慢性肾衰竭动物模型 泌尿系统模型

大鼠腺嘌呤模型饲料诱导肾功能衰竭(肾衰)和造模方法 Model Diet and Protocol of Renal Failure in Rats

应用含高含量腺嘌呤的模型饲料诱导大鼠肾功能衰竭方法有如下优点：

(1) 大鼠能够忍受高含量腺嘌呤模型饲料。
(2) 大鼠对腺嘌呤的味道能够忍受。（相比较而言，小鼠厌恶腺嘌呤）
(3) 在喂大鼠腺嘌呤模型饲料后，可以模拟出人类慢性肾脏疾病的大多数表现，包括血清肌酐升高，蛋白尿，间质纤维化， 肾小管和肾小球损伤。
(4) 大鼠不同品系建立的模型基本一致，例如，SD大鼠、Witar大鼠的模型表现基本相同。
(5) 肾脏损伤速度快，喂养几周后可表现肾脏功能的明显改变。 因此，大鼠喂腺嘌呤模型饲料是当前广为采用的诱导慢性肾脏疾病（CRF）的动物模型。

模型方法一：大鼠喂0.75%腺嘌呤模型饲料
在以往大量文献中采用了这种方法。属于经典法。

【模型饲料】含0.75%腺嘌呤
【模型方法】大鼠自由饮食。
【模型表现】体重明显下降，血压(收缩压)升高，间质纤维化，肾小管扩张、萎缩，肾小球异常，血浆尿酸、尿素氮、肌酐 浓度升高，尿蛋白增加（蛋白尿），血浆钾升高，血浆钙、钠正常。
【模型缺点】大鼠在喂养后体重下降幅度较大，营养不良明显，有较高的死亡率。

模型方法二：大鼠喂0.25%腺嘌呤模型饲料 0.75%腺嘌呤含量的模型饲料引起的慢性肾衰表现比较严重，因此，该方法根据腺嘌呤的剂量-效应关系而优选出的腺嘌呤 合适含量的模型饲料进行造模。

【模型饲料】含0.25%腺嘌呤，饲料代码：TP 1S006或TP 1S007
【模型方法】大鼠自由饮食。
【模型表现】体重增加，与0.75%腺嘌呤模型饲料诱导的慢性肾衰表现相同，但大多数指标的变化程度较轻。
【模型缺点】造模时间相对较长。
造模注意事项
(1) 由于慢性肾衰时出现钙、磷代谢改变和血清钙浓度、磷浓度和维生素D浓度改变（低钙血症和高磷血症），需要对模型 饲料中钙、磷和维生素D等等营养素的水平提出了特别要求，因此，上述模型饲料根据模型造模需要进行了合理调整。
(2) 根据需要建立的慢性肾脏疾病的进展速度和严重性以及研究的实际需要选择上述模型方法。


大鼠肾切除（5/6）模型
造模机制 大鼠5/6肾切除(nephrectomy, NT)后残存肾单位出现高灌注、高滤过和高压力，进而导致肾小球硬化和残余肾单位的进一步 破坏，出现以肾小球肥大、硬化等为主要特点的慢性肾衰竭的肾间质纤维化病变。


实验方法
1．选用90只体重S(200±20)g雄性Wistar大鼠。
2．模型制备采用二期法 速眠新Ⅱ号1ml/kg肌内注射麻醉，选取背部左侧切口，暴露左肾，剥离肾包膜，将肾的上下级各1/3 切除，明胶海绵压迫切面止血。一期手术后7天，行二期手术，同样方法麻醉，右侧背部切开暴露右肾，结扎肾蒂，摘除右 肾。假手术组与5/6 NT组动物同时进行二次手术，但仅剥离肾包膜暴露肾脏后关腹。5/6 NT组于二期手术后30、60、90天 时，每组随机选取15、15、18只大鼠处死，进行分析。
3．样本采集和指标测定 麻醉下心脏采血，血液收集后经离心分离出血清，尿液和血清均保存于-20℃冰箱。取左肾组织称 重，用4％多.聚.甲.醛固定，石蜡包埋。检测24小时尿蛋白、血清Cr及 BUN。肾组织做病理分析。

模型特点
5/6肾切除后，系膜细胞和系膜基质增生，肾小球硬化，肾小管灶状萎缩，间质纤维化，表现出与人类肾脏纤维化相一致的 病理过程。5/6肾切除组24小时尿蛋白量、血BUN、血Cr水平明显升高。残肾的肾重/体重逐渐增加，到术后90天几乎接近假 手术组大鼠左肾肾重，体重。5/6肾切除后残肾肾小球面积和肾小球毛细血管体积增加，肾小球硬化指数及肾小管间质损伤 评分明显高于假手术组。免疫组化结果显示5/6肾切除组肾间质和小管上皮细胞α-平滑肌动蛋表达增加。

需确认的信息
1. 模型种属（大鼠还是小鼠或是其他种属）
2. 动物体重有无要求，年龄有无要求
3. 雌雄有无要求
4. 模型构建具体方案
5. 取材要求（采血、取组织样本）