 中加入5% β巯基乙醇，可提高核酸提取效果）
方案2：
1) 向2.0 mL离心管中加入50-100 mg新鲜植物材料或20 mg干燥植物材料；
2) 用液氮速冻后用玻璃将植物材料充分研磨至粉状；
3) 向离心管中加入400 μL Buffer PLS和5 µL RNase A（10 mg/mL），迅速颠倒混匀后置于恒 温混匀仪70℃, 1600rpm，10 min。（提取多糖多酚植物在Buffer PLS中加入5% β巯基乙醇， 可 提高核酸提取效果）
方案3：
1) 向2.0 mL离心管中加入50-100 mg新鲜植物材料或20 mg干燥植物材料；
2) 向离心管中加入400 μL Buffer PLS、5 μL RNase A (10 mg/mL)和1颗钢珠，之后立即将离 心管固定于组织破碎仪中震荡破碎；
3) 将离心管从组织破碎仪中取出后，瞬时离心，置于恒温混匀仪70℃, 1600 rpm ，10 min。
2. 12,000 rpm (~13,400×g)离心4 min后，转移全部上清至96 DW深孔板中；
3. 按下表向96 DW深孔板中加入试剂：
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4. 将96 DW深孔板以及磁棒套放于CWE9600仪器中，运行程序。
5. 约50 min后程序运行结束，取出深孔板与磁套。将Plate 6中的裂解产物转移至1.5 mL离心管 中-20℃保存备用。
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文献和实验以下操作按照天根产品 DP321 快捷型植物基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 植物叶片2. 研钵 液氮3. 移液器及配套无菌枪头（200 μl ，1ml），1.5 ml离心管4. 异丙醇，70%乙醇，干净吸水纸5. 涡旋振荡器，金属浴/水浴，台式离心机本文版权归天根生化科技（北京）有限公司所有,仅供个人学习使用,请勿转载
、 实验流程 1、 总DNA提取 使用DNA提取试剂盒提取植物基因组DNA，通过紫外分光光度计检测或用标准品跑胶检测。一般来说，100ng的基因组DNA作为反应模板是足够的。 2、 EcoR1酶消化（20ul体系/样品） 3、Mse1酶消化（20ul体系/样品） 5、 预扩增（20ul体系/样品） sample 4ul Primer
Genomic DNA Mini Kit 人或动物组织及培养细胞的基因组DNA提取试剂盒 29、QuickSpin BactoGenomic DNA Mini Kit（细菌基因组DNA提取试剂盒） 30、QuickSpin YeastoGenomic DNA Mini Kit（酵母基因组DNA提取试剂盒） 31、QuickSpin Plant Genomic DNA Mini Kit（植物及丝状真菌基因组DNA提取试剂盒） 31、QuickSpin Plasmid Miniprep Kit（质粒
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