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- Xybio
- 上海
- P1546
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
CMCC(B)10104 Strain
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
名称：CMCC(B)10104铜绿假单胞杆菌
别称: CMCC(B)10104 Strain
培养基：LB
菌株类别：标准菌株
培养条件：37℃，有氧，LB
保存方式：20%甘油，-20℃
基本应用：质检或其他用途
质粒简介
铜绿假单胞菌（P.Aeruginosa）原称绿脓杆菌，属于非发酵革兰氏阴性杆菌。是土壤中存在的最常见的细菌之一。菌体细长且长短不一，有时呈球杆状或线状，成对或短链状排列。菌体的一端有单鞭毛，在暗视野显微镜或相差显微镜下观察可见细菌运动活泼。铜绿假单胞菌为专性需氧菌，生长温度范围25~42℃，最适生长温度为25~30℃，特别是该菌在4℃不生长而在42℃可以生长的特点可用以鉴别。在普通培养基上可以生存并能产生水溶性的色素，如绿脓素（pyocynin）与带荧光的水溶性荧光素（pyoverdin）等。在血平板上会有透明溶血环。
该菌含有O抗原（菌体抗原）以及H抗原（鞭毛抗原）。O抗原包含两种成分：一种是其外膜蛋白，为保护性抗原；另一种是脂多糖，有特异性。O抗原可用以分型。
质粒图谱
质粒序列：详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P1546/CMCC(B)10104铜绿假单胞杆菌 |
| P1547/ATCC27853铜绿假单胞杆菌 |
| P1548/ATCC17802副溶血性弧菌 |
| P1549/ATCC16404黑曲霉菌 |
| P1550/CMCC(F)98003黑曲霉菌 |
| P1551/CMCC(B)54002单核增生李斯特菌 |
| P1552/CMCC(B)51572福氏志贺氏菌 |
| P1553/CMCC(F)98001白色念珠菌 |
| P1554/木醋杆菌 |
| P1555/ATCC13813乳链球菌 |
| P1556/ATCC10792苏云金芽孢杆菌 |
| P1557/ATCC19606鲍曼不动杆菌 |
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文献和实验菌种活化：干粉标准菌株 标准贮备菌株 工作菌株； 1.1 金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌标准菌株： 挑取部分干粉溶解于0.9% 无菌氯化钠溶液中，划线接种于营养琼脂平板上，36℃±1℃ 培养18-24 小时。并观察菌落形态。 a. 金黄色葡萄球菌：菌落凸起，圆形，不透明； b. 大肠埃希氏菌：菌落稍凸，圆形，湿润，乳白色； c. 铜绿假单胞菌：菌落扁平，圆形，边缘不整齐，光滑湿润，可产生蓝绿或黄绿色素； d. 枯草芽孢杆菌: 表面粗糙不透明
把卵磷酯水解为二甘油脂和胆碱磷酸酯，最早是在产气荚膜梭菌（ Clostridium perfrinsens）的α毒素中发现的，以后又在水肿梭菌（ C． oedematiens），溶血梭菌（ C． haemslyticum）、双酶梭菌（ C． bifermentans）和蜡状芽孢杆菌（ B． cereus）、蕈状芽孢杆菌（ B． mycoiddes）以及铜绿假单胞菌（ Pseudomonas ae－ ruginosa）、荧光假单胞菌（ Pseudomonas fluore－ scens）的培养
胞菌 ATCC27853 用于铜绿假单胞菌和不动杆菌K-B法药敏;铜绿假单胞菌和其他非肠杆菌科稀释法药敏质控；测试M-H平板中二价阳离子对氨基糖甙类和四环素针对铜绿假单胞的抑菌效果 大肠艾希
