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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2-8℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
glutamic acid,Glu
- 库存:
50
- 供应商:
优利科(上海)生命科学有限公司
- CAS号:
/
- 规格:
50管/48样
谷氨酸(glutamic acid,Glu)含量测定试剂盒产品介绍:
分光光度法 50管/48样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
Gu广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,不仅是组成蛋白质的20种氨基酸之一,而且通过转氨基作用参与多种氨基酸合成,是生物体内主要氨基来源之一。此外,Glu还是味精的主要有效成分,常用做食品添加剂以及香料生产。
测定原理:
利用专用提取液提取,然后用显色剂进行显色,显色后在570nm下进行测定。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水。
试剂的组成和配制:
试剂一:液体100mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1瓶, 4℃保存;临用前加入10mL蒸馏水,充分混匀溶解,用不完的试剂仍 4℃保存。
谷氨酸(glutamic acid,Glu)含量测定试剂盒相关图片展示:


谷氨酸提取:
1、细菌或培养细胞样品:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议1000万细菌或细胞加入2mL试剂一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 常温离心10min,取上清,置冰上待测。
2、组织样品:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.2g组织,加入2mL试剂一),进行冰浴匀浆。8000g 常温离心10min,取上清,置冰上待测。
3、血清(浆)或细胞培养液样品:按照血清(浆)或细胞培养液体积(mL):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议取0.2mL血清(浆)或者细胞培养液加入2mL试剂一),进行冰浴匀浆。8000g 常温离心10min,取上清,置冰上待测。
测定步骤
混匀,90℃水浴20min(盖紧,以防止水分散失),流水冷却,于570nm波长处比色,△A=A测定管-A对照管。对照管只要做一管。
谷氨酸含量计算:
1、标准条件下测定回归方程为y = 0.0074x- 0.5255;x为谷氨酸含量(µg/mL),y为吸光值。
2、按照血清(浆)或者细胞培养液体积计算
谷氨酸含量(μg/mL)= [(△A +0.5255)÷0.0074×V1]÷(V3×V1÷V2)=1351×(△A+0.5255)
3、按照蛋白浓度计算
谷氨酸含量(µg/mg prot)=[(△A +0.5255)÷0.0074×V1]÷(V1×Cpr)=135.1×(△A+0.5255) ÷Cpr
4、按照样本质量计算
谷氨酸含量(µg/g鲜重)=[(△A +0.5255)÷0.0074×V1]÷(W ×V1÷V2)=270.2×(△A+0.5255) ÷W
5、按照细菌或细胞密度计算
谷氨酸含量(μg/104 cell)=[(△A +0.5255)÷0.0074×V1]÷(1000×V1÷V2)=0.27×(△A+0.5255)
V1:加入反应体系中样本体积,1mL;V2:加入提取液体积,2 mL;V3:加入血清(浆)或细胞培养液体积,0.2 mL; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;1000:细菌或细胞总数,1000万。
注意:
1、该试剂盒仅适用于发酵液或组织中谷氨酸含量测定,检测下限为100µg/mL。
2、标准曲线线性范围为:100µg/mL -600µg/mL。
3、ΔA线性范围为:0.01-2;若大于2则需要将上清液用试剂一稀释至适当倍数后测定,计算公式中乘以相应稀释倍数。


谷氨酸(glutamic acid,Glu)含量测定试剂盒相关产品:
分光光度法 50管/48样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
Gu广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,不仅是组成蛋白质的20种氨基酸之一,而且通过转氨基作用参与多种氨基酸合成,是生物体内主要氨基来源之一。此外,Glu还是味精的主要有效成分,常用做食品添加剂以及香料生产。
测定原理:
利用专用提取液提取,然后用显色剂进行显色,显色后在570nm下进行测定。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水。
试剂的组成和配制:
试剂一:液体100mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1瓶, 4℃保存;临用前加入10mL蒸馏水,充分混匀溶解,用不完的试剂仍 4℃保存。
谷氨酸(glutamic acid,Glu)含量测定试剂盒相关图片展示:


谷氨酸提取:
1、细菌或培养细胞样品:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议1000万细菌或细胞加入2mL试剂一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 常温离心10min,取上清,置冰上待测。
2、组织样品:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.2g组织,加入2mL试剂一),进行冰浴匀浆。8000g 常温离心10min,取上清,置冰上待测。
3、血清(浆)或细胞培养液样品:按照血清(浆)或细胞培养液体积(mL):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议取0.2mL血清(浆)或者细胞培养液加入2mL试剂一),进行冰浴匀浆。8000g 常温离心10min,取上清,置冰上待测。
测定步骤
- 分光光度计预热30min以上,调节波长至570nm,蒸馏水调零。
- 在有盖EP管中加入下列试剂:
| 试剂名称(μL) | 测定管 | 对照管 |
| 样本 | 1000 | |
| 试剂一 | 1000 | |
| 试剂二 | 200 | 200 |
谷氨酸含量计算:
1、标准条件下测定回归方程为y = 0.0074x- 0.5255;x为谷氨酸含量(µg/mL),y为吸光值。
2、按照血清(浆)或者细胞培养液体积计算
谷氨酸含量(μg/mL)= [(△A +0.5255)÷0.0074×V1]÷(V3×V1÷V2)=1351×(△A+0.5255)
3、按照蛋白浓度计算
谷氨酸含量(µg/mg prot)=[(△A +0.5255)÷0.0074×V1]÷(V1×Cpr)=135.1×(△A+0.5255) ÷Cpr
4、按照样本质量计算
谷氨酸含量(µg/g鲜重)=[(△A +0.5255)÷0.0074×V1]÷(W ×V1÷V2)=270.2×(△A+0.5255) ÷W
5、按照细菌或细胞密度计算
谷氨酸含量(μg/104 cell)=[(△A +0.5255)÷0.0074×V1]÷(1000×V1÷V2)=0.27×(△A+0.5255)
V1:加入反应体系中样本体积,1mL;V2:加入提取液体积,2 mL;V3:加入血清(浆)或细胞培养液体积,0.2 mL; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;1000:细菌或细胞总数,1000万。
注意:
1、该试剂盒仅适用于发酵液或组织中谷氨酸含量测定,检测下限为100µg/mL。
2、标准曲线线性范围为:100µg/mL -600µg/mL。
3、ΔA线性范围为:0.01-2;若大于2则需要将上清液用试剂一稀释至适当倍数后测定,计算公式中乘以相应稀释倍数。


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文献和实验相关实验
谷氨酸脱氢酶将氨固定在α -酮戊二酸上而形成的。谷氨酸作为氨基转移反应系统的媒介,在一般氨基酸的同化、异化过程中占有重要的地位。同时, N-乙酰谷氨酸可促进尿素循环。基于上述原因,体内谷氨酸含量很高。
〔1〕天然多聚谷氨酸。在脾脱疽菌的被膜物质中或枯草菌的培养液中有多聚-γ-D-谷氨酸。此化合物具有免疫特异性,但不显示双缩脲反应,并且不能被蛋白酶分解。完全水解产生D-谷氨酸。 〔2〕是N-羧基-γ-乙基谷氨酸酯的无水物聚合生成的多聚谷氨酸,不显示免疫特异性,能产生双缩脲反应。可被胰脏蛋白酶、羧肽酶、木瓜蛋白酶分解。
huangwenshu 请问“胱氨酸/谷氨酸反向转运体”的作用是什么,他的前体谷氨酸和半胱氨酸那个对他的作用影响较大? Fasta921 在生理状态下Glu/胱氨酸转运体(XC-)释放一分子的Glu,摄取一分子的胱氨酸入细胞内,两者藕联转运。胱氨酸在细胞内迅速被还原为半胱氨酸,一部分参与细胞内重要自由基清除剂谷胱甘肽的合成,另一部分则出细胞氧化成胱氨酸,重新参与XC-系统循环。 在正常情况下,Glu与胱氨
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谷氨酸(glutamic acid,Glu)含量测定试剂盒
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