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- Zenon®标记技术为制备荧光标记抗体提供了一种快速、通用且可靠的实验方法，此标记方法可利用各种荧光染料，并且起始原料可以为极少量、未纯化 (如杂交瘤细胞的培养上清液) 的抗体。
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 服务名称：
细胞荧光染料标记检测实验
- 提供商：
XSL
Zenon®标记技术为制备荧光标记抗体提供了一种快速、通用且可靠的实验方法，此标记方法可利用各种荧光染料，并且起始原料可以为极少量、未纯化 (如杂交瘤细胞的培养上清液) 的抗体。 利用Zenon®标记技术标记的抗体适用于所有可使用直标抗体的应用领域。
Zenon® 标记技术的优势包括:
● 10 分钟贴记时间
● 每个标记1– 20 微克抗体
● 与BSA及其它稳定蛋白相容
● 无纯化步骤
● 灵活的抗体标
Zenon®- 标记技术如何工作 Zenon®标记技术提供一种多功能的、易于使用的方法，用于标记人和小鼠的IgG1，IgG2a和IgG2b抗体及兔IgG抗体。 特殊设计的Zenon®片段只结合一抗的Fc片段，这种快速、非共价结合方法能够迅速标记少量的一抗 (图1) Zenon®标记技术简单高效；整个标记步骤只需 10 分钟。
Zenon®抗体偶联物形成后可以稳定地储存待用；在使用前需要添加非特异性IgG来封闭未结合的Zenon®片段，无需柱纯化。 Zenon®复合物因而可直接应用到样品中。
Zenon®标记技术标记的抗体与观察到的直接标记的抗体偶联物呈现相似的荧光强度或酶活性 (图 2 )。
图1. Zenon®标记技术工作原理。
Zenon®抗体的非共价标记与微量标记试剂盒、单克隆标记试剂盒、蛋白标记试剂盒的共价标记比较。
图2. Zenon®标记技术生产出的标记抗体的亮度相当于或者比直接标记的抗体更亮。 使用别藻蓝蛋白（APC）共轭标记或者使用1微克Zenon®APC复合物非共轭标记各种淋巴标志物抗体。 然后，标记的抗体用于人外周血淋巴细胞样品的染色。 制备Zenon®染色复合物时，通过提高 Zenon®标记技术试剂与所用一级抗体的比例可进一步提高该复合物的亮度。
Zenon®标记技术： 最终标记灵活性 当您需要改变标记物颜色或者检测特定荧光是否适合您的应用或抗体时，Zenon®标记技术可提供独特的标记灵活性。 可广泛选择的标记物、通用的标记技术，助您在流式细胞术 (图 3 ) 和荧光成像 (图 4 和 5 ) 中轻松获得不同颜色组合成的多色应用图像。
Zenon®标记技术： 最终标记灵活性 当您需要改变标记物颜色或者检测特定荧光是否适合您的应用或抗体时，Zenon®标记技术可提供独特的标记灵活性。 可广泛选择的标记物、通用的标记技术，助您在流式细胞术 (图 3 ) 和荧光成像 (图 4 和 5 ) 中轻松获得不同颜色组合成的多色应用图像。
图4.在荧光成像中使用用Zenon®标记技术。切取厚度为14um的小鼠海马冠状切片，应用用用Zenon®Alexa Fluor® 488小鼠lgG1标记
试剂盒 ( Z25002 ) 标记的抗α-微管蛋白抗体 ( A11126) 染色。 切片用NeuroTrace®530/615 红色荧光Nissl染料 ( N21482 ) 复 染来观察神经元胞体，用Hoechst 33258 ( H1398 , H3569, H21491 ) 染色来观察细胞核。
图5. 在荧光成像中使用Zenon®标记技术。 微管蛋白和线粒体探针标记的牛肺动脉内皮 细胞微管蛋白采用Zenon®Alexa Fluor®488 小鼠IgG2b标记试剂盒 ( Z25202 ) 标记的抗α-微管蛋白小鼠IgG2b单克隆抗体检测，线粒体采用Zenon®Alexa Fluor®555 小鼠IgG2b标记试剂盒 ( Z25205 ) 标记抗氧化磷酸化酶复合体V亚单位α小鼠IgG2b单克隆抗体 ( A21350 ) 检测。 使用DAPI( D1306 , D3571, D21490 )给核酸染色。
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文献和实验guoshengjie2010 人正常肝细胞的几种cx蛋白检测过没有?这个主要还是研究缝隙连接蛋白的功能的! guoshengjie2010 人正常肝细胞的几种cx蛋白检测过没有?这个主要还是研究缝隙连接蛋白的功能的! ilzmx 没有检测，但原代成纤维细胞有文献报道是存在间隙连接的。目前实验仍停止，有没有人做过这个实验，我可以前去学习学习。 过客江 请问最后你做出来了吗？我用了荧光黄锂盐染料，同样
1. 常用荧光染料的种类特性及检测滤片 面对种类繁多的荧光染料，如何知道这些染料是否适合您所拥有的流式细胞仪，以及这些染料间该如何补偿呢？这需要我们对所用的染料和用于检测的流式细胞仪有清晰的认识。对于多色标记，我们通常需要关注染料的激发波长和发射波长以及探测器前的虑光片参数。其中激发波长决定了目的染料能否在特定配制的流式细胞仪上被激发，发射波长和滤光片参数决定染料的荧光能否在该流式细胞仪上被检测到。一般来说，激发波长在激光器波长附近的染料一般都可以被激发；染料的发射波长落在滤光
体，所有外泌体提取纯化方式都适用。 c、去除游离染料的方法推荐选择 3~10KD 的超滤管，利用其置换溶剂功能去除游离染料。具体步骤和实验参数请咨询超滤管厂商。 d、DiR 碘化物（DiR 染料）的发射波长肉眼不可见，需要使用配备 CCD 镜头或其他设备的近红外检测仪器，建议使用活体成像仪。 e、建议染料标记的外泌体注在射后 24h 内设置梯度时间进行观测，多数情况注射后 2-8小时荧光强度达到峰值。为保证观察结果，小动物需要做剃毛处理。 f、基于以下两个原因，建议准备 2 倍于正常活体成像和示踪实验
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