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- C3501-0020/C3501-0100
- 2026年01月08日
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- 供应商：
上海逍鹏生物科技有限公司
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充足
- 英文名：
MSC ACF Tissue Digestive Mix
- 规格：
20ml，100ml/瓶
【产品介绍】 以特定酶自组织块分离出原代间充质干细胞是常见的细胞培养技术。ACF高效原代间充质干细胞分离液利用数种重组表达的消化酶制备而成，无动物源成分。ACF高效原代间充质干细胞分离液针对组织的细胞外基质而设计, 不含胰酶，不会伤害细胞。可以有效地消化细胞外基质，进而从组织块 (脐带、脂肪、胎盘) 分离出大量的原代间充质干细胞，作为后续细胞增殖使用。
【预期用途】使用AF高效原代干细胞分离液由组织块(脐带、脂肪、胎盘)分离出间充质干细胞，提供后续培养增殖。
【主要组成成分】由数种重组表达、无物动源的酵素和培养基组合而成。
【适应范围】收获目标组织(脐带、脂肪、胎盘)的原代干细胞,以做细胞体外增殖培养。
【使用方法】（以脐带组织为例）
1. 将脐带用DPBS (VC, Cat#C3590-0500) 漂洗干净，剪成1-50px大小，剔除血管。
2. 将组织块剪成3-5mm3，移入50ml离心管，再加入适量的分离液。
* 一条长度10公分的脐带建议加入10ml的分离液；或者组织块 : 分离液（vol）= 1:1。
** 视情况而定，可自行在分离液中添加1%青链双抗(VC, Cat# C3420-0100) 。
3. 把50ml离心管横放在37度细胞培养箱，过夜反应（16小时）。
* 若总反应体积较大，也可持续旋转混合。
4. 加入和分离液等体积的0.05%EDTA（BI, Cat# 03-015-1B）终止反应后，1500 xg离心5分钟，去除上清。
* 溶液比较浓稠，小心不要影响下层的细胞; 建议留下5ml左右的溶液。
** 若是脂肪组织，没有粘稠的情形，以常规的200-300 xg离心即可。
*** 没有EDTA, 可使用无钙镁DPBS取代；此时建议后面步骤6多重复2-3次，以确实去除酵素。
5. 以和分离液等体积的无钙镁DPBS重悬细胞后，500 xg离心5分钟，去除上清。
6. 再次以和分离液等体积的无钙镁DPBS重悬细胞后，250 xg离心5分钟，去除上清。
7. 用适量的培养基重悬细胞后，即可按常规细胞培养方法接种P0代细胞培养。
* 消化后的原代细胞，建议培养时接种密度提高到10,000/cm2以上；传代后即可按常规的接种密度培养 。
【使用方法】（以皮下脂肪组织块为例）
1. 将新鲜的皮下脂肪组织块以DPBS (VC, Cat#C3590-0500) 漂洗干净，剔除明显的血管或血块。
2. 组织块剪成3-5mm3，移入50ml离心管，再加入适量的分离液。
* 1克组织块加入约5ml分离液
** 视情况而定，可自行在分离液中添加1%青链双抗(VC, Cat# C3420-0100)
3. 把50ml离心管横放在37度细胞培养箱，反应4小时 (用户也可自行调整反应时间)。
* 若总反应体积较大，也可使用旋转混合仪器。
4. 加入和分离液等体积的0.05%EDTA（BI, Cat#03-015-1B）终止反应后，250 xg离心5分钟，去除上清。
* 没有EDTA, 也可使用无钙镁DPBS取代。
5. 以和分离液等体积的无钙镁DPBS重悬细胞后，250 xg离心5分钟，去除上清。
6. 再次以和分离液等体积的无钙镁DPBS重悬细胞后，250 xg离心5分钟，去除上清。
7. 用适量的培养基重悬细胞，再以100目的筛网过滤细胞液后，即可按常规细胞培养方法接种细胞培养。
* 消化后的原代细胞，建议培养时接种密度提高到10,000/cm2以上；传代后即可按常规的接种密度培养。
资料下载：AF高效原代干细胞分离液说明书
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