- ￥550
- YLKBIO
- YLK0107
- 国产
- 2025年12月17日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
85
- 英文名：
/
- CAS号：
/
- 保质期：
1年
- 供应商：
优利科（上海）生命科学有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
100管/96样
中文名称：NAD苹果酸脱氢酶（NADMDH）测试盒(微量法)
货号：YLK0107
测试方法：微量法
产品规格：100管/96样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
MDH （EC 1.1.1.37）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，线粒体中 MDH 是 TCA 循环的关键酶之一，催化苹果酸形成草酰乙酸；相反，胞浆中 MDH 催化草酰乙酸形成苹果 酸。草酰乙酸是重要的中间产物， 连接多条重要的代谢途径。因此，MDH 在细胞多种生 理活动中扮演着重要的角色，包括线粒体的能量代谢、 苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧 代谢和抗病性等。根据不同的辅酶特异性，MDH 分为 NAD-依赖的 MDH 和 NADP-依赖的 MDH，细菌中通常只含有 NAD-MDH，在真核细胞中，NAD-MDH 分布于细胞质和线粒体 中。
测定原理
NAD-MDH 催化 NADH 还原草酰乙酸生成苹果酸，导致 340nm 处光吸收下降。
本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断!
需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板和 蒸馏水。
试剂的组成和配制：
试剂一、提取液 100 mL×1 瓶，在 4℃保存；
试剂二、液体 20 mL×1 瓶，在 4℃保存；
试剂三、粉剂×1 瓶，-20℃保存
样本测定的准备：
1、细菌、细胞或组织样品的制备： 细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量 （104个）：试剂一体积（mL）为 1000~2000：1 的比例（建议 2000 万细菌或细胞加入 1mL 试剂一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。 组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织， 加入 1mL 试剂一），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）样品：直接检测。
测定步骤：
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 340nm，蒸馏水调零。
2、检测工作液的配制：用时在试剂三中加入 19mL 试剂二和 0.5mL 蒸馏水，充分混匀待用； 用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。； 3、测定前将检测工作液在 37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）水浴 10min 以上。
4、在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 5μL 样本和 195μL 工作液，混匀后立即记录 340nm 处 20s 时的吸光值 A1 和 1min20s 后的吸光值 A2，计算 ΔA=A1-A2。
注意：若 A1-A2 大于 0.5，需将样本用提取液稀释，使 A1-A2 小于 0.5，可提高检测灵敏度。 计算公式中乘以相应稀释倍数。
如需了解更多有关于NAD苹果酸脱氢酶（NADMDH）测试盒(微量法)的信息或说明书敬请联系我们！期待与您的合作！
| 辅酶ⅠNAD(H)含量测试盒 | 微量法 |
| 辅酶ⅠNAD(H)含量测试盒 | 可见分光光度法 |
| NAD激酶（NADK）测试盒 | 微量法 |
| NAD激酶（NADK）测试盒 | 可见分光光度法 |
| 乳酸脱氢酶（LDH）测试盒 | 微量法 |
| 乳酸脱氢酶（LDH）测试盒 | 可见分光光度法 |
| 乳酸脱氢酶（LDH）测试盒 | 微量法 |
| 乳酸脱氢酶（LDH）测试盒 | 可见分光光度法 |
| NAD苹果酸脱氢酶（NADMDH）测试盒 | 微量法 |
| NAD苹果酸脱氢酶（NADMDH）测试盒 | 紫外分光光度法 |
| NADP苹果酸脱氢酶（NADPMDH）测试盒 | 微量法 |
| NADP苹果酸脱氢酶（NADPMDH）测试盒 | 紫外分光光度法 |
| 线粒体呼吸链复合体Ⅰ/NADH辅酶Q还原酶测试盒 | 微量法 |
| 线粒体呼吸链复合体Ⅰ/NADH辅酶Q还原酶测试盒 | 紫外分光光度法 |
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验内苹果酸脱羧生成丙酮酸(pyruvate，Pyr)，反应由NADP苹果酸酶催化，生成的NADPH可用于C3途径中CO2的还原。 (2)NAD-ME型 天冬氨酸经天冬氨酸转氨酶作用下转氨基形成OAA，再经NAD-苹果酸脱氢酶作用下生成苹果酸，然后在NAD-苹果酸酶催化下脱羧生成丙酮酸并释放CO2，这些过程都在BSC的线粒体中进行，生成的丙酮酸在细胞质中由丙酮酸转氨酶催化形成丙氨酸，然后进入叶肉细胞。 (3)PCK型 天冬氨酸经天冬氨酸转氨酶作用变成草酰乙酸，然后再在PEP羧激酶的催化下变为PEP
1个ATP。 由于丙酮酸羧化酶仅存在于线粒体内，胞液中的丙酮酸必须进入线粒体，才能羧化生成草酰乙酸，而磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶在线粒体和胞液中都存在，因此草酰乙酸可在线粒体中直接转变为磷酸烯醇式丙酮酸再进入胞液中，也可在胞液中被转变为磷酸烯醇式丙酮酸。但是，草酰乙酸不能通过线粒体膜，其进入胞液可通过两种方式将其转运：一种是经苹果酸脱氢酶作用，将其还原成苹果酸，然后通过线粒体膜进入胞液，再由胞液中NAD+-苹果酸脱氢酶将苹果酸脱氢氧化为草酰乙酸而进入糖异生反应途径，由此可见，以苹果酸代替草酰乙酸透过
。鉴于NADH, NAD+ 在340nm及260nm 处有各自的最大吸收峰，因此以NAD+为辅酶的各种脱氢酶类都可通过340nm光吸收值的改变，定量测定酶活力，如苹果酸脱氢酶、醇脱氢酶、醛脱氢酶、甘油－3－3磷酸脱氢酶等。 本实验测乳酸脱氢酶活力，是在一定条件下，向含丙酮酸及NADH的溶液中，加入一定量乳酸脱氢酶提取液，观察NADH在反应过程中340 nm 处光吸收减少值，减少越多，则LDH活力越高。其活力单位定义是：在25℃，pH7.5条件下每分钟A340下降值为1.0的酶量为1个单位
技术资料