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- 南京万木春
- 进口/国产
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- 2026年09月15日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
/
- 库存：
现货库存
- 供应商：
南京万木春
- 肿瘤类型：
/
- 细胞类型：
原代细胞
- 品系：
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- 组织来源：
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- 相关疾病：
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- 物种来源：
/
- 免疫类型：
/
- 细胞形态：
/
- 是否是肿瘤细胞：
否
- 器官来源：
/
- 运输方式：
常温/干冰
- 年限：
/
- 生长状态：
/
- 规格：
5×10^5/T25方瓶
星形胶质细胞是哺乳动物脑内分布最广泛的一类细胞，也是胶质细胞中体积最大的一种。用经典的金属浸镀技术（银染色）显示此类胶质细胞呈星形，从胞体发出许多长而分支的突起，伸展充填在神经细胞的胞体及其突起之间，起支持和分隔神经细胞的作用。星形胶质细胞还具有营养作用，协助神经元的代谢，星形胶质细胞通过血管周足和突起连接毛细血管与神经元，对神经元起到运输营养物质和排除代谢产物的作用。
本公司生产的大鼠脊髓星形胶质细胞采用酶解法制备而来，细胞总量约为5×105/T25方瓶，GFAP免疫荧光染色呈阳性，细胞纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
二、 使用方法
1 、您收到细胞后，请按照以下方法进行操作：
取出 T25 方瓶， 75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入 37℃ , 5%CO2 细胞培养箱中静置 2-3 小时， 以稳定细胞状态，然后打开瓶子回收瓶子中培养液作为后续培养此细胞的完全培养液（备注： 先使用瓶子中完全培养液培养及尽快冻存保种细胞， 保存种子后再尝试自己完全培养液培养观察是否适合此细胞生长，以免使用自己培养液不适合细胞生长造成细胞状态不好或死亡） ，最后按照后面细胞传代步骤进行细胞传代培养。
2 、细胞传代：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的 90%面积时，弃 T25 方瓶中的培养液， 用 PBS 清洗细胞 3 次；
2）添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 2ml 至培养瓶中 37 度培养箱放置 3-5 分钟，倒置显微镜下观察，待细胞基本完全脱落后加入完全培养基终止消化，用滴管混匀并将悬液转移至 15ml 离心管中，1000rpm/min，离心 5min；
3）弃上清，沉淀细胞用 10ml 完全培养基重悬，然后按 1:2 比例进行分瓶传代， 最后放入 37℃ ,5%CO2 细胞培养箱中培养；
4）待细胞完全贴壁后， 观察培养结果，之后进行换液培养或传代。
3 、细胞冻存：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的 90%面积时，弃 T25 方瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞 3 次；
2）添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 2ml 至培养瓶中 37 度培养箱放置 3-5 分钟，倒置显微镜下观察，待细胞基本完全脱落后加入完全培养基终止消化，用滴管混匀并将悬液转移至 15ml 离心管中，1000rpm/min，离心 5min；
3）用适当量的冻存液（完全培养液： FBS：DMSO=7:2:1）重悬细胞，并放置于冻存管中；
4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1h，然后将其移入-80℃过夜， 24h 后转入液氮中进行长期储存（或者按照梯度程序降温模式直接放置-80 度冻存后并转移液氮中长期储存）。
4、细胞复苏：
1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具） ，快速将其置入 37℃水浴中解冻， 直至冻存管中无结晶，然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2）将冻存管中的细胞转移至含 5ml 完全培养液无菌离心管中，1000rpm 离心 5min ，然后加入 5ml 完全培养液混匀细胞， 将细胞悬液转移至 T25 培养瓶中， 放置于 37℃ , 5%CO2 细胞培养箱中培养；
3）第二天，换用新鲜完全培养基继续培养。
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文献和实验，种植于75cm 2 培养瓶，经1小时差速黏附去除成纤维细胞后，将细胞悬液转移到一新的75cm2培养瓶继续培养，两天换液一次。 7天后将培养瓶放入水平摇床，260rpms 2小时 37℃,换液弃除小胶质细胞，放入培养箱平衡1小时，重新置于水平摇床，260rpms 18小时37℃，换液弃除少突胶质细胞，用新鲜培养基洗2遍，加入0.25%胰蛋白酶与0.02% EDTA1：1混合液消化、传代备用。
少突胶质细胞来源于1-2 天的大鼠。断头后大鼠大脑收集到Ham’s F-12培养液中，移除脑膜和血管。皮质用机械匀浆进行匀浆然后将细胞悬液依次通过230μm和104μm尼龙网进行过滤。细胞通过1000rpm 7分钟离心进行收集，用添加12.5%胎牛血清的DMEM进行重悬细胞。最后以2.0×105 cells/cm2浓度将细胞接种于培养皿中，将培养皿维持在37°C，5%CO2潮湿环境中。3天后更换培养基，以后每两天更换一次。9-11天后细胞能够铺满培养皿。少突胶质细胞祖代生长在星形胶质细胞
实验步骤 为了检测小胶质细胞的吞噬功能，利用凋亡的神经祖细胞作为目标，因为在体外环境下它能最模拟自然条件下小胶质细胞的吞噬目标。 1. 将神经祖细胞（NPC）置于0.1M PBS 2mg/ml木瓜蛋白酶（Worthington）溶液中进行分离，37ºC作用30min。 2. 将分离的NPC 在紫外光下处理15-20min。 注：此步应该在一个很薄的塑料培养皿中进行，厚的塑料（如15或50毫升锥形管）将阻止
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