- ￥460 - 3680
- gelatins/江蓝纯
- JC_CC5596
- 国内
- 2025年07月07日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
M-MLV 反转录酶
- 保质期：
3年
- 供应商：
上海机纯实业有限公司
- 保存条件：
低温保存
- 规格：
10000 U / 100000 U
| 规格： | 10000 U | 产品价格： | ￥460.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 100000 U | 产品价格： | ￥3680.0 |
M-MLV 反转录酶
产品特点
本产品采用大肠杆菌表达体系，是经过高度纯化的重组酶。该酶的RNA酶H活性很低，具有更高的热稳定性，广泛应用于第一链 cDNA 的合成，反转录温度高达55°C，特异性和 cDNA 产量明显提高，长度明显大于第一、第二代反转录酶。本产品适合于从各种组织中提取的总 RNA 或 mRNA 为模板合成 cDNA 第一链、实时荧光定量RT-PCR、3’-和 5’-RACE 等。
它具有下列特点：
1. 逆转录效率高，第一链 cDNA 产量高；
2. 最长可合成 5 kb 的 cDNA 片段；
3. 逆转录反应的模板总 RNA 范围可以在 10 ng-5 μg 之间。。
成分规格
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产品组成 |
规格 |
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M-MLV 反转录酶(200 U/μl) |
50μl/500μl |
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5×RT Buffer(含 0.25M DTT) |
1ml/5*1ml |
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-20℃，有效期 1 年 | |
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本产品仅供科研使用 ，不得用于其它用途 | |
使用方法
（注 意：总反应体积为20 μl，总RNA的量为10 ng - 5 μg，若起始RNA的量小于50 ng，则建议加入RNA酶抑制剂RNasin）
1. 将5× RT Buffer和M-MLV 反转录酶溶解并置于冰上备用，准备好RNA模板、引物（oligo dT，随机引物，或者二者的Primer Mix、或者特异性引物），dNTPMix、DEPC-ddH2O等。
2. 在无 RNase的PCR管中加入引物，总 RNA (10 ng - 5 μg)或mRNA(1 - 500 ng)，4μldNTP (2.5 mM each)，4 μl 5 × RT Buffer，1 μl M-MLV 反转录酶，补足DEPC-ddH2O至 20 μl。
3. 振荡混匀，离心数秒使反应液聚集于 PCR 管底部。
4. 42℃保温 15-60 min。85℃孵育 5min，反应结束后，短暂离心，置于冰上冷却。
5. 该产物可直接用于第二链的合成或 RT- PCR 扩增反应，保存请置于-20℃。
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文献和实验M-MLV第一链cDNA合成试剂盒-技术手册一、 试剂盒组成 Components SK2027 SK2028 5×M-MLV Reaction Buffer 100µl
反转录酶（Reverse transcripatase）是以RNA为模板指导三磷酸脱氧核苷酸合成互补DNA（cDNA）的酶。哺乳类C型病毒的反转录酶和鼠类B型病毒的反转录酶都是一条多肽链。鸟类RNA病毒的反转录酶则由两上亚基结构。真核生物中也都分离出具有不同结构的反转录酶。这种酶需要镁离子或锰离子作为辅助因子，当以mRNA为模板时，先合成单链DNA（ssDNA），再在反转录酶和DNA聚合酶Ⅰ作用下，以单链DNA为模板合成“发夹”型的双链DNA（dsDNA），再由核酸酶S1切成
依赖于RNA合成DNA的酶。也称为RNA依赖性DNA聚合酶。是含于病毒——致癌RNA病毒（Retrovirus）粒子中的一种酶，以单链RNA为模板，合成具有与此相辅的核苷酸序列的DNA。是1970年由H.M.Temin等和D.Baltimore各自独立发现的。通过此酶首先从病毒RNA合成RNA-DNA杂化物，再从这杂化物合成双链DNA。仅分解 RNA- DNA杂化物RNA部分的核糖核酸酶H活性存在于此酶上。开始认为此酶仅存在于RNA病毒中，但后来由未感染病毒的细胞和正常组织中也分离出同样
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