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游离脂肪酸含量(FFA)试剂盒

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  • ￥600
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  • WS1090F
  • 国内
  • 2025年09月27日
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    • 英文名：

      Free Fatty Acid Content (FFA) Kit

    • CAS号：

      WS1090F

    • 保质期：

      3个月

    • 供应商：

      上海瓦兰生物

    • 保存条件：

      4℃

    • 规格：

      24T

    本试剂盒仅供科研使用
    游离脂肪酸（free fatty acid，FFA）含量测定试剂盒说明书
    （货号：WS1090F 分光法 24 样）
    一、产品简介：
    FFA 既是脂肪水解的产物，又是脂肪合成的底物。FFA 的浓度与脂类代谢、糖代谢、
    内分泌功能有关，也可反映食物贮藏中的品质变化。
    在弱酸性条件下，FFA 与铜盐反应生成铜皂，在 715nm 处有特征吸收峰，在一定范围
    内游离脂肪酸含量与显色程度呈线性关系。
    二、试剂盒的组成和配制：
    试剂名称
    规格
    保存要求
    提取液
    液体 60mL×1 瓶
    4℃保存
    试剂一
    液体 11mL×1 瓶
    4℃保存
    试剂二
    液体 11mL×1 瓶
    4℃保存
    三、所需的仪器和用品：
    可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）、研钵、台式离心机、可调式移液器、
    震荡仪。
    四、游离脂肪酸(FFA)含量测定：
    建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
    样本和试剂浪费！
    1、样本制备：
    ① 组织样本：
    组织先用液氮粉碎后，称取 0.2g 粉末至（1.5-2mL）EP 管中，再加入 1mL 的提取液，
    于震荡仪上震荡提取 3h，8000rpm 室温离心 10min，取上清液待测。
    ② 细菌/细胞样本：
    先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取约 500 万细菌或细胞加入 1mL
    提取液，超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；
    8000rpm 室温离心 10min，取上清液待测。
    【注】：若增加样本量，可按照细菌/细胞数量（104）：提取液（mL）为 500~1000：1 的比例进行提取。
    ③ 液体样本：
    取澄清的液体 0.1mL，加 1mL 提取液，于震荡仪上震荡提取 3h，8000rpm 室温离心
    10min，取上清液待测。
    2、上机检测：
    ① 可见分光光度计预热 30 min，调节波长到 715 nm，用蒸馏水调零。
    ② 先挑选 2 个样本做预测定，确定适合本批样本最适取样量。
    ③ 在 EP 管中依次加入：
    试剂名称（
    μL）
    测定管
    对照管
    上清液
    700
    700
    试剂一
    350
    试剂二
    350
    充分震荡 5min，室温静置 5min，取全部上层液体至 1mL
    玻璃比色皿中，于 715nm 处读取吸光值 A，ΔA=A 测
    定-A 对照（每个样本需做一个自身对照）。
    【注】1.若ΔA 在零附近徘徊，可增加样本取样量（至 0.3g），则改变后的样本质量 W 需代本试剂盒仅供科研使用
    2
    入计算公式重新计算。
    2. 若 A 测定管大于 1，则降低样本取样量（至 0.1g），或上清液用提取液稀释，
    则稀释倍数 D 代入计算公式重新计算。
    五、结果计算：
    1、标准曲线方程：y = 0.1103x - 0.0037，x 是标准品浓度（
    μmol/mL），y 是ΔA。
    2、按样本质量计算：
    FFA(μmol/g 鲜重)=[(ΔA+0.0037)÷0.1103×V1]÷(V1÷V×W) ×D
    =9.07×(ΔA+0.0037)÷W×D
    3、按细胞数量计算：
    FFA(μmol/104 cell)=[(ΔA+0.0037)÷0.1103×V1]÷(500×V1÷V)×D
    =9.07×(ΔA+0.0037)÷500×D
    3、按液体体积计算：
    FFA(μmol/mL)=[(ΔA+0.0037)÷0.1103×(V2+V)]÷V2×D
    =99.73×(ΔA+0.0087)×D
    V---提取液体积，1mL；
    V1---加入样本体积，0.7mL；
    V2---加入液体体积，0.1 mL；
    W---样品质量，g；
    D---稀释倍数，未稀释即为 1。

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