- ￥2340
- 西格
- XG-P3111
- 国产
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
39
- 保质期：
2 年
- 供应商：
上海西格
- 保存条件：
-20°C
- 规格：
250U
描述：
蔗糖磷酸化酶属于糖基水解酶 13 家族，是一种催化转移葡萄糖苷键的酶，能够催化蔗糖和无机磷酸盐合成1-磷酸-葡萄糖。该酶主要以蔗糖、1-磷酸-葡萄糖为供体，多类物质如多羟基的糖和糖醇、酚羟基、羧基等为受体，催化合成各种糖苷 。 该 蔗糖磷酸化酶 （ SucrosePhosphorylase ） 通 过 重 组 制 备 而 得 ， 其 催 化 蔗 糖（ sucrose ） 的 磷 酸 化 反 应 ， 生 成 D-fructose 和α-D-glucose-1-phosphate，反应式为：
Sucrose+Pi=α-D-glucose-1-phosphate+D-fructose。该酶的比活>100U/mg，该酶通过改造可耐热，反应温度可在 30~65℃进行，最佳反应温度为 55℃。在 60℃孵育 60h 后活性损失<30%。
活性定义：1 单位指在 37°C，pH 7.6 条件下，每分钟由蔗糖催化生成 1.0 μmole 的 D-fructose 所需的酶量。反应缓冲液为 100mM KH2PO4，200mM Sucrose，pH7.6。
保存：-20℃长期保存。
| 货号 | 产品名称 | 规格 |
| XG-P3111 | 蔗糖磷酸化酶（Sucrose Phosphorylase） | 250U |
PCR反应条件优化：
1、变性温度和时间：
蔗糖磷酸化酶（Sucrose Phosphorylase）保证模板DNA解链完全是保证整个PCR扩增成功的关键。加热90~95°C, 30~60s，再复杂的DNA 分子也可变性为单链。温度过高或高温持续时间过长，可对Taq酶活性和dNTP分子造成损害。
2、复性温度和时间:
PCR扩增特异性取决于复性过程中引物与模板的结合。复性温度越高，产物特异性越高。复性温度越低，产物特异性越低。需根据引物的Tm值具体设定。
3、延伸温度和时间:
一般位于Taq酶最适作用温度70~75°C之间。引物小于16个核苷酸时，过高的延伸温度不利于引物与模板的结合，可以缓慢升温到70~75°C。延伸反应时间，可根据待扩增片段的长度而定，小于1kb, 1min足够；大于1kb需加长延伸时间。Taq酶可根据1kb/min增加时间。这里需要注意，延伸时间过长可能出现非特异扩增。因此需要设置恰到好处的延伸时间。
4、循环数:
其他参数选定后，PCR循环次数主要取决于模板DNA的浓度。理论上说20〜25次循环后，PCR产物的积累即可达到最大值，实际操作中由于每步反应的产率不可能达到100%，因此不管模板浓度是多少，20~30次是比较合理的循环次数。循环次数越多，非特异扩增增加。
PCR的特点：
特异性强：使用两对引物进行扩增提高了特异性，第一轮PCR中由外引物错配产生非特异性产物，同时在第二轮PCR中内引物与错误片段配对扩增的概率极低，降低了扩增多个靶位点的可能性。
灵敏度高：进行两轮PCR扩增，可以执行更多的循环，从低拷贝样本中扩增得到足量的产物，克服了单次扩增平台期限制，提高PCR的灵敏度。
降落PCR与温度梯度PCR的区别：
降落PCR与温度梯度PCR都是对反应体系中的退火温度进行优化，但两者在原理上有所不同。
温度梯度PCR是为了找到最适的退火温度，设置不同的退火温度进行多管PCR，将其分别放置在PCR仪中的不同温度模块进行反应，最终找到最适的退火温度，并进一步以此退火温度进行普通PCR扩增。
降落PCR是为了提高反应的特异性，通过设计一系列不断降低的退火温度，在同一PCR管内进行PCR扩增，最终获得大量的特异性扩增产物。
与温度梯度PCR相比，降落PCR更有优势。温度梯度PCR需要多次反应或多管反应找到最适的退火温度，之后还需以找到的最适退火温度再次进行PCR，才能得到较好的扩增效果，操作比较繁琐。降落PCR只需一次反应就可以获得很好的扩增效果，避免了对每对引物进行最适退火温度的优化和测定工作。
降落PCR适用于不确定引物的最适Tm值，或引物扩增效果不佳时，不了解目的模板同源性程度，使用降落PCR可以快速、特异的得到目的扩增片段。根据不同实验的需要，降落PCR还可与其它PCR方法同时使用，如实时定量降落PCR、竞争降落PCR等。
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文献和实验蔗糖磷酸化酶 sucrose phospholylase 催化蔗糖的磷酸分解的酶。EC．2．4． 1．7．蔗糖＋Pi α-D-葡萄糖-1磷酸＋果糖。在添加蔗糖的培养基上生长发育的细菌的菌体中可以发现该酶（例如Pseudomonas saccharophila）。虽然，反应的平衡点有几个是偏向于右方，但在有捕捉Pi（无机磷酸）的试剂存在下，可偏向左方，即进行蔗糖的合成。该酶也催化葡糖基转化反应。 蔗糖＋L－山梨糖 α－葡糖基－山梨糖＋果糖蔗糖
催化糖苷键进行可逆的磷酸分解的一类酶之总称。参与生物体内多糖和核苷等糖苷的合成和分解。狭义的指α -葡聚糖磷酸化酶。（ 1）α -葡聚糖磷酸化酶（α -glucan phosphorylase），广泛分布于动物（肝脏），植物、微生物中，已从马铃薯中分离出结晶。淀粉（淀粉磷酸化酶）和糖原（糖原磷酸化酶）的磷酸分解，生成 1- 磷酸葡萄糖。 （ 2）蔗糖磷酸化酶：在微生物嗜糖假单胞菌（ Pseu－ domonas
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