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- 库存:
18
- 英文名:
BCA蛋白定量试剂盒
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海信裕生物科技有限公司
- 保存条件:
-20
- 规格:
50-500T
BCA蛋白定量试剂盒
| BCA蛋白定量试剂盒(BCA Protein Assay Kit)是根据目前世界上最常用的蛋白浓度检测方法之一-BCA(bicinchoninic acid)法改良研制而成,该试剂盒具有蛋白浓度测定的简单性,高稳定性,高灵敏度和高兼容性。本试剂盒的原理是蛋白质分子中的肽键结构在碱性环境下能与Cu2+络合生成络合物,将 Cu2+还原成Cu+,而BCA试剂可敏感特异地与Cu+结合,形成稳定的有颜色的复合物,并在562nm处有最大光吸收值,该复合物颜色深浅与蛋白质浓度成正比,可根据吸收值的大小来测定蛋白的含量,1小时内即可完成蛋白定量检测。BCA蛋白定量试剂盒含有牛血清白蛋白(BSA)溶液作为蛋白质标准溶液,测定范围为25~2000 μg/ml。该试剂盒可用于50次试管检测或500次ELISA板检测。 | ||||||||||||
组分 |
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储存 |
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| BCA Reagent A和BCA Reagent B置于室温保存,BSA蛋白标准品置于-20℃可保存一年。 | ||||||||||||
主要特征 |
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适用范围 |
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文献和实验法是十分常用的蛋白质比色定量方法,很多试剂供应商都提供基于比色皿和微孔板的BCA蛋白定量试剂盒。BCA蛋白定量法相对于其它比色定量法具有操作简单、稳定、灵敏度高等优点。相对于蛋白质的固有的280nm吸收峰检测,BCA检测法提高了蛋白检测灵敏度和特异性,消除了核酸的干扰,核酸干扰在对细胞裂解物或其他生物样品进行蛋白定量时总是一个难以避免的干扰。在碱性条件下,蛋白将Cu2+ 还原为Cu+ ,Cu+ 与BCA 试剂形成紫色络合物,如图1,其吸光值与蛋白浓度成正比。测定在562nm 处的吸收值,并与标准
蛋白定量是生物学实验不可缺少的一部分。为验证细胞裂解是否成功,或为了将多个样品进行平行实验比较或标准化保存,需对细胞裂解液进行蛋白定量;为了判定蛋白的产量,需对纯化好的蛋白进行定量;为了将纯化好的蛋白用生物素或者报告酶进行标记,同样需首先对蛋白样品进行定量,以保证标记反应在适当的化学浓度下进行。现今有很多商品化的蛋白定量试剂盒,如BCA定量试剂盒等,操作起来,简便快捷。当然也有不少实验室,还是采用传统的方法进行蛋白定量。现将蛋白定量过程中所遇的一些问题小结一下。Q1: 采用考马斯亮蓝G5-20
对象为组织样品,取适量(250~500mg)新鲜组织样品或正确保存的组织样品,加1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂(或核蛋白抽提试剂),匀浆后抽提总蛋白(或核蛋白)。实验对象为细胞样品,每份样品取1×106~1×107细胞,PBS清洗细胞,去PBS加0.1ml~1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂(或核蛋白抽提试剂)抽提总蛋白(或核蛋白)。2. 蛋白质定量:按BCA蛋白质定量试剂盒操作说明操作,测定样品浓度。3. 变性聚丙烯酰胺不连续凝胶电泳(SDS-PAGE):将准备好的样品液和预染
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