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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 规格:
2,000U
核糖核酸酶R(10U/μL)
RNase R
本产品需冰袋运输;-20℃保存,保质期24个月。
货号规格
goodGY201L 200 U
goodGY201L 2,000 U
单位定义
good37℃标准反应条件下,10 min将1 µg poly-r(A)转化为酸溶性核苷酸所需的酶量定义为 1个活性单位(U)。酶活性在以下混合物中测定: 20 mM Tris-HCl (pH 8.0),100 mM KCl和0.1 mM MgCl2。
产品内容

产品简介
good核糖核酸酶R(RNase R)是一种大肠杆菌外切核糖核酸酶,具有3'至5'核酸外切酶活性,可有效消化几乎所有物种的线性RNA,但不易消化环形RNA、套索结构或3'端突出末端少于7个核苷酸的双链RNA分子,常用于基因表达和可变剪切等研究。
操作步骤
1. 按下表,在无菌微量离心管中配制反应体系:

2. 37℃反应5~10 min,70℃灭活10 min。
注注意:① 随 RNA 样本量的增加,可适当延长消化时间和增加酶量;
注注意:② 若 RNA 样本中含有 EDTA,可能会影响 RNase R 的活性。
结果验证
1. 取Linear RNA 1 μg,分别与0.6 U、0.8 U、1.0 U RNase R在37℃反应10 min,agarose跑胶鉴定,Linear RNA全部降解。

2.1 μg Circulized RNA 分别与0.6 U、0.8 U、1.0 U RNase R在37℃反应10 min,agarose跑胶鉴定。Circulized RNA能够抵抗降解,而Linear RNA则全部降解。

注意事项
good1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;
good2. 本产品仅限科研使用。
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验RNA 酶的 DNA 酶 I (Sigma) 和 0.5% Triton X-100。在 DNA 酶解之后,加入 0.25 mol/L 硫酸铵。 ( 4 ) 高盐馏分(图 8-1,HS):用含有 2 mol/L NaCl 的 NSB 提取。 ( 5 ) 不溶性馏分或细胞核基质馏分( 图 8-1,NM ):只能溶解于尿素缓冲液,其含有 20 mmol/L MES ( pH 6.6)、1 mmol/L EGTA、0.1 mmol/L MgCl2、1% β-巯基乙醇、0.02% 叠氮
沉淀。② 每克菌加8μL PMSF 及80μL 溶菌酶,搅拌20 min ;边搅拌边每克菌加4 mg 脱氧胆酸(在冷室中进行)。③ 37 ℃ ,玻棒搅拌,溶液变得粘稠时加每克菌20μL DNase I。室温放置至溶液不再粘稠。(2 )超声破碎法。声频为15-20 kHz 的超声波在高强度声能输入下可以进行细胞破碎,在处理少量样品时操作简便,液体量损失较少,同时还可对染色体DNA 进行剪切,大大降低液体的粘稠度。① 收集1 L 诱导表达的工程菌,40 ℃ ,5000r pm 离心,15 min ;弃上清
α -[32 P]UTP ( 2.5 μ mol/L 终浓度, DEPC 水加至 25 μ l ) 1 μ l T3, T7 或 SP6 RNA 聚合酶( 10U ) 2. 37 ~ 40 ℃温育 60min 。 3. 若不做凝胶纯化步骤,则: a. 加入 1 μ l 无核糖核酸酶的脱氧核糖核酸酶并在 37 ℃温育 15min 。 b. 加 DEPC











