- ￥100 - 1000
- Xybio
- 上海
- P0194
- 2025年07月13日
9 年钻石会员
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
pGL3.0-Promoter
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：pGL3-Promoter哺乳报告质粒
别称: pGL3.0-Promoter
质粒属性
质粒简介
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported File 5010 bp ds-DNA circular SYN 26-3-2015
DEFINITION .
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS pGL3-Promotor
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 5010)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported 2015-3-26 from MLCC
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..5010
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
promoter 48..244
/note="SV40 promoter"
/note="SV40 early promoter"
rep_origin 95..230
/note="SV40 ori"
/note="SV40 origin of replication"
CDS 280..1932
/codon_start=1
/gene="luc+"
/product="firefly luciferase"
/EC_number="
"
/note="luciferase"
/note="enhanced?luc+ version of the luciferase gene"
/protein_id="
"
/translation="MEDAKNIKKGPAPFYPLEDGTAGEQLHKAMKRYALVPGTIAFTDA
HIEVDITYAEYFEMSVRLAEAMKRYGLNTNHRIVVCSENSLQFFMPVLGALFIGVAVAP
ANDIYNERELLNSMGISQPTVVFVSKKGLQKILNVQKKLPIIQKIIIMDSKTDYQGFQS
MYTFVTSHLPPGFNEYDFVPESFDRDKTIALIMNSSGSTGLPKGVALPHRTACVRFSHA
RDPIFGNQIIPDTAILSVVPFHHGFGMFTTLGYLICGFRVVLMYRFEEELFLRSLQDYK
IQSALLVPTLFSFFAKSTLIDKYDLSNLHEIASGGAPLSKEVGEAVAKRFHLPGIRQGY
GLTETTSAILITPEGDDKPGAVGKVVPFFEAKVVDLDTGKTLGVNQRGELCVRGPMIMS
GYVNNPEATNALIDKDGWLHSGDIAYWDEDEHFFIVDRLKSLIKYKGYQVAPAELESIL
LQHPNIFDAGVAGLPDDDAGELPAAVVVLEHGKTMTEKEIVDYVASQVTTAKKLRGGVV
FVDEVPKGLTGKLDARKIREILIKAKKGGKIAV"
polyA_signal 1973..2094
/note="SV40 poly(A) signal"
/note="SV40 polyadenylation signal"
rep_origin complement(2513..3101)
/direction=LEFT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(3272..4132)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/note="AmpR"
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(4133..4237)
/gene="bla"
/note="AmpR promoter"
rep_origin 4264..4719
/direction=RIGHT
/note="f1 ori"
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
polyA_signal 4850..4898
/note="synthetic polyadenylation signal"
misc_feature 4912..5003
/note="pause site"
/note="RNA polymerase II transcriptional pause signal from
the human?alpha-2 globin gene"
ORIGIN
1 ggtaccgagc tcttacgcgt gctagcccgg gctcgagatc tgcgatctgc atctcaatta
61 gtcagcaacc atagtcccgc ccctaactcc gcccatcccg cccctaactc cgcccagttc
121 cgcccattct ccgccccatc gctgactaat tttttttatt tatgcagagg ccgaggccgc
181 ctcggcctct gagctattcc agaagtagtg aggaggcttt tttggaggcc taggcttttg
241 caaaaagctt ggcattccgg tactgttggt aaagccacca tggaagacgc caaaaacata
301 aagaaaggcc cggcgccatt ctatccgctg gaagatggaa ccgctggaga gcaactgcat
361 aaggctatga agagatacgc cctggttcct ggaacaattg cttttacaga tgcacatatc
421 gaggtggaca tcacttacgc tgagtacttc gaaatgtccg ttcggttggc agaagctatg
481 aaacgatatg ggctgaatac aaatcacaga atcgtcgtat gcagtgaaaa ctctcttcaa
541 ttctttatgc cggtgttggg cgcgttattt atcggagttg cagttgcgcc cgcgaacgac
601 atttataatg aacgtgaatt gctcaacagt atgggcattt cgcagcctac cgtggtgttc
661 gtttccaaaa aggggttgca aaaaattttg aacgtgcaaa aaaagctccc aatcatccaa
721 aaaattatta tcatggattc taaaacggat taccagggat ttcagtcgat gtacacgttc
781 gtcacatctc atctacctcc cggttttaat gaatacgatt ttgtgccaga gtccttcgat
841 agggacaaga caattgcact gatcatgaac tcctctggat ctactggtct gcctaaaggt
901 gtcgctctgc ctcatagaac tgcctgcgtg agattctcgc atgccagaga tcctattttt
961 ggcaatcaaa tcattccgga tactgcgatt ttaagtgttg ttccattcca tcacggtttt
1021 ggaatgttta ctacactcgg atatttgata tgtggatttc gagtcgtctt aatgtataga
1081 tttgaagaag agctgtttct gaggagcctt caggattaca agattcaaag tgcgctgctg
1141 gtgccaaccc tattctcctt cttcgccaaa agcactctga ttgacaaata cgatttatct
1201 aatttacacg aaattgcttc tggtggcgct cccctctcta aggaagtcgg ggaagcggtt
1261 gccaagaggt tccatctgcc aggtatcagg caaggatatg ggctcactga gactacatca
1321 gctattctga ttacacccga gggggatgat aaaccgggcg cggtcggtaa agttgttcca
1381 ttttttgaag cgaaggttgt ggatctggat accgggaaaa cgctgggcgt taatcaaaga
1441 ggcgaactgt gtgtgagagg tcctatgatt atgtccggtt atgtaaacaa tccggaagcg
1501 accaacgcct tgattgacaa ggatggatgg ctacattctg gagacatagc ttactgggac
1561 gaagacgaac acttcttcat cgttgaccgc ctgaagtctc tgattaagta caaaggctat
1621 caggtggctc ccgctgaatt ggaatccatc ttgctccaac accccaacat cttcgacgca
1681 ggtgtcgcag gtcttcccga cgatgacgcc ggtgaacttc ccgccgccgt tgttgttttg
1741 gagcacggaa agacgatgac ggaaaaagag atcgtggatt acgtcgccag tcaagtaaca
1801 accgcgaaaa agttgcgcgg aggagttgtg tttgtggacg aagtaccgaa aggtcttacc
1861 ggaaaactcg acgcaagaaa aatcagagag atcctcataa aggccaagaa gggcggaaag
1921 atcgccgtgt aattctagag tcggggcggc cggccgcttc gagcagacat gataagatac
1981 attgatgagt ttggacaaac cacaactaga atgcagtgaa aaaaatgctt tatttgtgaa
2041 atttgtgatg ctattgcttt atttgtaacc attataagct gcaataaaca agttaacaac
2101 aacaattgca ttcattttat gtttcaggtt cagggggagg tgtgggaggt tttttaaagc
2161 aagtaaaacc tctacaaatg tggtaaaatc gataaggatc cgtcgaccga tgcccttgag
2221 agccttcaac ccagtcagct ccttccggtg ggcgcggggc atgactatcg tcgccgcact
2281 tatgactgtc ttctttatca tgcaactcgt aggacaggtg ccggcagcgc tcttccgctt
2341 cctcgctcac tgactcgctg cgctcggtcg ttcggctgcg gcgagcggta tcagctcact
2401 caaaggcggt aatacggtta tccacagaat caggggataa cgcaggaaag aacatgtgag
2461 caaaaggcca gcaaaaggcc aggaaccgta aaaaggccgc gttgctggcg tttttccata
2521 ggctccgccc ccctgacgag catcacaaaa atcgacgctc aagtcagagg tggcgaaacc
2581 cgacaggact ataaagatac caggcgtttc cccctggaag ctccctcgtg cgctctcctg
2641 ttccgaccct gccgcttacc ggatacctgt ccgcctttct cccttcggga agcgtggcgc
2701 tttctcatag ctcacgctgt aggtatctca gttcggtgta ggtcgttcgc tccaagctgg
2761 gctgtgtgca cgaacccccc gttcagcccg accgctgcgc cttatccggt aactatcgtc
2821 ttgagtccaa cccggtaaga cacgacttat cgccactggc agcagccact ggtaacagga
2881 ttagcagagc gaggtatgta ggcggtgcta cagagttctt gaagtggtgg cctaactacg
2941 gctacactag aagaacagta tttggtatct gcgctctgct gaagccagtt accttcggaa
3001 aaagagttgg tagctcttga tccggcaaac aaaccaccgc tggtagcggt ggtttttttg
3061 tttgcaagca gcagattacg cgcagaaaaa aaggatctca agaagatcct ttgatctttt
3121 ctacggggtc tgacgctcag tggaacgaaa actcacgtta agggattttg gtcatgagat
3181 tatcaaaaag gatcttcacc tagatccttt taaattaaaa atgaagtttt aaatcaatct
3241 aaagtatata tgagtaaact tggtctgaca gttaccaatg cttaatcagt gaggcaccta
3301 tctcagcgat ctgtctattt cgttcatcca tagttgcctg actccccgtc gtgtagataa
3361 ctacgatacg ggagggctta ccatctggcc ccagtgctgc aatgataccg cgagacccac
3421 gctcaccggc tccagattta tcagcaataa accagccagc cggaagggcc gagcgcagaa
3481 gtggtcctgc aactttatcc gcctccatcc agtctattaa ttgttgccgg gaagctagag
3541 taagtagttc gccagttaat agtttgcgca acgttgttgc cattgctaca ggcatcgtgg
3601 tgtcacgctc gtcgtttggt atggcttcat tcagctccgg ttcccaacga tcaaggcgag
3661 ttacatgatc ccccatgttg tgcaaaaaag cggttagctc cttcggtcct ccgatcgttg
3721 tcagaagtaa gttggccgca gtgttatcac tcatggttat ggcagcactg cataattctc
3781 ttactgtcat gccatccgta agatgctttt ctgtgactgg tgagtactca accaagtcat
3841 tctgagaata gtgtatgcgg cgaccgagtt gctcttgccc ggcgtcaata cgggataata
3901 ccgcgccaca tagcagaact ttaaaagtgc tcatcattgg aaaacgttct tcggggcgaa
3961 aactctcaag gatcttaccg ctgttgagat ccagttcgat gtaacccact cgtgcaccca
4021 actgatcttc agcatctttt actttcacca gcgtttctgg gtgagcaaaa acaggaaggc
4081 aaaatgccgc aaaaaaggga ataagggcga cacggaaatg ttgaatactc atactcttcc
4141 tttttcaata ttattgaagc atttatcagg gttattgtct catgagcgga tacatatttg
4201 aatgtattta gaaaaataaa caaatagggg ttccgcgcac atttccccga aaagtgccac
4261 ctgacgcgcc ctgtagcggc gcattaagcg cggcgggtgt ggtggttacg cgcagcgtga
4321 ccgctacact tgccagcgcc ctagcgcccg ctcctttcgc tttcttccct tcctttctcg
4381 ccacgttcgc cggctttccc cgtcaagctc taaatcgggg gctcccttta gggttccgat
4441 ttagtgcttt acggcacctc gaccccaaaa aacttgatta gggtgatggt tcacgtagtg
4501 ggccatcgcc ctgatagacg gtttttcgcc ctttgacgtt ggagtccacg ttctttaata
4561 gtggactctt gttccaaact ggaacaacac tcaaccctat ctcggtctat tcttttgatt
4621 tataagggat tttgccgatt tcggcctatt ggttaaaaaa tgagctgatt taacaaaaat
4681 ttaacgcgaa ttttaacaaa atattaacgc ttacaatttg ccattcgcca ttcaggctgc
4741 gcaactgttg ggaagggcga tcggtgcggg cctcttcgct attacgccag cccaagctac
4801 catgataagt aagtaatatt aaggtacggg aggtacttgg agcggccgca ataaaatatc
4861 tttattttca ttacatctgt gtgttggttt tttgtgtgaa tcgatagtac taacatacgc
4921 tctccatcaa aacaaaacga aacaaaacaa actagcaaaa taggctgtcc ccagtgcaag
4981 tgcaggtgcc agaacatttc tctatcgata
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：pGL3-Promoter哺乳报告质粒
别称: pGL3.0-Promoter
| 启动子: | SV40 |
|---|---|
| 复制子: | pUC |
| 终止子: | SV40 poly(A) signal |
| 质粒分类: | 哺乳细胞，信号通路报告载体 |
| 质粒大小: | 5010bp |
| 原核抗性: | Amp |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
| 表达宿主: | 哺乳细胞 |
| 诱导方式: | 无须诱导，瞬时表达 |
| 5'测序引物: | RVP3:CTAGCAAAATAGGCTGTCCC |
| 3'测序引物: | GLP2:CTTTATGTTTTTGGCGTCTTCC |
质粒属性
| 载体宿主： | 哺乳细胞 |
|---|---|
| 载体用途： | 启动子检测 |
| 基因种属： | |
| 基因类型： | Promoter |
| 原核抗性： | Amp |
| 真核抗性： | |
| 荧光蛋白： | fLuc |
质粒简介
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported File 5010 bp ds-DNA circular SYN 26-3-2015
DEFINITION .
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS pGL3-Promotor
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 5010)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported 2015-3-26 from MLCC
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..5010
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
promoter 48..244
/note="SV40 promoter"
/note="SV40 early promoter"
rep_origin 95..230
/note="SV40 ori"
/note="SV40 origin of replication"
CDS 280..1932
/codon_start=1
/gene="luc+"
/product="firefly luciferase"
/EC_number="
"
/note="luciferase"
/note="enhanced?luc+ version of the luciferase gene"
/protein_id="
"
/translation="MEDAKNIKKGPAPFYPLEDGTAGEQLHKAMKRYALVPGTIAFTDA
HIEVDITYAEYFEMSVRLAEAMKRYGLNTNHRIVVCSENSLQFFMPVLGALFIGVAVAP
ANDIYNERELLNSMGISQPTVVFVSKKGLQKILNVQKKLPIIQKIIIMDSKTDYQGFQS
MYTFVTSHLPPGFNEYDFVPESFDRDKTIALIMNSSGSTGLPKGVALPHRTACVRFSHA
RDPIFGNQIIPDTAILSVVPFHHGFGMFTTLGYLICGFRVVLMYRFEEELFLRSLQDYK
IQSALLVPTLFSFFAKSTLIDKYDLSNLHEIASGGAPLSKEVGEAVAKRFHLPGIRQGY
GLTETTSAILITPEGDDKPGAVGKVVPFFEAKVVDLDTGKTLGVNQRGELCVRGPMIMS
GYVNNPEATNALIDKDGWLHSGDIAYWDEDEHFFIVDRLKSLIKYKGYQVAPAELESIL
LQHPNIFDAGVAGLPDDDAGELPAAVVVLEHGKTMTEKEIVDYVASQVTTAKKLRGGVV
FVDEVPKGLTGKLDARKIREILIKAKKGGKIAV"
polyA_signal 1973..2094
/note="SV40 poly(A) signal"
/note="SV40 polyadenylation signal"
rep_origin complement(2513..3101)
/direction=LEFT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(3272..4132)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/note="AmpR"
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(4133..4237)
/gene="bla"
/note="AmpR promoter"
rep_origin 4264..4719
/direction=RIGHT
/note="f1 ori"
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
polyA_signal 4850..4898
/note="synthetic polyadenylation signal"
misc_feature 4912..5003
/note="pause site"
/note="RNA polymerase II transcriptional pause signal from
the human?alpha-2 globin gene"
ORIGIN
1 ggtaccgagc tcttacgcgt gctagcccgg gctcgagatc tgcgatctgc atctcaatta
61 gtcagcaacc atagtcccgc ccctaactcc gcccatcccg cccctaactc cgcccagttc
121 cgcccattct ccgccccatc gctgactaat tttttttatt tatgcagagg ccgaggccgc
181 ctcggcctct gagctattcc agaagtagtg aggaggcttt tttggaggcc taggcttttg
241 caaaaagctt ggcattccgg tactgttggt aaagccacca tggaagacgc caaaaacata
301 aagaaaggcc cggcgccatt ctatccgctg gaagatggaa ccgctggaga gcaactgcat
361 aaggctatga agagatacgc cctggttcct ggaacaattg cttttacaga tgcacatatc
421 gaggtggaca tcacttacgc tgagtacttc gaaatgtccg ttcggttggc agaagctatg
481 aaacgatatg ggctgaatac aaatcacaga atcgtcgtat gcagtgaaaa ctctcttcaa
541 ttctttatgc cggtgttggg cgcgttattt atcggagttg cagttgcgcc cgcgaacgac
601 atttataatg aacgtgaatt gctcaacagt atgggcattt cgcagcctac cgtggtgttc
661 gtttccaaaa aggggttgca aaaaattttg aacgtgcaaa aaaagctccc aatcatccaa
721 aaaattatta tcatggattc taaaacggat taccagggat ttcagtcgat gtacacgttc
781 gtcacatctc atctacctcc cggttttaat gaatacgatt ttgtgccaga gtccttcgat
841 agggacaaga caattgcact gatcatgaac tcctctggat ctactggtct gcctaaaggt
901 gtcgctctgc ctcatagaac tgcctgcgtg agattctcgc atgccagaga tcctattttt
961 ggcaatcaaa tcattccgga tactgcgatt ttaagtgttg ttccattcca tcacggtttt
1021 ggaatgttta ctacactcgg atatttgata tgtggatttc gagtcgtctt aatgtataga
1081 tttgaagaag agctgtttct gaggagcctt caggattaca agattcaaag tgcgctgctg
1141 gtgccaaccc tattctcctt cttcgccaaa agcactctga ttgacaaata cgatttatct
1201 aatttacacg aaattgcttc tggtggcgct cccctctcta aggaagtcgg ggaagcggtt
1261 gccaagaggt tccatctgcc aggtatcagg caaggatatg ggctcactga gactacatca
1321 gctattctga ttacacccga gggggatgat aaaccgggcg cggtcggtaa agttgttcca
1381 ttttttgaag cgaaggttgt ggatctggat accgggaaaa cgctgggcgt taatcaaaga
1441 ggcgaactgt gtgtgagagg tcctatgatt atgtccggtt atgtaaacaa tccggaagcg
1501 accaacgcct tgattgacaa ggatggatgg ctacattctg gagacatagc ttactgggac
1561 gaagacgaac acttcttcat cgttgaccgc ctgaagtctc tgattaagta caaaggctat
1621 caggtggctc ccgctgaatt ggaatccatc ttgctccaac accccaacat cttcgacgca
1681 ggtgtcgcag gtcttcccga cgatgacgcc ggtgaacttc ccgccgccgt tgttgttttg
1741 gagcacggaa agacgatgac ggaaaaagag atcgtggatt acgtcgccag tcaagtaaca
1801 accgcgaaaa agttgcgcgg aggagttgtg tttgtggacg aagtaccgaa aggtcttacc
1861 ggaaaactcg acgcaagaaa aatcagagag atcctcataa aggccaagaa gggcggaaag
1921 atcgccgtgt aattctagag tcggggcggc cggccgcttc gagcagacat gataagatac
1981 attgatgagt ttggacaaac cacaactaga atgcagtgaa aaaaatgctt tatttgtgaa
2041 atttgtgatg ctattgcttt atttgtaacc attataagct gcaataaaca agttaacaac
2101 aacaattgca ttcattttat gtttcaggtt cagggggagg tgtgggaggt tttttaaagc
2161 aagtaaaacc tctacaaatg tggtaaaatc gataaggatc cgtcgaccga tgcccttgag
2221 agccttcaac ccagtcagct ccttccggtg ggcgcggggc atgactatcg tcgccgcact
2281 tatgactgtc ttctttatca tgcaactcgt aggacaggtg ccggcagcgc tcttccgctt
2341 cctcgctcac tgactcgctg cgctcggtcg ttcggctgcg gcgagcggta tcagctcact
2401 caaaggcggt aatacggtta tccacagaat caggggataa cgcaggaaag aacatgtgag
2461 caaaaggcca gcaaaaggcc aggaaccgta aaaaggccgc gttgctggcg tttttccata
2521 ggctccgccc ccctgacgag catcacaaaa atcgacgctc aagtcagagg tggcgaaacc
2581 cgacaggact ataaagatac caggcgtttc cccctggaag ctccctcgtg cgctctcctg
2641 ttccgaccct gccgcttacc ggatacctgt ccgcctttct cccttcggga agcgtggcgc
2701 tttctcatag ctcacgctgt aggtatctca gttcggtgta ggtcgttcgc tccaagctgg
2761 gctgtgtgca cgaacccccc gttcagcccg accgctgcgc cttatccggt aactatcgtc
2821 ttgagtccaa cccggtaaga cacgacttat cgccactggc agcagccact ggtaacagga
2881 ttagcagagc gaggtatgta ggcggtgcta cagagttctt gaagtggtgg cctaactacg
2941 gctacactag aagaacagta tttggtatct gcgctctgct gaagccagtt accttcggaa
3001 aaagagttgg tagctcttga tccggcaaac aaaccaccgc tggtagcggt ggtttttttg
3061 tttgcaagca gcagattacg cgcagaaaaa aaggatctca agaagatcct ttgatctttt
3121 ctacggggtc tgacgctcag tggaacgaaa actcacgtta agggattttg gtcatgagat
3181 tatcaaaaag gatcttcacc tagatccttt taaattaaaa atgaagtttt aaatcaatct
3241 aaagtatata tgagtaaact tggtctgaca gttaccaatg cttaatcagt gaggcaccta
3301 tctcagcgat ctgtctattt cgttcatcca tagttgcctg actccccgtc gtgtagataa
3361 ctacgatacg ggagggctta ccatctggcc ccagtgctgc aatgataccg cgagacccac
3421 gctcaccggc tccagattta tcagcaataa accagccagc cggaagggcc gagcgcagaa
3481 gtggtcctgc aactttatcc gcctccatcc agtctattaa ttgttgccgg gaagctagag
3541 taagtagttc gccagttaat agtttgcgca acgttgttgc cattgctaca ggcatcgtgg
3601 tgtcacgctc gtcgtttggt atggcttcat tcagctccgg ttcccaacga tcaaggcgag
3661 ttacatgatc ccccatgttg tgcaaaaaag cggttagctc cttcggtcct ccgatcgttg
3721 tcagaagtaa gttggccgca gtgttatcac tcatggttat ggcagcactg cataattctc
3781 ttactgtcat gccatccgta agatgctttt ctgtgactgg tgagtactca accaagtcat
3841 tctgagaata gtgtatgcgg cgaccgagtt gctcttgccc ggcgtcaata cgggataata
3901 ccgcgccaca tagcagaact ttaaaagtgc tcatcattgg aaaacgttct tcggggcgaa
3961 aactctcaag gatcttaccg ctgttgagat ccagttcgat gtaacccact cgtgcaccca
4021 actgatcttc agcatctttt actttcacca gcgtttctgg gtgagcaaaa acaggaaggc
4081 aaaatgccgc aaaaaaggga ataagggcga cacggaaatg ttgaatactc atactcttcc
4141 tttttcaata ttattgaagc atttatcagg gttattgtct catgagcgga tacatatttg
4201 aatgtattta gaaaaataaa caaatagggg ttccgcgcac atttccccga aaagtgccac
4261 ctgacgcgcc ctgtagcggc gcattaagcg cggcgggtgt ggtggttacg cgcagcgtga
4321 ccgctacact tgccagcgcc ctagcgcccg ctcctttcgc tttcttccct tcctttctcg
4381 ccacgttcgc cggctttccc cgtcaagctc taaatcgggg gctcccttta gggttccgat
4441 ttagtgcttt acggcacctc gaccccaaaa aacttgatta gggtgatggt tcacgtagtg
4501 ggccatcgcc ctgatagacg gtttttcgcc ctttgacgtt ggagtccacg ttctttaata
4561 gtggactctt gttccaaact ggaacaacac tcaaccctat ctcggtctat tcttttgatt
4621 tataagggat tttgccgatt tcggcctatt ggttaaaaaa tgagctgatt taacaaaaat
4681 ttaacgcgaa ttttaacaaa atattaacgc ttacaatttg ccattcgcca ttcaggctgc
4741 gcaactgttg ggaagggcga tcggtgcggg cctcttcgct attacgccag cccaagctac
4801 catgataagt aagtaatatt aaggtacggg aggtacttgg agcggccgca ataaaatatc
4861 tttattttca ttacatctgt gtgttggttt tttgtgtgaa tcgatagtac taacatacgc
4921 tctccatcaa aacaaaacga aacaaaacaa actagcaaaa taggctgtcc ccagtgcaag
4981 tgcaggtgcc agaacatttc tctatcgata
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P2912/pENTR223-CERS4（1同义突变2点突变）人源基因质粒 |
| P2913/pENTR223-PER3人源基因质粒 |
| P2914/pENTR223-TMEFF1（1同义突变）人源基因质粒 |
| P2915/pENTR223-DNASE1L3人源基因质粒 |
| P2929/pENTR223-AADAT（2点突变）人源基因质粒 |
| P2930/pENTR223-PDK4（1同义突变）人源基因质粒 |
| P2931/pENTR223-IFT57（217-1290bp点突变）人源基因质粒 |
| P2932/pENTR223-ELMOD39（1同义突变2点突变）人源基因质粒 |
| P2965/pENTR223-NR1I2（1同义突变）人源基因质粒 |
| P2966/pENTR223-KLHL41人源基因质粒 |
| P2967/pENTR223-IKZF2（1同义突变）人源基因质粒 |
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验相关实验
水仙子2005 我想分别构建FOXO1 和 SIRT1基因启动子/luciferase报告质粒，用于研究X基因是否能够调控这两个启动子。但是不知道该扩增两个基因启动子区域的哪一段插入pGL3（promega）中。 另外，promega的pGL3有pGL3-basic和pGL3-enhancer，该选择哪个？ 水仙子2005 继续求助 sxd5266 pGL3-basic 没有SV
在研究基因转录调控的过程中，科研汪经常需要构建某个基因启动子的荧光素酶报告质粒或者预测与某基因启动子结合的转录因子，无论哪种，首先得查找到某基因的启动子序列。能查到启动子序列的网站很多，pubmed，ensemble，UCSC 等等，可是这些网站气场太强大，小白 hold 不住，看得还是很迷糊，肿么破？别担心，这里有一个界面超级友好的网站，可以快速简单的查到到启动子序列，即：The eukaryotic promoter database（EPD）真核启动子数据库EPD 是一种注释非冗余的真核
【求助】topflash/foplash的luciferase opening reading fream针对的就是firefly萤光素酶吗？
orientation, upstream of the Thymidine Kinase (TK) minimal promoter and Luciferase open reading frame. 这里的Luciferase没有标明是Firefly的啊，那我要不要再转一个PGL3载体呢？？？ 在线等答案，谢谢啦！ paroxysm 荧光素酶已经带上了，但是不是firefly种属，看说明书上说的。 但kit里的底物应该是针对这个荧光素酶的。
pGL3-Promoter哺乳报告质粒
￥100 - 1000
