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XSL
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流式细胞检测
流式细胞术(Flow cytometry,FCM)是一种在液体系统中,可快速测定单个细胞或细胞器的生物学性质,并把特定的细胞 或细胞器从群体中加以分类收集的技术。其特点是通过快速测定库尔特电阻、荧光、光散射和光吸收来定量测定细胞DNA含量、细胞体积、蛋白质含量、酶活性、细胞膜受体和表面抗原等许多重要参数。根据这些参数将不同性质的细胞分开,以获得供生物学和医学研究用的纯细胞群体。
流式细胞仪器介绍
规格型号:ACEA NovoCyte
三 激 光:(蓝色,红色,紫色)
可支持染料:FITC,Alexa Fluor 488 ,PE, PerCP, PE-Cy5,PE-Cy7,APC, APC-Cy7, Alexa Fluor 647,Alexa Fluor 405
仪器平台优势
● 免调PMT增益电压,24位动态检测范围
● 自动荧光补偿技术,避免人为设置误差
● 检测通道自由组合,满足多样化要求
● 亚微米级颗粒解析度,高效荧光信号收集系统,确保小颗粒和弱阳性样本的可靠检测
● 多种荧光补偿方式,灵活的在线离线补偿功能 流式检测相关项目
收费标准/服务周期/提供结果:
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文献和实验#01 什么是同型对照? 同型对照(Isotype Control),是指与使用的流式抗体具有相同种属来源、亚型、荧光标记物、使用剂量和浓度,但对目标靶点无特异性结合的抗体。同型对照通常用来消除抗体与抗原的非特异性结合造成的背景染色。 #02 为什么要做同型对照? 流式抗体与靶标的结合,是通过抗体的 Fab 端与靶标 Marker 进行特异性结合而完成的。白细胞(除T细胞外)表面大多表达 CD16、CD32、CD64 等 Fc 受体,这些受体可与各种抗体的 Fc 端非特异性结合,出现非特异
大部分老师做流式实验时,会用到空白对照、单阳对照、同型对照、生物学对照等,用到 FMO 对照的比较少。尽管如此,FMO 对照在设置圈门时仍具有重要的参考价值。 一方面,FMO 对照有助于精确地设置阴阳性群体界限。我们在做多色实验时,可能会出现某些通道信号难以区分的情况,主要是因为其他某个荧光对该通道的干扰很大。FMO 对照(Fluorescence Minus One,荧光扣除一)减少了其中一个通道的荧光抗体,能够帮助衡量其它通道的荧光漏溢情况。 如下图所示,PerCP/Cyanine
或者碱化等方法将 1% 的多聚甲醛溶于 PBS 或者蒸馏水中,但是,多聚甲醛一旦溶解形成溶液,它实际上就是甲醛溶液。 3.细胞是用 FACS 检测的 错误 1:FACS 是 Fluorescence Activated Cell Sorter的首字母缩写词,是荧光激活细胞分选仪,而检测细胞用到的是分析仪,而非分选仪。流式细胞仪应该是 Flow Cytometry,简写为 FCM。 错误 2:FACS 是 Becton Dickinson 的商品名,因此所有 FACS 都是流式细胞仪,但并非所有的流式
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