大鼠骨折模型构建和评估

原型物种：人

来源：手术导致骨折

模式动物品系：SPF级SD大鼠，雄性，周龄6~8W，体重：200~250g

实验分组：实验分六组：正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组

实验周期：6~8 weeks

建模方法

1.大鼠腹腔麻醉后，将大鼠左下肢去毛、消毒。

2. 并在无菌操作下取胫侧纵行切口，逐层切开皮肤及肌肉，暴露胫骨，在胫骨中下 1/3 交界处，用手术刀片剔除 3mm宽的骨膜，显露骨膜下骨质，以咬骨钳咬断，造成骨折。

3.将直径0.8mm的克氏针穿过膝关节，直视下钻入骨折远折端，然后将骨折端予以复位，针尾部紧贴膝关节上端，然后逐层缝合肌肉及皮肤，不做固定。

4. 术后 3d 每天腹腔注射青霉素20U。

应用：骨头损伤疾病模型

模型评价

1、 X射线拍摄：分别于手术后第1、第2、第3、第4、第5周，麻醉后拍摄右下肢X线片。

2、标本X射线和micro-CT检查：解剖取骨折处局部骨痂组织，肉眼观察骨折愈合情况。去除肌肉等软组织，股骨标本拔除克氏针，使用X线机拍摄正位和侧位片。

3、进行micro-CT扫描，将标本放置于样本固定器内，加入40%乙醇溶液作为扫描介质，然后将样本固定器放置在70KPa真空箱内20分钟，确保样本内外无气泡干扰。选择扫描参数，进行标本扫描。

组织病理学

1、将骨痂组织放入体积分数4%多-聚甲醛固定24h，脱钙4~6周后，包埋，切片。

2. 进行HE染色，Masson染色；

3.免疫组化染色( IHC检测)：ALP，BMP，PDGF，VEGF，Runx2等。

统计学分析

应用SPSS软件进行统计分析，计量资料以均数±标准差(x ±s)表示，采用t检验，组间比较采用单因素方差分析，P<0.05表示有显著差异。