Dxy_OPTI MEM I W/GLUTAMAX-I 50

OPTI-MEM进行贴壁细胞培养的实验方法

清培养基OPTI-MEM(GIBICO) 5、转染级质粒 二、实验步骤 invitrogen的LIPOFECTAMINE 2000说明书上列举了24孔、12孔、6孔......板的实验体系，因为需要转染的细胞量大，所以一直采用的是6孔版做的转染。以下是以6孔板为例说明一下我的体系和方法吧! 1、转染前一天，以合适的细胞密度接种到6孔培养板上。(我的接种密度是3~4*105/ml.)转染时，细胞要达到90~95%的融合。 2、溶液1：240ul 无血

大神教你瞬时转染快，准，狠！

板液体每孔在 2ml 左右，不宜太多，或者太少。取两个 1.5mlEP 管，记为 A 管，B 管，每个 EP 管加入 250ul Opti-MEM I，然后 A 管加入 5-10ul lipofectamine 2000，B 管加入 100pM-200pM 的 siRNA（见买来的 siRNA 说明书），然后静置 5min，混合在一起，静置 20min，用 AB 混合液加入到 1.5ml 的无血清培养基 C 内，混匀； 将六孔板里的细胞的液体吸出，用 PBS 清洗两遍； 将 ABC 混合液 2ml

【资源】RNA干扰

漂洗细胞2次，加入无血清基础培养基opti-MEM 1.5mL； 3. 将溶解后的siRNA稀释于250?l无血清的基础培养基opti-MEM中；取5-10ul脂质体混匀于250?l无血清的基础培养基opti-MEM中。静置5min； 4. 将脂质体稀释液及siRAN稀释液混合，轻轻混匀，室温放置20分钟； 5. 将脂质体-siRNA混合液加入细胞培养孔中； 6. 6小时后吸弃转染复合物，换入含10%胎牛血清的新鲜培养基； 7. 细胞在 CO2 培养箱中 37 ℃温育