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- 尚恩生物(SUNNCELL)
- SNL-227
- 2026年01月12日
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- 详细信息
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- 技术资料
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细胞基本属性 |
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| 细胞名称 | ARPE-19人视网膜色素上皮细胞 |
| 细胞别称 | ARPE19；AdultRetinalPigmentEpithelialcellline-19；NTC-200；NTC200 |
| 细胞货号 | SNL-227 |
| 来源 | 视网膜色素上皮；自发永生；19岁 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样 |
| 细胞类型 | 正常细胞 |
| 生长特性 | 贴壁 |
| 收录 | ATCC |
| 生物安全等级 | 1 |
| 培养条件 | DMEM+10% FBS+1% P/S（货号：SNLM-227) |
| 培养环境 | 37℃；5% CO2；饱和湿度 |
| 细胞简介 | ARPE-19细胞是一种自发产生的视网膜色素上皮（RPE）细胞系，来源于一名19岁男性的正常眼睛，该男性死于机动车事故中的头部创伤。ARPE-19细胞在DMEM培养基和Ham's F12培养基的1:1混合物中建立，培养基含有HEPES缓冲液、20%胎牛血清、56mM终浓度碳酸氢钠和2mM L-谷氨酰胺，并在37℃和10%CO2中孵育。在传代组织块底层细胞前对细胞进行了前四代选择性胰蛋白酶处理以去除表面细胞，到第5代时，培养物即是快速生长的RPE细胞，其形成鹅卵石单层，在培养数月后着色，细胞形成稳定的单层，表现出形态和功能极性。ARPE-19细胞在低血清浓度的培养基中，将细胞涂布在层粘连蛋白涂层的Transwell COL膜上时，细胞表现出形态学极化。ARPE-19细胞在培养4周后，它们形成紧密的连接，单层的跨上皮电阻达到最大50至100欧姆/cm2。ARPE-19细胞表达RPE特异性标记物CRALBP和RPE-65，细胞为二倍体，可传30代以上，在ATCC鉴定期间进行的长寿试验中，发现子代又可以进行另外48次传代。ARPE-19细胞可以用于3D细胞培养，也是一种合适的转染宿主。 |
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文献和实验吸出培养瓶中的培养基，用PBS液洗涤1-2次； 加入已经在37度预热的消化液(0。25%胰酶+0。02%EDTA)少量(估计可以平铺培养瓶底部即可）； 在镜下看到细胞退缩变园，立即给予少量培养基终止消化，我一般的消化时间就在1分钟之内很好消化； 再用弯管吹打细胞成单细胞悬液后，按1：2或1：3分瓶即可。
上皮层。以PBS液漂洗眼杯2次，吸干； 4. 加入0.01%EDTA-0.125%胰蛋白酶的混合消化液，置于无菌的烧杯中。于37℃恒温箱中消化30min； 5. 吸去消化液。用PBS液稍洗。加入有血清培养液终止消化酶的作用，并用毛细吸管轻轻吹打眼杯内壁，以使视网膜色素上皮细胞脱落； 6. 收集眼杯内的细胞悬液，离心（800r/min）8min； 7. 弃上清液，将沉淀的视网膜色素上皮细胞重新用培养液悬浮。计数； 8. 以8×104—10×104
在 Am J Physiol Cell Physiol 上的一篇研究论文。题目：High glucose promotes the migration of retinal pigment epithelial cellsthrough increased oxidative stress and PEDF expression。从题目中，我们就可以看出，本文主要讲的就是高糖通过增加氧化应激和 PEDF 表达促进视网膜色素上皮细胞的迁移。题目有点长，其实文章内容也很多，多达 17 页！对于初学
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