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- 百奥莱博
- ALH266-PTO
- 北京
- 2025年07月16日
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- 库存：
829
- 英文名：
Reverse transcriptase Kit
- 保质期：
1年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
特别提示：包括反转录试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：反转录试剂盒
英文名称：Reverse transcriptase Kit
产品规格：50次|100次
本试剂盒是可以除去基因组DNA进行 Real Time RT-PCR 反应的专用反转录试剂。本试剂盒为一管式反转录预混Mix，5 × TRUE RT MasterMix中含有反转录第一链合所需的所有试剂（RTase、RNase Inhibitor、Random primers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、Buffer）。 通常Real Time RT-PCR等实验需要先用DNase I消化去除RNA中残留的基因组DNA(gDNA) ，但是传统DNase I 处理复杂并容易造成 RNA 的降解和损失。本试剂盒中使用了具有DNA分解活性的特殊 gDNA Eraser 2-5分钟消除gDNA残留，不需要DNase 消化和后续繁琐步骤。反转录步骤采用通过基因重组技术克隆表达的点突变型RNase H活性缺失的M-MuLV反转录酶。本酶M-MuLV(RNase Hˉ)的RNase H活性缺失，与M-MuLV 相比，具有更强的延伸能力和稳定性，可用于较长的cDNA合成，具有更高的检测效率和敏感度。
试剂盒组分(100次)：
gDNA Eraser-——————————————100μl
10×gDNA Eraser Buffer—————————100μl
5×TRUE RT MasterMix——————————400μl
RNase free H2O—————————————2ml
注意事项：
1. 避免RNase污染。
2. 为保证反转录成功建议使用高质量的RNA样品。
3. gDNA Eraser 、5 × TRUE RT MasterMix非常粘稠，溶液容易吸附在管壁和吸头外导致损失，用前请点甩离心后使用，并且避免吸头外壁沾附损失。gDNA Eraser可以每次按照0.8μl使用，5 × TRUE RT MasterMix可以每次按照3.8μl使用，也不影响使用效果。
储存条件：-20℃，有效期1年。
本制品别名：通用反转录PCR试剂盒|去除基因组DNA反转录PCR试剂盒|通用RT-PCR试剂盒
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文献和实验法 RT—PCR 反应更加快速、灵敏，操作简便，污染率低，RNA 二级结构减少，并且因为聚合酶有校正活性，从而降低了 PCR 反应的错配率。而在两步法中，反应的精确度高，人为的误差相对较小，并且由于在第一步中将 RNA 反转录为 cDNA，从而更易于保存。 另外，两步法的整个过程比一步法更节省费用。传统检测方法的样品用量一般在 ug 级，而在 RT—PCR 检测系统中样品用量陡降至 pg 级。这就在很大程度上降低了实验操作的难度，特别是 mRNA 样品制备的过程得以简化。 3. 应用 对基因
为了研究 RNA 的功能，通常需要通过反转录过程将 RNA 转化为更稳定的互补 DNA（cDNA）。之后 cDNA 可通过分子克隆、PCR 和测序等技术做进一步的研究。因此，反转录过程是许多 RNA 实验研究流程的关键步骤。 为了获得更为准确的研究结果，本期总结了反转录过程中需要考虑的一些因素，以期能够抛砖引玉，给你的实验研究带来些许帮助。 本期内容 RNA 模板制备 基因组 DNA 的去除 反转录酶选择 引物选择 主要反应组分 反应温度和反应时间 第一链和第二链 cDNA 合成 注
1. 反转录的一般实验流程 2. 反转录反应的关键因素 · RNA提取方法的选择 · RNA质量的评价与鉴定 · 反转录引物类型的选择 · 反转录酶的选择
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