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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商:
艾迪基因
- 服务名称:
基因编辑服务
- 规格:
96孔板
▍单克隆筛选
单克隆筛选是一种从混合细胞群体中分离出单一克隆的过程,这一技术确保了细胞株遗传背景的一致性和稳定性,对于生物医药领域的生产和研究至关重要。例如,在基因编辑操作后,单克隆筛选用于获取含有特定基因编辑的细胞群体,确保所有细胞都具有相同的基因改变,减少实验中的变异性。在大规模生产蛋白质,单克隆筛选可确保产品质量和表达量的一致性。
艾迪基因采用的3D单细胞打印技术,可将单个细胞精确地分离,可以大大提高单克隆筛选的准确率和细胞存活率。3D单细胞打印技术采用非接触性操作,避免了机械损伤和背景污染的问题,有助于维持细胞的完整性和生物活性。3D单细胞打印技术可以避免传统的有限稀释法分单克隆时的人为误差,保证筛选结果的可靠性。

▍服务详情
| 交付标准 | 目标单克隆细胞≥1株(1×10^6/株) |
|---|---|
| 周期 | 1周 |
| 价格 | 3000元/96孔板起 ;具体可来电咨询18102225074 |
▍服务优势

▍服务流程

▍成功案例
混合细胞池在37℃/5% CO2下培养24小时后,使用单细胞打印技术,根据细胞大小和圆度的形态学标准进行单克隆分选。将细胞打印至96孔板,并在打印过程中对细胞进行连续拍摄记录,证实克隆来自于单个细胞。

单克隆分选的连续拍摄记录
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文献和实验▍参考文献
基因编辑与微流控技术相结合,为单克隆筛选带来新突破
Droplets for Gene Editing Using CRISPR-Cas9 and Clonal Selection Improvement Using Hydrogels
基因编辑与微流控技术的结合,为单克隆筛选带来了新的突破。本研究提出了一种创新方法,将CRISPR-Cas9基因编辑技术与单细胞分离技术相结合,应用于诱导多能干细胞(hiPSC)系中。通过利用液滴和水凝胶,这一方法能够优化克隆选择,显著提升单克隆筛选的效率,同时减少生成稳定细胞系所需的时间和成本。此方法不仅加速了稳定细胞系的生成,还在疾病模型和细胞生理学研究中展现出巨大的潜力,为单克隆筛选提供了更为高效、经济的解决方案。
用10%血清,此时则可以采用20%血清。 8.培养10天后将G418浓度减半,维持筛选压力。 9.筛选约14天后可见有抗性克隆出现。 10.挑单克隆: 高倍镜下标记阳性克隆,套环法或刮除法结合有限稀释法筛选阳性克隆,将其转入多孔板培养。 ●套环法:用套环套住阳性克隆,在套环内加胰酶或EDTA消化,把消化液吸到另外一个新的培养孔中培养。 ●刮除法:刮除隐性克隆,消化阳性克隆后继续筛选培养。 11.单克隆鉴定: 细胞大量扩增后,①
我做了稳定转染,从G418浓度确定到最后的单克隆化鉴定。有自己的体会也有其他战友遇到的情况, 和大家分享. 没有总结好的地方,大家补充。 筛选之前确定G418浓度: 1,由于每种细胞对G418的敏感性不同,而且不同的厂家生产的G418有效成分的比重不同,一般1g的粉剂中有效的G418含量大约为0.722g。 2,G418是新霉素的类似物,两者都是通过抑制核糖体的功能和蛋白质的合成而杀死细胞的。但是新霉素对真核细胞无作用而G418对细菌和真核细胞都起作用。neo就是编码
wo4haoren:,小弟正在用G418筛选单克隆,用的是平皿,一个平皿长了大概几百个吧,但是怎么把单克隆消化,转板呢? 没有想到好的方法,想定点消化,发现胰酶会很快扩散,消化到其他克隆,很郁闷,有做过的大侠交流下经验,不胜感激!丁香园网友cmingwen认为:可以用枪头或者是无菌的东西把单克隆刮下来,再放在孔板培养,应该可以!丁香园网友xinyinhancidian认为:一般是用克隆环,根据克隆的尺寸买克隆环。克隆环类似于空心塑料环,将底部稍微蘸一些无菌的凡士林,在皿中的液体被吸干后(准备
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