多能干细胞免疫荧光检测试剂盒(Nanog, 兔抗, 绿色荧光

碧云天生产的多能干细胞免疫荧光检测试剂盒(Nanog, 兔抗, 绿色荧光)，英文名为Pluripotent Stem Cell Immunofluorescence Assay Kit (Nanog Rabbit mAb, Green)，是一种通过免疫荧光染色法检测多能干细胞未分化(undifferentiated)状态的标志物Nanog的多能干细胞检测试剂盒。

本试剂盒中的Nanog兔单抗特异性识别人或小鼠的Nanog，可以结合荧光显微镜或高内涵筛选(High content screening, HCS)等，广泛应用于iPS重编程效果的判定，多能干细胞的干性(stemness)评估，以及干细胞的分化检测等。

本试剂盒提供了固定液、洗涤液、封闭液、一抗、荧光标记二抗、细胞核荧光染色液、封片液，使用时不必再配制其它任何溶液。提供了细胞核荧光染色液，可以把细胞核染成蓝色荧光。使用本试剂盒检测人胚胎干细胞H9和小鼠胚胎成纤维细胞MEF (CF1系)的效果参考图1。

图1.碧云天多能干细胞免疫荧光检测试剂盒(Nanog, 兔抗, 绿色荧光)检测人胚胎干细胞H9和小鼠胚胎成纤维细胞MEF (CF1系)的染色效果图。H9细胞培养在铺有饲养层MEF (CF1系)细胞的培养板上。培养2-3天后使用本试剂盒做免疫荧光染色。MEF细胞(白色箭头处为饲养层MEF细胞核DAPI染色)作为阴性对照细胞核无绿色荧光，而人类胚胎干细胞H9细胞核呈现Nanog阳性染色。实际染色效果会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异，图中效果仅供参考。

本试剂盒中提供的封闭液为碧云天的QuickBlock™免疫染色封闭液，仅10分钟左右即可完成封闭。

使用本试剂盒染色后Nanog呈绿色荧光，其最大激发波长为495nm，最大发射波长为519nm；细胞核呈蓝色荧光，其最大激发波长为364nm，最大发射波长为454nm。

Nanog基因编码的蛋白质是一种DNA结合同源盒转录因子，主要在胚泡的内细胞团(Inner cell mass, ICM)中表达[1]。相关研究表明，Nanog基因表达与细胞的分裂、分化情况以及细胞的干细胞特性密切相关[2,3]。在分裂旺盛的细胞中，Nanog基因高表达，而随着细胞分化程度的加深，Nanog基因的表达量逐渐降低，直至在完全分化的细胞中不表达。研究成体组织中Nanog的表达情况有利于了解成体干细胞的分子生物学特性及其分裂分化机制。此外，Nanog的另外一个功能是在肿瘤发生发展中扮演重要角色，可作为肿瘤诊断标志物[4]。

如果检测96孔板内的样品，本试剂盒可以检测100-500个样品(抗体重复使用0-4次)；如果用于检测6孔板内的样品，通常可以检测25-50个样品(抗体重复使用4-9次)；如果检测组织切片至少可以检测50个样品。

包装清单：

保存条件：

固定液、细胞核染色液(DAPI) -20ºC保存，其余试剂均4ºC保存，半年有效。其中山羊抗兔488和细胞核染色液(DAPI)须避光保存。

注意事项：

固定液对人体有害，操作时请特别小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。

免疫荧光染色时，请注意回收使用过的一抗和二抗。回收后通常至少可以重复使用5次，如果出现浑浊、沉淀等异常现象，应停止使用。

需使用可以观察绿色荧光和蓝色荧光的荧光显微镜或高内涵分析仪。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。