AH109-pBridge系统酵母三杂培养基套装
储存温度:序号 1-6 常温保存,序号 7-8 需-20℃储存,蓝冰运输。
产品组分说明:
1:产品组分设计针对于已知蛋白验证性实验,如需要筛库,部分筛选培养基需求量大,可单独购买。
2:产品组分设计转化方案是共转,简化培养基使用种类和操作流程。
3:如需要分步转化,单独检测自激活,培养基略有不同,可在购买前跟本公司协商调换试剂盒培养基成分。
4:酵母三杂针对于 Bridge 蛋白互作,实验一般很顺畅,对于 Inhititor/blocker蛋白互作,实验常常会遇到问题。
产品组成:(0.5 L/pouch)
使用说明:
Yeast Three-Hybrid Media Kit(YM3000 酵母三杂培养基套装)包含酵母三杂验证性实验所需要的全部培养基。整套销售,性价比更高。培养基以非常方便使用的铝箔袋形式包装,每个独立包装可以配制 0.5 L 的培养基。使用时仅需要将袋中的所有干粉倒入三角瓶或培养瓶中,加入 0.5 L 的 ddH2O,然后 121℃灭菌 15分钟即可。无需称量和调整 pH 值。
Yeast Three-Hybrid Media Kit Plus(YM3001)在 Yeast Three-Hybrid Media Kit(YM3000)基础上增加了 3-AT(用于自激活抑制)和 X-α-gal(互作蓝白斑显色验证)。 使用方法:
Rich Liquid Media (Broth)
1. 序号1产品 YPDA 每袋干粉倒入三角瓶或培养瓶中,加0.5 L 的去离子水中溶解。
2. 如有必要,调 pH 至6.5。121℃高压灭菌十五分钟。
3. 避光、室温条件下储存灭菌培养基备用。
Minimal Plating Media with Agar
1. 序号2-6产品,每袋干粉倒入三角瓶中,加0.5 L 的去离子水,搅拌溶解(琼脂高温灭菌后溶解)。
2. 如有必要,调节 pH 至5.8。121℃高压灭菌15分钟。
3. 冷却到50℃把培养基倒入平板中,室温使其凝固。封口膜封好后倒置保存在4℃冰箱。
3-AT 的使用方法:
1.计算所需平板的数量,计算配置培养基体积;
2.设置3-AT 的浓度梯度(建议设置10-50mM 的浓度梯度,常见浓度约30mM );
3.灭菌筛选培养基,待培养基冷却到55℃左右,加入3-AT 母液,摇匀后倒板;
4.标记每个平板的3-AT 浓度,超净台冷却凝固后,将转化或培养物涂板;
5.28-30℃培养 3-5天。
X-a-gal 的使用方法:
(一)涂布于预制平板:
1. 储存液配制:溶解24 mg X-α-gal 于6 mL DMF,终浓度为4 mg/mL。
2. 涂布200 μl(15 cm) 或者100 μl(10 cm)X-α-gal 储存液于预制平板上。
3. 置于37 ℃培养箱至液体被吸收(DMF 挥发性低,最长可放4小时)。
4. 将转化细菌或酵母涂于平板上,于37 ℃或30 ℃培养直至蓝色菌斑出现。
(二)直接加入培养基中:
1. 储存液配制:溶解60 mg X-α-gal 于3 mL DMF,终浓度为20 mg/mL。
2. 将已灭菌固体培养基冷却至50-55 ℃。
3. 加入 2-10 ml X-α-Gal 储存液,混匀,快速倒平板。
酵母三杂筛库流程参考:
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!