BeyoFC™ PI染色液(50X)

碧云天的BeyoFC™ PI染色液(50X)，即BeyoFC™ Propidium Iodide Staining Solution (50X)或BeyoFC™碘化丙啶染色液(50X)，是一种基于PI特异性染色细胞膜丧失完整性的坏死细胞的特性，从而能够特异地对坏死细胞进行荧光染色、用于流式细胞术检测时染色和排除死细胞的红色荧光染色液。

碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一种非细胞膜渗透性荧光染料，不能穿过具有生物活性的细胞膜，只能通过细胞膜的破损区域从而到达细胞内[1, 2]，因此对于具有完整细胞膜的正常细胞或凋亡细胞不能染色。而对于坏死细胞，其细胞膜的完整性丧失，PI可进入细胞并与核酸结合，从而可以产生红色荧光，这种结合很少或几乎没有序列偏好，每4-5个碱基对插入一个PI分子。

PI的分子式为C27H34I2N4，分子质量为668.39，CAS number为25535-16-4。形成DNA复合物的最大激发光波长为535nm，最大发射光波长为617nm。PI和DNA复合物的激发光与发射光光谱参考图1。

图1.PI和DNA复合物的激发光谱与发射光谱。

在流式细胞仪检测时，死细胞的存在可能会导致检测结果准确性降低。因为死细胞可能会与抗体发生非特异性结合，从而产生假阳性结果，并降低真实阳性信号的动态范围。同时，通常死细胞具有更高的自发荧光，且荧光信号分布广泛，这会导致较高的背景荧光，使对弱阳性样品及阳性比例较低样品的区分变得困难。常规操作中的离心、洗涤等步骤都会产生的少量死细胞，细胞活性较低的样品如非免疫组织细胞悬液、较长时间放置的血液样品等也会增加死细胞比例，因此流式实验中非常有必要通过PI染色、7-AAD染色等类似方法实现对于死细胞的荧光染色，以便于后续流式分析时排除死细胞。

本染色液已通过流式分析检测，可以简单便捷地进行坏死细胞检测和分群，同时又不影响正常细胞的状态。使用本产品进行坏死的细胞流式细胞仪检测的效果请参考图2。

图2.碧云天BeyoFC™ PI染色液(50X) (C1734)用于坏死细胞流式检测的效果图。100万个小鼠脾脏细胞(分离后冰上保存约48小时)，用100µl BeyoFC™流式检测细胞染色缓冲液(C1711)重悬，加入2µl本产品并孵育10分钟后进行流式检测。图中可见PI染色组出现了红色荧光阳性的细胞群(PI组)。Control组为不加PI的阴性对照。实测数据可能会因细胞类型、细胞凋亡情况、检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。

按照每100µl细胞重悬液使用2µl BeyoFC™碘化丙啶染色液(50X)进行检测，每1ml本产品可进行500次检测。

包装清单：

产品编号	产品名称	包装
C1734-0.5ml	BeyoFC™ PI染色液(50X)	0.5ml
C1734-2ml	BeyoFC™ PI染色液(50X)	2ml
—	说明书	1份

保存条件：

-20ºC避光保存，至少一年有效。

注意事项：

如果有细菌或真菌污染，可能会严重影响检测效果。

染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致坏死细胞数量的增加。

荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

如需进行细胞周期检测，推荐使用碧云天的细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒(C1052)、一步法细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒(C1055)或BeyoFC™ PI/RNase即用型染色液(C7131)。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。