PDX模型

PDX模型构建方法

首先肿瘤组织标本应在含有胎牛血清（FBS）、青霉su/链霉su的冷溶液中制备，以提高移植的成功率。PDX所用的肿瘤组织有两种形式，病人肿瘤组织切成的2-3mm3碎片或者单细胞悬液。肿瘤标本在移植前用上述溶液洗涤三次。在4-8周龄免疫缺陷小鼠的下背部创建小切口用于皮下移植，并将肿瘤组织样本移植到手术区域。当肿瘤大小达到1-2cm3时意味着移植成功，平均需要2-4个月，如果在6个月内没有发现肿瘤，移植就没有成功。移植瘤长到足够大时可以再解剖重新移植到其他小鼠，第一代为F1，第二、三代为F2、F3。第三代（F3）及以上小鼠可用于药物治疗研究。

 构建PDX模型的步骤

位置选择

PDX移植效率因肿瘤类型、植入部位、肿瘤侵袭性和受体小鼠类型而异，肿瘤组织可以移植到肾包膜下、皮下、原位。一般来说，皮下和原位部位都是常用的。皮下移植：皮下移植是目前常用的移植手段，这种模型提供了肿瘤细胞的异质性，很少发生转移，而且较好地模拟了最初的肿瘤微环境。肿瘤植于皮下，易于观察和测量肿瘤的生长情况，操作相对简单，技术难度不高。对于消化系统肿瘤，如结肠癌、胃癌和食管癌等，皮下移植往往有较高的成功率。肾包膜下移植：肾包膜下具有丰富的血管结构，能够提供充足的营养、激素和氧气促进早期肿瘤组织生长，并保留原发肿瘤的异质性和遗传特征，可以极大地提高肿瘤移植的成功率。但是缺点是对实验人员有很高要求，需要丰富的外科手su经验。此外，肿瘤的大小不易观察和测量。原位移植：原位异体移植PDX模型（PDOX）可以产生转移，准确模拟原发肿瘤的自然环境，通常用于转移瘤的研究。

小鼠选择

PDX模型的受体是具有免疫缺陷的小鼠，目前常见的可用于PDX模型的小鼠品系有四种，其各自特点如下：裸鼠：裸鼠（nude mice）无胸腺，缺乏成熟的T细胞，B淋巴细胞功能较低，免疫球蛋白G含量低下，因此具有较低的免疫力，移植排斥少。SCID小鼠：SCID小鼠是由于第16号染色体上的隐性基因发生突变而产生的。