- ￥720
- Solarbio
- 北京
- BC1045
- 2025年07月12日
企业认证
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
6个月
- 英文名：
NAD-Malate Dehydrogenase(NAD-MDH) Activity Assay Kit
- 库存：
99
- 供应商：
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号：
BC1045-100T/96S
- 规格：
100管/96样
NAD-苹果酸脱氢酶（NAD-MDH）活性检测试剂盒说明书
微量法
货号：BC1045
规格：100T/96S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 提取液 | 液体100 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂一 | 液体20 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 粉剂×1支 | -20℃保存 |
| 试剂三 | 粉剂×1支 | -20℃保存 |
- 试剂二：临用前加入360 μL双蒸水，用不完的试剂仍-20℃保存；
- 试剂三：临用前加入327 μL双蒸水，用不完的试剂仍-20℃保存。
MDH（EC 1.1.1.37）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，线粒体中MDH是TCA循环的关键酶之一，催化苹果酸形成草酰乙酸；相反，胞浆中MDH催化草酰乙酸形成苹果酸。草酰乙酸是重要的中间产物，连接多条重要的代谢途径。因此，MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色，包括线粒体的能量代谢、苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。根据不同的辅酶特异性，MDH分为NAD-依赖的MDH和NADP-依赖的MDH，细菌中通常只含有NAD-MDH，在真核细胞中，NAD-MDH分布于细胞质和线粒体中。
NAD-MDH催化NADH还原草酰乙酸生成苹果酸，导致340nm处光吸收下降。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/ 96孔板（UV板）、研钵/匀浆器、蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料”附件
注意事项：
- 粗酶液的提取必须在0℃-4℃中操做完成，以防止酶变性失活。
- 实验时，试剂二、试剂三和样本在冰上放置，以免变性和失活。
- 使用光径为1cm的微量石英比色皿时当初始读值小于0.7或者ΔA大于0.5时建议稀释后测量。使用96孔UV板时当初始读值小于0.4或者ΔA大于0.3时建议稀释后测量。
- 建议一人加样一人比色。因时间监测范围小，不推荐用96孔UV板同时测多个样本。
- 取0.05g大鼠肝脏加入1mL提取液进行匀浆研磨，取上清后按照测定步骤操作，使用微量石英比色皿测得计算ΔA测定管=A1测定-A2测定=0.8484-0.3068=0.5416，ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.7628-0.7583=0.0045，按样本质量计算酶活得：NAD-MDH（U/g 质量）=6431×(ΔA测定-ΔA空白) ÷W=6431×0.5371÷0.05=69082 U/g 质量。
- 取0.05g柳树叶加入1mL提取液进行匀浆研磨，取上清后按照测定步骤操作，使用微量石英比色皿测得计算ΔA测定管=A1测定-A2测定=0.7796-0.6917=0.0879，ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.7628-0.7583=0.0045，按样本质量计算酶活得：NAD-MDH（U/g 质量）=6431×(ΔA测定-ΔA空白) ÷W=6431×0.0834÷0.05=10727 U/g 质量。
- 取5μL血浆直接按照测定步骤操作，使用微量石英比色皿测得计算ΔA测定管=A1测定-A2测定=0.8194-0.7959=0.0235，ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.7628-0.7583=0.0045，按血清/血浆体积计算酶活得：
NAD-MDH（U/mL）=6431×(ΔA测定-ΔA空白)=6431×0.019=122 U/mL。
参考文献：
- Yao Y X, Li M, Zhai H, et al. Isolation and characterization of an apple cytosolic malate dehydrogenase gene reveal its function in malate synthesis[J]. Journal of plant physiology, 2011, 168(5): 474-480.
BC0310/BC0315 辅酶Ⅰ NAD（H）含量检测试剂盒
BC1030/BC1035 NAD激酶（NADK）活性检测试剂盒
BC0630/BC0635 NADH氧化酶（NOX）活性检测试剂盒
BC1130/BC1135 NAD-苹果酸酶（NAD-ME）活性检测试剂盒
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验| AuthorZhuo Li, Boguang Yang, Zhengmeng Yang, Xian Xie, Zhengnan Guo, Jianyang Zhao, Ruinan Wang, Hao Fu, Pengchao Zhao, Xin Zhao, Guosong Chen, Gang Li, Fuxin Wei, Liming Bian | Publish_toADVANCED MATERIALS |
| IF29.4000 | PMID38295393 |
高等动物（牛、羊、狗、猫等）的肝脏及弱氧化醋杆菌（ Acetobacter subaxydans等）中存在的一种酶。催化 D-葡萄糖 NAD（ P） D-葡糖酸（的内酯） NAD（ P） H的反应。来源于动物的酶（ EC． 1． 1． 1． 47）既能利用 NAD，也能利用 NADP。虽然对 D-木糖也显有 25％的活性，但对其他天然己糖和戊糖则几乎没有作用（动物）。醋酸杆菌属（ Acetobacter）的酶（ EC1． 1． 1． 119）对 NADP具有是特异的作用，但也能作用
系可逆地催化醇脱氢形成醛（或酮）的酶，参与醇的发酵。 EC1． 1． 1． 1。 CH3 CH2 OH NAD CH3 CHO NADH H 。底物专一性较广，亦作用于其他的醇。除酵母外，也广泛存在于高等植物（特别在发芽时活性增强）、动物肝脏、细菌等生物界。已从酵母（ E． Negelein， H． J． Wulff1937）或肝脏中以结晶状态被提取出来。由酵母获得的结晶分子量约 15万，由 4个亚基组成，与 4个 NAD 及锌结合的 SH酶。肝脏
由中国中医科学院实验研究中心 LiShuang Li 提供。 尽管大多数自发荧光在紫外-绿光范围内可以被激发，但自发荧光分子也有明显的激发窗口，并形成相对广泛的激发光谱。以上因素结合在一起，使得在使用带有专用荧光刺激光源和比肉眼更敏感的光子探测器的成像系统时，更容易遇到自发荧光现象（图 1，右图：橙色信号）。 生命科学研究中常见的自发荧光来源 1.烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，或称 NAD（P）H，是一种分布于细胞质中的代谢辅助因子和电子载体，它是糖酵解和磷酸戊糖途径的一个关键组成
技术资料需要更多技术资料 索取更多技术资料
