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- 2025年07月15日
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文献和实验荧光素酶的发光是酶促反应产生的自发光，不需要激发光，但需要底物荧光素。不同的荧光素酶所需的底物不同。例如，萤火虫荧光素酶的底物是 D-荧光素，海肾荧光素酶的底物是腔肠素。其中，D-荧光素的使用频率最多，荧光素在氧气、ATP 存在的条件下和荧光素酶发生反应，生成氧化荧光素，并产生发光现象。 目前市场上 D-荧光素主要有三种形式，D-荧光素（游离酸）、D-荧光素（钠盐）和 D-荧光素（钾盐）。这三种形式主要区别在于溶解特性，配成溶液后，其在绝大多数应用上都没有实质性的差别，整体来看，钾盐在活体
和其它甲虫荧光素酶是分子量相对较大的酶，分子量大小约为 60kDa，底物为 D-荧光素，需要辅助因子 ATP 和 Mg2+。FLuc 发出的是黄红光，发射光峰值为 560nm。 海肾荧光素酶（RLuc）是一种从 Renilla reniformis 分离的分子量大小为 36 kDa 的荧光素酶。与 FLuc 相比，海肾荧光素酶的底物和辅助因子需求不同。RLuc 在氧气存在下催化腔肠素，产生 480 nm 的蓝光。海肾萤光素酶因其与 FLuc 在底物要求和光输出方面的差异而可用于双重报告检测。 近年
相关专题 在调控位点分析中，Luciferase主要采用的方法为：片段缺失、定点突变 ，流程如下所示。 图1 片段缺失分析 位点流程图 图2 定点突变分析位点流程图 荧光素酶报告基因检测法是转录调控研究中十分重要的实验手段。但其结果往往存在一定的误差。未解决这一问题，现普遍采用双荧光素酶报告基因检测法。在双荧光素酶报告基因测试中，将萤火虫荧光素酶作为实验报告基因，海肾荧光素酶作为对照报告
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