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XSL
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流式细胞检测
流式细胞术(Flow cytometry,FCM)是一种在液体系统中,可快速测定单个细胞或细胞器的生物学性质,并把特定的细胞 或细胞器从群体中加以分类收集的技术。其特点是通过快速测定库尔特电阻、荧光、光散射和光吸收来定量测定细胞DNA含量、细胞体积、蛋白质含量、酶活性、细胞膜受体和表面抗原等许多重要参数。根据这些参数将不同性质的细胞分开,以获得供生物学和医学研究用的纯细胞群体。
流式细胞仪器介绍
规格型号:ACEA NovoCyte
三 激 光:(蓝色,红色,紫色)
可支持染料:FITC,Alexa Fluor 488 ,PE, PerCP, PE-Cy5,PE-Cy7,APC, APC-Cy7, Alexa Fluor 647,Alexa Fluor 405
仪器平台优势
● 免调PMT增益电压,24位动态检测范围
● 自动荧光补偿技术,避免人为设置误差
● 检测通道自由组合,满足多样化要求
● 亚微米级颗粒解析度,高效荧光信号收集系统,确保小颗粒和弱阳性样本的可靠检测
● 多种荧光补偿方式,灵活的在线离线补偿功能 流式检测相关项目
收费标准/服务周期/提供结果:
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文献和实验#01 什么是同型对照? 同型对照(Isotype Control),是指与使用的流式抗体具有相同种属来源、亚型、荧光标记物、使用剂量和浓度,但对目标靶点无特异性结合的抗体。同型对照通常用来消除抗体与抗原的非特异性结合造成的背景染色。 #02 为什么要做同型对照? 流式抗体与靶标的结合,是通过抗体的 Fab 端与靶标 Marker 进行特异性结合而完成的。白细胞(除T细胞外)表面大多表达 CD16、CD32、CD64 等 Fc 受体,这些受体可与各种抗体的 Fc 端非特异性结合,出现非特异
大部分老师做流式实验时,会用到空白对照、单阳对照、同型对照、生物学对照等,用到 FMO 对照的比较少。尽管如此,FMO 对照在设置圈门时仍具有重要的参考价值。 一方面,FMO 对照有助于精确地设置阴阳性群体界限。我们在做多色实验时,可能会出现某些通道信号难以区分的情况,主要是因为其他某个荧光对该通道的干扰很大。FMO 对照(Fluorescence Minus One,荧光扣除一)减少了其中一个通道的荧光抗体,能够帮助衡量其它通道的荧光漏溢情况。 如下图所示,PerCP/Cyanine
的主要表型标志物。这些标志物涵盖细胞表面分子(如CD45、CD127等)及转录因子(如Tbet、GATA3等)。 表格对比了NK细胞、ILC1、ILC2、ILC3及LTi细胞在不同物种间的表达差异,通过“+”、“-”或强度等级区分。值得注意的是,尽管总体模式保守,但部分标志物(如CD161、Sca-1)在小鼠和人类间存在显著区别,且某些标记物的表达受器官特异性影响。这为精准鉴定和区分各类ILCs提供了重要依据。 人固有淋巴细胞表型下图表展示了利用流式细胞术鉴定固有淋巴细胞(ILCs)及其亚群的通用
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