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HPLC肽谱图
方法:HPLC
原理:样品蛋白先经过酶解后进入HPLC,通过反相色谱柱根据肽段的不同保留时间进行分离,得到HPLC肽谱图。
仪器:Agilent HPLC 1200Shimadzu Prominenece UFLC
样品要求:样品量:蛋白总量>300ug,纯度>90%,浓度>1ug/ul
缓冲液推荐为50-100mM NH4HCO3(pH 7.8-8.0)或其他易挥发性缓冲溶液
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文献和实验一、氨基酸分析方法分类 氨基酸分析按其分离和检测方法的不同可分为三大类型。第一类是基于阳离子交换柱分离、柱后茚三酮衍生、光度法测定的离子交换色谱法(IEC)。此类方法由Stein和Moore两人1958年发明,并于1972年获诺贝尔奖,是当今国际标准和国家标准以及仲裁和涉外的方法。第二类是所有基于反相色谱分离、柱前衍生、荧光或紫外检测的高效液相法(HPLC)。第三类是阴离子交换分离直接安培法检测的离子色谱法IC,严格说来,阴离子交换和阳离子交换都叫“IEC”,在此将阴离子交换分离、安培检测
抗感染“战役”新篇章——阿奇霉素、左氧氟沙星、头孢曲松钠等标准品,精准打击病原体!
走在合规前沿。 全程守护: 我们有专业技术团队,提供从选品到应用的全方位支持,让你在“战疫”中无后顾之忧。 技术服务 HPLC方法学开发和验证 从色谱柱、流动相,到梯度优化与系统适用性——我们严谨验证每一个参数,确保方法:专属性强、线性靠谱、准确度在线、耐用能打! 物质含量的测定 不论您是需要单点定量还是要求精准定量(外标/内标法),我们都能提供可靠的数据支撑。 标准品合成定制服务 提供您想要的结构,专业合成路径设计+执行,助您获得高纯标准物质。 稳定同位素标记物定制服务 根据用户需求纯品或标准
毛细管电泳(capillary electrophoresis,CE)
,如:在HPLC中,因稀释之故,溶质到达检测器的浓度一般是其进样端原始浓度的1%,但在CE中,经优化实验条件后,可使溶质区带到达检测器时的浓度和在进样端开始分离前的浓度相同。而且CE中还可采用堆积等技术使样品达到柱上浓缩效果,使初始进样体积浓缩为原体积的1/10~1%,这对检测十分有利。因此从检测灵敏度的角度来说,HPLC具有良好的浓度灵敏度,而CE提供了很好的质量灵敏度。总之,检测仍是CE中的关键问题,有关研究报道很多,发展也很快。迄今为止,除了原子吸收光谱、电感耦合等离子体发射光谱(ICP)及红外光谱未
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