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Platinum SuperFi II PCR 预混液特点包括:
•卓越的300 > X Taq 保真度
•60°C 下的通用引物退火温度
• 出色的特异性、灵敏度和得率
•难扩增靶点的稳健扩增(例如,纯度不佳、GC 含量65 ˃%、PCR 要求繁琐)
Platinum SuperFi II DNA 聚合酶是一种经工程改造的酶,具有高持续合成能力,并能够很好地耐受 PCR 抑制剂。它还匀许快速循环实验方案和扩增长靶标(长达 20 kb)。Platinum 热启动技术使用专有抗体,可在 PCR 变性步骤之前抑制酶活性,防止非特异性扩增和引物降解。该技术还可在室温下进行反应构建,提高了灵敏度和产量。
由于 SuperFi II PCR 缓冲液的独特成分,大多数引物对的退火温度均为 60°C,且遵循一般设计规则设计。缓冲液中的等稳定分子可提高退火步骤中引物-模板双链体稳定性,并可增强特异性,而无需优化每个引物对的退火温度。使用 Platinum SuperFi II DNA 聚合酶,可以使用同一方案将不同的 PCR 测定共循环,该方案即使用通用引物退火温度和为待扩增的最长片段选择的延伸步骤。
Platinum SuperFi II DNA 多聚酶的应用:
•高保真 PCR
•克隆和亚克隆
•位点定向诱变
•高 GC 含量 的模板扩增
•用于测序的模板生成
•高通量 PCR
•扩增纯度不佳的样品
•长链 PCR
•快速 PCR
除此之外,我们还使用预混液 Platinum SuperFi II Green PCR 预混液。该预混液额外含有一种密度试剂和两种示踪染料,使得 PCR 扩增完成之后可以直接进行凝胶上样,进一步简化 PCR 工作流程,减少移液步骤。
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PCR 新手指南——手把手教您如何正确选择合适的 PCR 酶
重要。为了确保准确进行 DNA 拷贝,请确保选择高保真 DNA 聚合酶。高保真 PCR 酶具有 3'-5’ 核酸外切酶校对活性。当结合错误匹配的碱基对时,DNA 聚合酶停顿,导致合成暂延。合成暂延 允许去除错误匹配的核苷酸并使用正确的核苷酸取代。 保持序列准确的 DNA 聚合酶的绝佳选择是 Invitrogen SuperFi 或 Thermo Scientific Phusion 高保真DNA聚合酶。这两种酶具有高保真度,准确度是 Taq DNA 聚合酶的 300 倍或 52 倍,并且具有很高的产率。 Q
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