裸鼠成瘤模型_小鼠成瘤模型构建_动物疾病模型

裸鼠肿瘤模型是比较常见和常用的一种肿瘤动物模型，它在皮下移植瘤肿瘤模型的建立中起到重要作用。裸鼠肿瘤模型的接种一般有细胞接种和瘤块接种两种方式，接种取材有手术活检标本、癌性胸腹水标本和体外培养的细胞系三种。

裸鼠移植瘤模型的建立具有建立周期短、成瘤率高、易于操作、成本低的优点。

造模方法：
1、细胞是贴壁细胞，细胞培养在 RPMI-1640 培养基中，含 10%胎牛血清，100U/mL 的青霉素，100ug/mL 的链霉素，培养在 37℃含 5%CO2的细胞培养箱中。
细胞传代培养：当细胞长至 80-90%时，去除培养基，加入 PBS 洗 1-2 次，去除 PBS后，加入 1ml 胰酶消化 1-3min 后，加入 3ml 完全培养基中和胰酶终止消化，将消化的细胞转移至 15ml 离心管中，1000rpm 离心 5min。倒掉上清后，加入 3ml 培养基重悬细胞，1:3 传代至培养皿中培养。
2、将长到培养皿 80%-90%的细胞用胰酶消化下来，1000rpm 离心，去除上清，加入完全培养基重悬细胞，将细胞分别种在 6 孔板中，每孔种 1×105个细胞。
3、待细胞贴壁后，按照 MOI=1:10 的比例加入慢病毒感染细胞，感染 24h 后，去除含病毒的培养基，加入完全培养基。培养 48h 后，加入 puromycin 进行筛选。
4、将细胞进行扩增培养。待细胞长到指定数量时，将细胞用胰酶消化下来，1000rpm离心后，去除上清，加入 PBS 将细胞洗一遍，再次加入 PBS 重悬，对细胞进行计数，将数量调整为 2×107个细胞/ml。
5、8周龄15只裸鼠适应性饲养7天后，随机分为3组，每组分别在右腋皮下接种2×106（100ul/只）细胞（细胞分为对照组细胞即未处理的细胞，NC 组细胞即感染 NC 病毒的细胞，shRNA 细胞即感染 sh-RNA 病毒的细胞）。接种约两周后出现肿瘤结节，每周用游标卡尺测量肿瘤大小两次。将裸鼠放入鼠笼中正常饲养 4 周后处死裸鼠，取裸鼠肿瘤拍照冻存。