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动物实验
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第一部分 疾病动物模型
一、肿瘤动物模型
根据肿瘤动物模型的制备方法或者来源分为三大类
1.自发性肿瘤动物模型
优点：发病机制及机理较接近人。
缺点：数量及种类非常有限，无法满足实验的需要。
2.诱发性肿瘤动物模型
优点：发病机制及机理也较接近人。
缺点：几乎所有诱发剂对人体都有很大的毒性，对实验人员存在较大的风险；实验周期非常长，且诱发成功的时间不一致，无法在同一条件下大批量实验。
3.移植性肿瘤动物模型
优点：可以在同一条件下大批量移植，实验周期较短，对动物的治病机制亦与人类相似，已成为目前应用最为广泛的造模方法。
| 模型类型 | 移植部位 | 细胞类别 |
| 肺癌 | 肺脏、皮下 | |
| 胰腺癌 | 胰腺、脾脏、皮下 | |
| 结肠癌 | 结肠壁皮下 | |
| 肝癌 | 门静脉、肝脏、皮下 | |
| 胃癌 | 胃体、皮下、腹腔 | |
| 直肠癌 | 直肠壁、皮下 | |
| 乳腺癌 | 乳腺、皮下 | |
| 肾癌 | 肾实质、肾被膜、皮下 | |
| 膀胱癌 | 膀胱壁、皮下 | |
| 黑色素瘤 | 皮下 | |
| 多发性骨髓瘤 | 骨髓腔、血管内、皮下 |
二、其它疾病动物模型
| 模型种类 | |
| 糖尿病 | 1.自发性 动物自然发生的疾病, 与人类某种疾病有相似之处 ,或通过遗传育种培养而保留下来的疾病动物。db /db 小鼠由 C57BL KsJ 近亲交配株常染色体隐性遗传衍化而来 ,属 2 型糖尿病模 型。一个月时开始贪食及发胖, 继而产生高 血糖、高血胰岛素, 胰高血糖素也升高。 2.诱发性 通过化学药物特异性破坏胰岛β 细胞，最常用的药物有链脲佐菌素和四氧嘧啶，具有造模 稳定,快速。 |
| 肝损伤 | 导致的肝损伤主要有化学性肝损伤、药 物性肝损伤、免疫性肝损伤和酒精性肝损伤等类 型，其临床表现为肝坏死、脂肪肝、肝纤维化、肝硬 化以及肝癌等。 1.化学性 常用化学性肝毒物质有四氯化碳 （CCl4 ）、氨基半乳糖（D-gal）、硫代乙酰胺、黄曲霉 素等。 2.药物性 对乙酰氨基酚、异烟肼、环孢素 A、四环素和雷公藤等。 3.免疫性 卡介苗（BCG）加脂多糖（LPS）诱导法，刀豆蛋白 A（ConA）诱导法。 4.酒精性 动物过量饮酒可造成 肝脏不同程度的损害，轻度发展为脂 肪肝、肝纤维化 ,重度可发展为肝硬变或肝细胞癌。 |
| 脂肪肝 | 脂肪肝成为国内高发疾病， 普通人群的发病率约为 10%左右， 已出现逐年升高的趋势。目前最常用的方法是高脂饮食，该方法简便、 重复性好、 价格低廉、 动物死亡 率低、 复制率高。 |
| 乙肝 | 通过显微注射法将HBV 基因组注入核内，建立血清中可稳定复制和表达 HBsAg 的 HBV 转基因小 鼠 。可用于开展抗病毒药物和乙 肝发病机制的研究工作。 |
| 脊髓损伤 | 脊髓损伤是一种致残率很高的疾 病, 给家庭、社会均带来沉重的负担。 随着工业、建筑业和交通 运输的飞速发展, 脊髓损伤患者数量呈逐年上升趋势。常用的造模方法有以下几种： 1）脊髓撞击伤模型 2）脊髓压迫伤模型 3）脊髓横断损伤 4）脊髓牵拉损伤模型 5）脊髓缺血性损伤 |
| 脑中风 | 脑中风是又称脑血管意外，是世界上最重要的致死性疾病之一。以脑部缺血及出血性损伤症状为主要临床表现的疾病，具有极高的病死率和致残率，主要分为出血性脑中风和缺血性脑中风，以脑梗塞最为常见。 1.缺血性 线栓法、开颅电凝法、光化学法、微栓子栓塞法、去除大鼠脑左侧皮层血管法 2.出血性 自体血注入法、自发性、胶原酶注入法 |
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文献和实验是靶点药物的临床试验病人筛选和预测性生物标志物的研究中。 如何建立PDX模型 1、原始肿瘤样本的获得与处理 原始肿瘤样本可以是手术样本及穿刺样本，甚至可以是血液或体液中分离得到的循环肿瘤细胞（ CTCs）。样本可以来源于实体肿瘤组织，也可以来源于造血系统。第一次植入时，可将患者来源的肿瘤切成 1 ～ 2 mm大小的肿瘤团块或将肿瘤消化成单细胞悬液，来自患者血液的细胞也是以悬浮液的形式植入免疫缺陷小鼠。肿瘤本身的生存能力以及样本的无菌性是决定肿瘤植入免疫缺陷小鼠的成功与否的关键
脑梗是研究缺血性脑中风的经典动物模型。沿颈部正中开口，钝性分离皮下组织，游离出颈总动脉1.5cm，穿线备用，向远心端找到颈外侧动脉，游离涌现结扎，提起颈总备用线，在近心端，远心端用动脉夹夹住，在近心端动脉夹处，用5mL注射器针头刺破血管，稍微提起动脉夹，用镊子夹住线栓，从小口插入动脉后，去掉远心端动脉夹，然后用镊子夹住线栓，线栓插入到颈内距分叉处1.8-2.0cm，用备用线将颈总和线栓一起结扎住，最好是结扎双道，记录线栓插入时间，在将动脉夹另一边近心端颈总结扎住，去掉动脉夹，注意缝合时不要
心肌梗死是发达国家居民的主要致死因素之一，动物深度麻醉后，胸腔正中靠左0'5㎜剪开皮肤长约1.5CM，钝性分离肌肉，剪断第3 4根肋骨，止血钳关闭胸腔防止暴露时间太长，拿开止血钳后开口器打开胸腔暴露心脏，8-0带针缝合线结扎冠状动脉前降支，结扎后看见心尖变白，关闭胸腔，缝合，造模成功后前三天注射抗生素
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