Tubulysin IM-1

免疫PCR(IM-PCR)

免疫PCR是将抗原抗体反应的特异性与体外扩增DNA的技术相结合，用于检测生物样品中含量极少的蛋白质，如细胞因子，微量抗原等的方法。首先由Sahot等用重组的链霉亲合素和A蛋白的嵌合体，将免疫法和PCR结合在一起而形成。其基本原理和酶联免疫固相检测法(ELISA)一样，只是标记物质为一段特定的DNA，并且通过PCR扩增进行检测。为此，它要比ELISA敏感10万倍，敏感性可达几百个待检分子。按反应中所用抗体的方式不同可分为： 1. 直接IM―PCR法：将所测抗原吸附在固相载体上，使特异

直接IM―PCR (以rhIL-3的检测为例)

直接IM―PCR (以rhIL-3的检测为例)   【试剂与配制】 TBS：20mmol/L Tris-HCl（pH7.4），150mmoI/L NaCL 封闭液：1.5％ BSA （用TBS配制） 抗hIL-3单抗 生物素化羊抗鼠IgG 亲合素 DNA指示分子(生物素―AdAT) PCR反应液：5×PCR缓冲液10μl，dNTP 4μl，引物4μl，EP-DNA聚合酶0.5μl,蒸馏水31.5μl   【操作方法】 (1) 用TBS稀释rhIL-3至6.0μg

免疫PCR (Immuno PCR, Im-PCR)

一、定义； 免疫PCR是利用抗原抗体反应的特异性和PCR扩增反应的极高灵敏性而建立的一种微量抗原检测技术。 用抗体检测抗原是免疫学的最基本方法，用酶或同位素标记抗体可使检测的敏感性提高，常用的定量检测方法ELISA和RIA均基于标记分子可以使检测的信号增强。免疫PCR是在ELISA的基础上建立起来的新方法，用PCR扩增代替ELISA的酶催化底物显色。PCR具有很强的放大能力，其可以定量地检测DNA和RNA，具有非常高的敏感性和特异性，因此，将与抗原结合的特异抗体通过连接