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总胆固醇(TC)含量试剂盒

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  • ￥240
  • wksubio
  • WS9090F
  • 国内
  • 2025年11月07日
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    • 英文名：

      Total Cholesterol (TC) Content Kit

    • CAS号：

      WS9090F

    • 保质期：

      3个月

    • 供应商：

      上海瓦兰生物

    • 保存条件：

      4℃

    • 规格：

      48T

    本试剂盒仅供科研使用
    总胆固醇（total cholesterol，TC）含量试剂盒说明书
    （货号：WS9090F 分光法 48 样）
    一、产品简介：
    总胆固醇（TC）包括游离胆固醇和胆固醇酯。是指组织中所有脂蛋白所含胆固醇之总和。
    利用酯酶催化胆固醇酯水解生成游离胆固醇（FC），FC 在胆固醇氧化酶作用下被氧
    化生成 4-胆甾烯酮和 H2O2；接着与 4-氨基氨替吡啉等反应生成红色醌类化合物，其在
    510nm 处有特征吸收峰，通过检测 510nm 处吸光值即可得出 TC 含量。
    二、试剂盒的组分与配制：
    试剂名称
    规格
    保存要求
    备注
    试剂一
    液体 35mL×1 瓶
    4℃保存
    标准品
    液体 1mL×1 支
    4℃保存
    标准品浓度为 5.17mmol/L
    三、所需的仪器和用品：
    可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）、乙醇、可调式移液枪、水浴锅、离
    心机、研钵、蒸馏水。
    四、总胆固醇（TC）含量测定：
    建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
    样本和试剂浪费！
    1、样本制备：
    ① 组织样本：
    称取约 0.1g 组织样本加入研钵中，加入 1mL 乙醇，进行冰浴匀浆，12000rpm，4℃
    或室温离心 10min，取上清液待测。
    【注】：若增加样本量，可按照组织质量（
    g）：提取液(mL)为 1：5~10 的比例进行提取。
    ② 细菌/细胞样本：
    先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取约 500 万细菌或细胞加入 1mL
    乙醇，超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；12000rpm
    4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
    【注】：若增加样本量，可按照细菌/细胞数量（104）：提取液（mL）为 500~1000：1 的比例进行提取。
    ③ 液体样本：澄清的液体样本直接测定，若浑浊则离心后取上清检测。
    2、上机检测：
    ① 紫外分光光度计预热 30 min，调节波长到 510 nm，蒸馏水调零。
    ② 所有试剂解冻至室温（25℃），在 1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）中依次加入：
    试剂名称（
    μL） 测定管
    标准管
    （仅做一次）
    空白管
    （仅做一次）
    样本
    7
    标准品
    7
    蒸馏水
    7
    试剂一
    700
    700
    700
    混匀，37℃孵育 10min，于 510nm 处读取各管吸光值 A。
    【注】1.若测定管的 A 值大于 1，则需将组织或细胞样本用乙醇进行稀释（若是液体样本如血清需
    用生理盐水或 PBS 或蒸馏水稀释），稀释倍数 D 需代入公式重新计算。
    2.若 A 测定管值低于空白管，可增加样本加样体积 V1（如增至 15μL 或更多，则试剂一保
    持不变，标准品仍为 7μL，额外加 8μL 蒸馏水补齐）；或增加样本取样质量 W（如增至 0.2g本试剂盒仅供科研使用
    2
    或更多），则改变的 V1 和 W 则代入公式重新计算。
    五、结果计算：
    1、按样本质量计算：
    TC(μg/g 重量)=(C 标准×V2) ×Mr×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)÷(W×V1÷V) ×D
    =1998.7×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白) ÷W×D
    2、按细胞数量计算：
    TC(μg/104 cell)=(C 标准×V2) ×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)÷(500×V1÷V) ×D
    =4×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白) ×D
    3、液体中 TC 含量计算：
    TC(μg/mL)=(C 标准×V2) ×Mr×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)÷V1×D
    =1998.7×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)×D
    TC(mmol/L)=(C 标准×V2)×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)÷V1×D
    =5.17×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白) ×D
    C 标准---5.17mmol/L；
    Mr=386.6---胆固醇分子量；
    V1---样本加入体积，0.007mL；
    V2---标准品加入体积，0.007mL；
    V---提取液体积，1mL；
    D---稀释倍数，未稀释即为 1；
    500---细胞数量，万；
    W---样本取样质量，g。

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