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- 克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状
- 浙江省
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商：
XSL
- 服务名称：
细胞克隆
实验步骤
- 获取样本，培养细胞。
- 调整细胞悬液密度为1×103个/ml细胞。
- 制备底层琼脂，完全溶化的5%琼脂和 37℃ 左右预温的新鲜完全培养液以1：9比例在 40℃ 均匀混合，加入培养皿（直 径 60mm ）中，每皿含0.5%琼脂培养基2ml，室温下琼脂完全凝固。
- 制备上层琼脂,37℃ 密度每皿含200个的细胞悬液1.5ml移入小烧杯中，加入 40℃ 、5%琼脂等体积混匀，即成0.25%半固体琼脂培养基。配好的半固体琼脂培养基立即加入铺有底层琼脂的培养皿中，室温下琼脂凝固。 37℃ 、5%CO2静置培养2- 3周。
结果展示
实验周期及交付标准
1. 实验周期：1-2周
2. 交付标准：克隆形成图片、计数结果、柱状图、实验报告（实验步骤、试剂、仪器等）
细胞克隆化其他方法
1. 稀释铺板方法
2. 饲养层克隆法
3. 毛细管克隆法
4. 荧光激活分选法
细胞克隆 集落形成法/稀释铺板方法
软琼脂克隆法
毛细管克隆法
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文献和实验抗原对带有结构各异B(：R的B细胞克隆进行选择是亲和力成熟的关键。在初次应答时，大量抗原的出现，可使带有不同亲和力BCR的各种B细胞克隆被选择和激活，所产生的抗体，同时包括高、中、低亲和力，是一种混合物，其平均亲和力为中等。当大量抗原被清除，或二次应答仅有少量抗原出现时，该抗原会优先挑选高亲和力的]3CR与之结合，仅仅使相应B细胞发生克隆扩增。其结果，该克隆B细胞分泌的所有抗体分子对该抗原皆呈高亲和力。 抗体亲和力成熟中抗原对受体结构多样性B细胞克隆的选择
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细胞克隆 ，是将一个单细胞从细胞群中分离出来单独培养，使之重新繁衍成一个新的单一细胞群的培养技术。未经克隆 化的细胞具有异质性，经过克隆 得到的是均一细胞集团。这里仅介绍T细胞与NK 细胞的克隆 方法。 基本原理 用限度稀释克隆 形成法制备T 细胞克隆 时，并非依赖细胞 的特性，而是将T 细胞在细胞培养 板上稀释到统计学的浓度，即从理论值上达到每孔1 个细胞，其中加入IL－2 和PHA 可增强细胞的生长，而加入的同种异体PBMC 作为饲养细胞，在这种体系中，单个
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