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- 翌圣生物（Yeasen）
- 20201ES86
- 上海翌圣
- 2026年05月02日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
BCA Protein Quantification Kit
- 保质期：
有效期1年
- 供应商：
翌圣生物科技（上海）股份有限公司
- 保存条件：
冰袋运输。试剂盒中的A、B液室温或4℃保存
- 规格：
2500T(500ml)
产品描述
BCA（Bicinchoninic acid）法是目前应用比较广泛的蛋白质浓度测定方法。基于双缩脲反应，即在碱性环境下蛋白质将Cu2+还原成Cu+，产生一种紫蓝色复合物，在562nm处有高的吸光值，该反应产物的量与蛋白质浓度成正比。BCA蛋白浓度测定法实现了蛋白质浓度测定的简便、灵敏、快速和稳定性。试剂盒中提供的蛋白标准品为用户制作标准曲线提供了便利。
该BCA蛋白浓度测定试剂盒可用于比色皿法检测，也可用于微孔板法检测。前者虽需较大量（100μL）的蛋白样品，但由于其在检测中使用蛋白样品与BCA工作液的比率为1:20（v/v），从而降低干扰物质带来的影响。后者操作简单方便，仅需少量（10-25μL）的蛋白样品。不过，由于其在检测中使用蛋白样品与BCA工作液的比率为1:8（v/v），某种程度上限制干扰物质的承受浓度以及降低最低检测水平。我司提供三种规格的BCA蛋白浓度检测试剂盒，比色皿法分别可做50次，250次，500次。酶标法分别可做500次，2500次，以及5000次。
产品特点
1）灵敏度高，最小检测蛋白量可达0.2μg，检测浓度下限达到10μg/mL。
2）速度快，比一般的BCA蛋白浓度测定试剂盒显色所用时间短。比传统的Lowry法检测速度约快4倍。
3）线性范围广，20-2000μg/mL浓度范围内有较好的线性范围。
4）不受大部分样品中的化学物质的影响，详情见附表1。
产品组分
|
编号 |
组分 |
产品编号/规格 |
储存 | ||
|
20201ES76（500T） |
20201ES86（2500T） |
20201ES90（5000T） | |||
|
20201-A |
BCA试剂A |
100mL |
500mL |
2×500mL |
4℃ |
|
20201-B |
BCA试剂B |
3mL |
15mL |
2×15mL |
4℃ |
|
20201-C |
蛋白标准品（BSA） |
5×1mL（2mg/mL） |
10×1mL（2mg/mL） |
10×2mL（2mg/mL） |
4℃ |
运输与保存方法
冰袋运输。试剂盒中的A、B液室温或4℃保存；蛋白标准品（BSA）长时间不用，可置于-20℃保存，有效期12个月。
注意事项
1）使用BCA蛋白测定法测定时颜色会随着时间的延长不断加深，并且显色反应的速度和温度有关，因此需注意保持定时和定温，以确保精确定量。
2）低温或长期保存，若发现BCA试剂A或者试剂B有沉淀发生。请37ºC温育并伴随搅拌促使其充分溶解。如发现细菌污染，则应丢弃，避免对实验结果造成影响。
3）实验操作规范，提高上样量的精确度。
4）每次测定都需做相应的标准曲线，因为显色反应与温度和时间的变化有关，精准的蛋白定量宜每次都做标准曲线。
5）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
6）本产品仅作科研用途！
操作方法
一、配制标准品和工作液
1. 配制BSA标准品体系
标准品稀释液为蛋白样品的溶解液，原则上蛋白样品在什么溶液中，标准品也宜用什么溶液稀释。但也可用0.9%的NaCl或1×PBS进行稀释。BSA标准品体系配制可参考表1和表2。
表1 BSA标准品体系配制（比色皿检测，线性范围20-2000μg/mL）*
|
Vial |
稀释液体积（μL） |
2mg/mL BSA体积（μL） |
BSA终浓度（μg/mL） |
|
A |
0 |
100 |
2000 |
|
B |
25 |
75 |
1500 |
|
C |
50 |
50 |
1000 |
|
D |
125 |
75 |
750 |
|
E |
150 |
50 |
500 |
|
F |
350 |
50 |
250 |
|
G |
375 |
25 |
125 |
|
H |
395 |
5 |
25 |
|
I |
400 |
0 |
0=Blank |
*如用比色皿检测，每管需加100μL标准品，按3个重复计算，每个浓度至少需配制300μL。
表2 BSA标准品体系配制（微孔板检测，线性范围20-2000μg/mL）*
|
Vial |
稀释液体积（μL） |
2mg/mL BSA体积（μL） |
BSA终浓度（μg/mL） |
|
A |
0 |
30 |
2000 |
|
B |
9 |
21 |
1400 |
|
C |
12 |
18 |
1200 |
|
D |
15 |
15 |
1000 |
|
E |
21 |
9 |
600 |
|
F |
24 |
6 |
400 |
|
G |
27 |
3 |
200 |
|
H |
49 |
1 |
40 |
|
I |
30 |
0 |
0=Blank |
2. 配制BCA工作液
1）计算所需要的总BCA工作液体积。
总BCA工作液体积=（标准品+待测样品）×重复数×每个样品所需要的BCA工作液
【注】：比色皿检测时每个样品加2.0mL BCA工作液，微孔板检测每个样品加200μL BCA工作液。
2）配制BCA工作液：50体积的BCA试剂A中加入1体积的BCA试剂B（A:B=50:1），充分混匀。
【注】：BCA试剂B加入BCA试剂A中后，迅速浑浊，通过混匀后立即变澄清。BCA工作液装入密封容器内，室温条件24h稳定。
二、检测方法
1. 比色皿检测方法（样品：BCA工作液=1:20）
1）各取100μL标准品和待测样品加入到反应管中。
2）每管加入2.0mL BCA工作液，混匀。37℃孵育30min。
【注】：也可室温孵育2h，或者60℃孵育30min。BCA检测蛋白浓度，延长孵育时间会加深颜色反应。升高温度会加快显色反应。但是温度升高和时间延长会降低检测下限，以及降低工作线性范围。若蛋白浓度很低，可在较高温度孵育或者适当延长孵育时间。
3）冷却到室温。分光光度计检测，设定波长为562nm。用装满水的比色皿对仪器校零。在10分钟内对所有样品读数。
【注】：由于BCA反应达不到真正的反应终点，即使温度降低至室温生色反应液会继续。但是，由于室温下生色比率相当低，因此若是10min内能对所有的样本进行562nm吸光度的测试，不会导致明显错误。
4）根据BSA标准品的吸光度（减去标准品中空白孔的OD值即最终的读数），绘制标准曲线（X-蛋白浓度ug/mL；Y-最终的OD562nm）。依据标准曲线和样品的稀释倍数计算样品蛋白浓度。
2. 微孔板检测方法（样品：BCA工作液=1:8）
1）各取25μL标准品和待测样品加入到微孔板中。
【注】：样品与工作液比例为1:8，若样品有限，可使用10μL标准品和待检测样品进行检测（即1:20），这时试剂盒的检测范围为125-2000μg/mL。
2）每孔加入200μl BCA工作液，振荡30s充分混匀。盖上微孔板，37℃孵育30min。
3）冷却到室温，在酶标仪上的540-595nm波长范围处检测吸光度，其中562nm波长为最佳。
【注】：a）由于酶标板的光径比比色皿短，使得酶标板检测需要更好的样品：BCA工作比率来获得相同的检测灵敏度。若使用高于562nm的检测波长，建议延长孵育时间到2h。b）延长孵育时间或者提高样品：BCA工作比会增高每个孔的OD562nm净值，并且降低检测下限和工作线性范围。
4）根据BSA标准品的吸光度（减去标准品中空白孔的OD值即最终的读数），绘制标准曲线（X-蛋白浓度ug/mL；Y-最终的OD562nm）。依据标准曲线和样品的稀释倍数计算样品蛋白浓度。
附表：BCA蛋白浓度测定的兼容性
|
名称 |
耐受浓度 |
|
Sodium bicarbonate |
100mM |
|
Sodium phosphate |
25mM |
|
2-Mercaptoethanol |
0.01% |
|
Glycercol （pure） |
10% |
|
Glycine-HCl, pH2.8 |
100mM |
|
HEPES |
100mM |
|
Hydrochloric盐酸 |
100mM |
|
Leupeptin |
10mg/L |
|
Nickel chloride （in TBS, pH8.0） |
10mM |
|
Nonidet P-40 （NP-40） |
5%（w/v） |
|
Octyl β -glucoside |
5%（w/v） |
|
Potassium thiocyanate |
3.0M |
|
SDS |
5% |
|
Sodium acetate, pH4.8 |
200mM |
|
Sodium azide |
0.20% |
|
Sodium hydroxide |
100mM |
|
Sucrose |
40% |
|
Triton X-100 |
5% |
|
Triton X-114, X-305,X-405 |
1% |
|
Tween-20, Tween-60, Tween-80 |
5% |
|
Zwittergent |
1% |
|
ACES, pH7.8 |
25mM |
|
丙|酮 |
10% |
|
Acetonitrile |
10% |
|
Ammonium sulfate |
1.5mM |
|
Aprotinin |
10mg/L |
|
Bicine, pH8.4 |
20Mm |
|
Bis-Tris, pH6.5 |
33mM |
|
Borate, pH8.5 |
50mM |
|
Brij-35 |
5% |
|
Brij-52 |
1% |
|
Brij-56, Brij-58 |
1% |
|
BugBuster protein Extraction Reagent （Cat. No. 70584） |
nointerference（undiluted） |
|
Calcium chloride （in TBS, pH8.0） |
10mM |
|
CelLytic B Reagent |
nointerference（undiluted） |
|
Cesium bicarbonate |
100mM |
|
CHAPS |
5% |
|
Cobalt chloride （in TBS, pH8.0） |
0.8mM |
|
CytoBuster Protein Extraction Reagent （Cat. No. 71009） |
nointerference（undiluted） |
|
Deoxycholic acid |
5% |
|
Dithioerythritol （DTE） |
1mM |
|
Dithiothreitol （DTT） |
1mM |
|
DMF |
10% |
|
DMSO |
10% |
|
EDTA |
10mM |
|
EPPS, pH8.0 |
100mM |
|
Ethanol |
10% |
|
Ferric chloride （in TBS, pH8.0） |
10mM |
|
Glucose |
10mM |
|
Glycerol |
10% |
|
Guanidine-HCl |
4M |
|
Imidazole, pH7.0 |
50mM |
|
MES, PH6.1 |
100mM |
|
Methanol |
10% |
|
MOPS, pH7.2 |
100mM |
|
N-Acetyglucosamine（10mM）in PBS, pH7.2 |
10mM |
|
Octyl β-thioglucpyranoside |
5% |
|
PIPES, pH6.8 |
100mM |
|
PMSF |
1mM |
|
PopCulture Reagent （Cat. No. 71092） |
nointerference（undiluted） |
|
Reportasol Extraction Buffer （Cat. No. 70909） |
nointerference（undiluted） |
|
Sodium chloride |
1M |
|
Sodium citrate, pH4.8 or pH6.4 |
200mM |
|
Sodium ortho-vanadate in PBS, pH7.2 |
1mM |
|
Span 20 |
1% |
|
TBS （150 mM NaCl, 100 mM Tris-HCl, pH8.0） |
nointerference（undiluted） |
|
Thimerosal |
0.01% |
|
TLCK |
0.1mg/L |
|
TPCK |
0.1mg/L |
|
Tricine, pH8.0 |
25mM |
|
Triethanolamine, pH7.8 |
25mM |
|
Tris |
250mM |
|
Tris（hydroxypropyl）phosphine （THP） |
1mM |
|
Urea |
3M |
|
Zinc chloride （in TBS, pH8.0） |
10mM |
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文献和实验[1] Chen P, Wang W, Liu R, et al. Olfactory sensory experience regulates gliomagenesis via neuronal IGF1. Nature. 2022;606(7914):550-556. doi:10.1038/s41586-022-04719-9(IF:49.962)
[2] Liu Y, Liu Q, Zhao L, et al. Essential role of membrane vesicles for biological activity of the bacteriocin micrococcin P1. J Extracell Vesicles. 2022;11(4):e12212. doi:10.1002/jev2.12212(IF:25.841)
[3] Xiao Y, Ma D, Yang YS, et al. Comprehensive metabolomics expands precision medicine for triple-negative breast cancer. Cell Res. 2022;32(5):477-490. doi:10.1038/s41422-022-00614-0(IF:25.617)
[4] Wang H, Shan X, Ren M, Shang M, Zhou C. Nucleosomes enter cells by clathrin- and caveolin-dependent endocytosis. Nucleic Acids Res. 2021;49(21):12306-12319. doi:10.1093/nar/gkab1121(IF:16.971)
[5] Hu X, Wang L, Wang Y, et al. RNF126-Mediated Reubiquitination Is Required for Proteasomal Degradation of p97-Extracted Membrane Proteins. Mol Cell. 2020;79(2):320-331.e9. doi:10.1016/j.molcel.2020.06.023(IF:15.584)
[6] Weng Q, Sun H, Fang C, et al. Catalytic activity tunable ceria nanoparticles prevent chemotherapy-induced acute kidney injury without interference with chemotherapeutics. Nat Commun. 2021;12(1):1436. Published 2021 Mar 4. doi:10.1038/s41467-021-21714-2(IF:14.919)
[7] Zhao H, Xu J, Huang W, et al. Spatiotemporally Light-Activatable Platinum Nanocomplexes for Selective and Cooperative Cancer Therapy. ACS Nano. 2019;13(6):6647-6661. doi:10.1021/acsnano.9b00972(IF:13.903)
[8] Weng Q, Hu X, Zheng J, et al. Toxicological Risk Assessments of Iron Oxide Nanocluster- and Gadolinium-Based T1MRI Contrast Agents in Renal Failure Rats. ACS Nano. 2019;13(6):6801-6812. doi:10.1021/acsnano.9b01511(IF:13.903)
[9] Liu C, Sun W, Zhu T, et al. Glia maturation factor-β induces ferroptosis by impairing chaperone-mediated autophagic degradation of ACSL4 in early diabetic retinopathy. Redox Biol. 2022;52:102292. doi:10.1016/j.redox.2022.102292(IF:11.799)
[10] Gao X, You J, Gong Y, et al. WSB1 regulates c-Myc expression through β-catenin signaling and forms a feedforward circuit. Acta Pharm Sin B. 2022;12(3):1225-1239. doi:10.1016/j.apsb.2021.10.021(IF:11.614)
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