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- 云舟生物专有的miniVec™质粒是一种面向细胞和基因治疗应用的效力更显著、安全性更高且适合于大规模生产的微环DNA载体。
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- 2026年04月18日
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云舟生物科技（广州）股份有限公司
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定制服务
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miniVec™技术详情
图1展示了miniVec™系统的工作原理。作为系统的关键组成部分，miniHost™是一种经过基因改造的大肠杆菌菌株，包含一个生长抑制基因。经过miniVec™质粒转化，miniHost™细胞可以在常规LB培养基中培养，而无需使用抗生素筛选。从miniVec™骨架转录获得的VecSeqB可以通过RNA-RNA互补靶向生长抑制基因转录产物的VecSeqA序列，从而阻止生长抑制基因的翻译。因此，只有成功转化的宿主细胞才能大量增殖，从而产生大量的miniVec™质粒。
这种无需抗生素的生产方案在增强安全性和制药过程中具有显著的优势。云舟生物的miniVec™独特技术进一步保证了宿主菌细胞的存活性，在载体生产过程中消除了LB培养基中需要额外添加剂的需求。
质粒产量提升
图2 与传统质粒相比，miniVec™的质粒产量增加。使用相同的条件将不同表达系统的传统质粒和miniVec™质粒分别转化大肠杆菌，以实验室规模发酵培养，然后测量对应的质粒产量。
转基因表达量提升
与传统的质粒相比，miniVec™质粒经过体外验证表明可增强转基因的表达。这是因为去除了细菌序列的微环DNA骨架进一步降低了哺乳动物细胞中的免疫反应风险，减轻宿主细胞的应激反应，有利于提升细胞的营养物质摄取和转运水平。
miniVec™质粒由于其简洁的序列、对宿主细胞的代谢负担低以及高安全性等特点， 使其同时也是应用于piggyBac和睡美人（Sleeping Beauty） 转座子系统的理想载体选择。miniVec™转座子载体在细胞中表现出相当高的转座效率。
Sleeping Beauty
图5 使用传统质粒和miniVec™质粒同时构建piggyBac和Sleeping Beauty转座子载体，随后转染HEK-293T细胞。流式细胞术检测转座效率。
更安全的病毒包装原料
图6 使用传统质粒与miniVec™质粒包装慢病毒的比较。（A）使用miniVec™质粒可获得更高的慢病毒滴度。功能性滴度通过qPCR法测量。（B）使用传统质粒与miniVec™质粒平行生产的慢病毒等体积转导靶细胞，比较EGFP的表达。
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文献和实验，共价闭合环状质粒DNA复性快，而线性的染色体DNA复性缓慢，经过离心与蛋白质和大分子RNA一起沉淀下去。 3．器材 超净工作台，接种环，酒精灯，台式离心机，旋涡混合器，微量移液取样器，1.5ml微量离心管，恒温摇床，摇菌试管，双面微量离心管架，试管架，标签纸，磁力搅拌器等。 4．试剂 Pinpoint™xa-3质粒载体菌，pBS-CHI载体菌，LB培养基1000ml（含100µg/ml氨苄青霉素），葡萄糖/Tris/EDTA(GTE)溶液（溶液 I），NaOH/SDS溶液(溶液 II
， 例如， 一种 H 1－RNA启动子， 一种 pol III 的三级启动子， 被用于质粒载体直接转录短的发卡状RNA随后进入细胞产生SiRNA。同样地，pol III 的 U6 启动子 也被用做产生短发卡状RNA或者正义和反义的 SiRNA。 短的发卡状RNA能摹拟自然状态产生 miRNA。然而，目前的关于设计和产生这样人工的短的发卡RNA来产生RNAi的数据依然没有统一的。 例如， 发卡环状部分的大小（例如说长于7个核苷）和序列在一个报告中被发现是非常重要的， 同时环较短（1，4，6个核苷）被其它人成功
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