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- 英文名:
Dual-Glo™ Luciferase Assay System
- 供应商:
普洛麦格
- 规格:
100ml
说明:
Dual-Glo. Luciferase Assay System(Dual-Glo. 双萤光素酶检测系统) 是一种均质检测系统,能够快速简便地从一个样品中定量两个报告基因的稳定的萤光信号。这种方便的“加样- 检测”系统可直接用于未经过预处理或预裂解的细胞,产生萤火虫和海肾萤光素酶两种发光信号。Dual-Glo. 双萤光素酶检测系统为基于细胞的高通量筛选提供了高Z' 因子。Dual-Glo. 系统可以构建内对照来减少样品间的差异,因为内对照能减少非特异性因素( 如细胞毒性) 造成的假阳性和假阴性结果。在Dual-Glo. 双萤光素酶检测中,主报告基因的活性与特异性刺激互相影响,而共转染的对照报告基因活性提供了一个归一化的内对照。此系统是为批处理96 孔和384 孔板而优化设计,与大多数哺乳动物细胞培养基兼容。
特点:
. 精确度和准确性更高:使用一个共报告基因作为内对照,减少了细胞数、细胞健康程度、转染效率和非特异性细胞反应的影响,使主报告基因的结果归一化 。
. 均质检测模式:操作步骤更少,可以直接在生长培养基上检测双报告基因,无需离心或裂解。
. 稳定的信号:对批量或连续处理96 或384 孔板的灵活性更强,每一种萤光信号在加入试剂长达2 小时后还能检测到。
. 方便:使用这种简单的两步法的系统筛选效率更高,对于任何一台发光检测仪都适用。无需配置进样器。
. 动态范围宽:无需稀释样品就可直接分析高和低的报告基因活性。每个报告基因的线性范围都超过至少6 个数量级的酶浓度。
. 可定制或批量定购:详情请联系普洛麦格( 北京) 生物技术有限公司。
储存条件:Dual-Glo. Substrates 储存于-20℃。Dual-Glo. Buffers
要低于25℃储存。
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文献和实验The Split Luciferase Complementation Assay
A split luciferase complementation assay to study protein–protein interactions within Arabidopsis protoplasts in 96-well plates is described in this protocol. Two proteins of interest, a bait and prey, which are genetically fused to amino
superskyfly 我自己都觉得我自己很牛,千百人都做出来的试验,我就是做不出来。质粒用的是Promega p4.32-NF-kB-Luc, 转染用的是Invitrogen的Lipofactamin, 激活用的是Sigma生产的PMA和PHA-P,Assay用的是Promega dual,结果加了PMA和PHA的和不加的读数几乎没有区别。加了compound的和不加的也没有区别。 用过PC3, Jurkat, A549,HCT116都是一样。
96-well Plate Dual Luciferase Assay--96孔板荧光素酶检测
Let sit at Rt for >15’ Suck off the medium of the 96 wells and add 100 ul of mixture (step 5e) by multichanel pipette. Let sit in incubator for >1.5 hours. Add 100 ul of D20F and let it grow for two days. Dual luciferase assay: Reagents:
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