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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20
- 保质期:
2年
- 英文名:
CMCC(B)44102 Strain
- 库存:
100
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格:
干粉/液体
名称:CMCC(B)44102大肠埃希菌
别称: CMCC(B)44102 Strain
培养基:LB
菌株类别:标准菌株
培养条件:37℃,有氧,LB
保存方式:20%甘油,-20℃
基本应用:质检或其他用途
质粒简介
大肠埃希菌株
质粒图谱
质粒序列:详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后,请先根据产品管壁标签来判断产品形式,并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒;
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42℃热激60s,不要搅动,再冰浴2min;(从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作)
③加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37℃培养45min;
④6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;(可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布,可以比传统涂布方法获得更多转化子)
⑤将平板正向培养1h,再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h;
(菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态,要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态)
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种(冰袋运输,存于-80℃,保质期90天,请务必划线挑单克隆培养)
四区划线后挑单菌落培养,酵母菌需要先液体复苏再四区划线,再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种(冰袋运输,存于4℃,保质期7天)
穿刺接种,液体培养后四区划线,再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板(冰袋运输,存于4℃,保质期7天)
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒(冰袋运输,存于-20℃,保质期90天)
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中,加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min,吸取5ul质粒转化,离心全涂。
二、转化图片
| P1530/AGL1根癌农杆菌 |
| P1531/LBA4404根癌农杆菌 |
| P1532/GV2260根癌农杆菌 |
| P1533/pCAMBIA3301/LBA4404根癌农杆菌 |
| P1534/EHA101根癌农杆菌 |
| P1536/pSoup/GV3101根癌农杆菌 |
| P1537/pSoup/EHA105根癌农杆菌 |
| P1538/BS168枯草芽孢杆菌 |
| P1541/WB600枯草芽孢杆菌 |
| P1539/WB800N枯草芽孢杆菌 |
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- 作者
- 内容
- 询问日期
文献和实验性和可靠性,对该品种的微生物限度检查进行了计数方法的验证及控制菌检查方法的验证,现将结果报道如下。 1 实验材料 黄连上清丸由山西万辉制药有限公司生产,批号为20050708,20050709,20050710。菌种包括枯草芽孢杆菌[CMCC(B)63501]、金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26003]、大肠埃希菌[CMCC(B)44102]、白色念珠菌[CMCC(F)98001]、黑曲霉[CMCC(F)98003],由北京
(一)埃希菌属概念 埃希菌属包括5个种,即大肠埃希菌、蟑螂埃希菌、弗格森埃希菌、赫尔曼埃希菌和伤口埃希菌。临床最常见的是大肠埃希菌。 大肠埃希菌俗称大肠杆菌,大多数菌株是人类和动物肠道正常菌群。 (二)生物学特性(性状) 1.形态与染色:为革兰阴性短杆菌,(1.0~3.0)μm×(0.4~0.7)μm,多数有周鞭毛,能运动。有菌毛、荚膜及微荚膜。 2.培养特性:兼性厌氧菌,营养要求不高,在普通营养肉汤中呈浑浊生长。普通营养琼脂上呈灰白色的光滑型菌落
埃希菌属的概念及性状: (一)埃希菌属概念 埃希菌属包括5个种,即大肠埃希菌、蟑螂埃希菌、弗格森埃希菌、赫尔曼埃希菌和伤口埃希菌。临床最常见的是大肠埃希菌。 大肠埃希菌俗称大肠杆菌,大多数菌株是人类和动物肠道正常菌群。 (二)生物学特性(性状) 1.形态与染色:为革兰阴性短杆菌,(1.0~3.0)μm×(0.4~0.7)μm,多数有周鞭毛,能运动。有菌毛、荚膜及微荚膜。 2.培养特性:兼性厌氧菌,营养要求不高,在普通营养肉汤中呈浑浊生长










