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- YLKbio
- 上海
- YLK-005SH
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2-8℃
- 保质期：
3个月
- 英文名：
Cytochrome b5
- 库存：
35
- 供应商：
优利科（上海）生命科学有限公司
- CAS号：
/
- 规格：
50管/48样
细胞色素b5（Cytochrome b5）含量测定试剂盒产品信息：
测试方法：分光光度法
规格：50管/48样
测定意义：
胞色素P450酶是一组主要存在于肝脏的同工酶，在外源物质代谢中具有重要作用，尤其是药物和毒物的代谢。细胞色素P450和细胞色素b5是P450酶系的两个血红素蛋白，其比值的变化与P450代谢活性密切相关。
测定原理：
氧化型细胞色素b5经 sodium dithionite 还原后，在424nm处有最大吸收峰，通过测定424nm和490nm处吸光值的差异，即可计算出细胞色素b5的含量。
自备仪器和用品：
可见分光光度计、普通离心机，超速离心机、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加100mL蒸馏水，充分溶解。
试剂二：液体×1瓶，4℃保存。
试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存；
工作液配制：临用前配制，戴一次性手套，小心打开试剂三瓶盖，加试剂二50 mL充分溶解，4℃避光可保存1周。
细胞色素b5（Cytochrome b5）含量测定试剂盒相关图片展示：
样品中细胞色素b5提取：
1、除去细胞核，线粒体等大分子物质：称约0.5g组织，加入1mL试剂一，冰上充分研磨，10 000g 4℃离心30min，取上清液，转入超速离心管中。
2、粗制微粒体：100 000g，4℃离心60min，弃上清液。
3、除血红蛋白等杂质：向步骤2的沉淀中加1mL试剂一，盖紧后充分震荡溶解，100 000g离心30min，弃上清液。
4、待测液：向步骤3的沉淀中加试剂二0.5mL，盖紧后充分震荡溶解，即待测液，该待测液需当天测定。
细胞色素b5含量测定操作：
1. 分光光度计预热30 min。
2. 工作液置于25℃水浴中预热30 min。
3. 空白管：取1mL玻璃比色皿，加入50 μ L蒸馏水，1000μ L工作液，室温静置2 min，424nm和490nm处吸光值，424nm处吸光值记为A空白管1，490nm处吸光值记为A空白管2。△A空白管= A空白管1- A空白管2
4. 测定管：取1mL玻璃比色皿，加入50 μ L待测液，1000μ L工作液，室温静置2 min，424nm和490nm处吸光值，424nm处吸光值记为A测定管1，490nm处吸光值记为A测定管2。△A测定管= A测定管1- A测定管2。
注意：只需要做一个空白管。
样品细胞色素b5含量计算公式：
(1).按照蛋白浓度计算:
细胞色素b5含量(nmol/mg prot)= (△A测定管-△A空白管)÷ε÷d×V反总÷（Cpr×V样）
= 123×(△A测定管-△A空白管)÷Cpr
(2).按照样本质量计算:
细胞色素b5含量（nmol/g 鲜重）= (△A测定管-△A空白管)÷ε÷d×V反总×（V样总÷V样）÷W
= 61.4×(△A测定管-△A空白管)÷W
ε：还原型细胞色素b5纳摩尔消光系数，171×10-6 L/nmol/cm；d：比色皿光径（cm），1cm； V反总：反应体系总体积，1.05 m L=0.00105 L；Cpr：待测液蛋白质浓度（mg/mL），需要另外测定；V样：加入反应体系中待测液体积，50 μ L=0.05 mL；V样总：待测液总体积，0.5 mL；W：样品质量，g。
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文献和实验细胞色素b5 存于高等动物内质网膜的一种细胞色素。可从兔肝微粒体中提纯。因为与膜结合，用蛋白酶或表面活性剂处理可以使其溶解。还原型和氧化型的最大吸收光谱分别为 555、 526、 423和 414毫微米，分子量为 12， 500，氧化还原电位＋ 0.02V。可由同样内质网膜内的还原酶通过 NADH进行还原。还原型 b5与被称为氰感受因子的酶一起，参与由氧将饱和酰基辅酶 A转变成不饱和酰基辅酶 A的脂肪酸不饱和化反应。
广义的细胞色素 c是含有血红素 c的细胞色素之总称。通常是指主要存在于高等动植物、酵母、霉菌等线粒体中的细胞色素 c，起着传递电子的作用。为分子量约 1.3万的碱性蛋白质，还原型的吸收带为 550、 520、 415毫微米，氧化型为 407毫微米。α 因此很早便被研究，并获得结晶。不仅一级结构而且立体结构也已清楚（图 1）。其结构基本上是生物界共有的。由细胞色素 c氧化酶〔细胞色素（ a＋ a3 ）复合体〕氧化。在呼吸链中从细胞色素 c开始接受电子，各种还原酶都已清楚
细胞色素b563 cytochrome b563 亦称细胞色素 b6 。存在于高等植物至藻类的叶绿体中，与类囊体膜结合紧密。含有原正铁血红素，氧化还原 （β带）和 434nm（γ带或 So－ ret带）。为发动光合磷酸化的环状电子传递系统的一个成分，可被光化系统Ⅰ所还原和氧化。
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