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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20
- 保质期:
2年
- 英文名:
pGL3.0-Enhancer
- 库存:
100
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格:
干粉/液体
名称:pGL3-Enhancer哺乳报告质粒
别称: pGL3.0-Enhancer
| 复制子: | pUC |
|---|---|
| 终止子: | SV40 poly(A) signal |
| 质粒分类: | 哺乳细胞,信号通路报告载体 |
| 质粒大小: | 5064bp |
| 原核抗性: | Amp |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
| 表达宿主: | 哺乳细胞 |
| 诱导方式: | 无须诱导,瞬时表达 |
| 5'测序引物: | RVP3:CTAGCAAAATAGGCTGTCCC |
| 3'测序引物: | 根据序列设计引物 |
质粒属性
| 载体宿主: | 哺乳细胞 |
|---|---|
| 载体用途: | 启动子检测 |
| 基因种属: | |
| 基因类型: | Promoter |
| 原核抗性: | Amp |
| 真核抗性: | |
| 荧光蛋白: | fLuc |
质粒简介
The pGL3 Luciferase Reporter Vectors(a–c) provide a basis for the quantitative analysis of factors that potentially regulate mammalian gene expression. These factors may be cis-acting, such as promoters and enhancers, or trans-acting, such as various DNA-binding factors. The backbone of the pGL3 Luciferase Reporter Vectors is designed for increased expression, and contains a modified coding region for firefly (Photinus pyralis) luciferase that has been optimized for monitoring transcriptional activity in transfected eukaryotic cells. The assay of this genetic reporter is rapid, sensitive and quantitative. In addition, these Luciferase Reporter Vectors contain numerous features aiding in the structural characterization of the putative regulatory sequences under investigation.
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported File 5064 bp ds-DNA circular SYN 23-3-2015
DEFINITION .
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS Untitled
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 5064)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported 2015-3-23 from MiaoLingplasmid
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..5064
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
CDS 88..1740
/codon_start=1
/gene="luc+"
/product="firefly luciferase"
/EC_number="
"
/note="luciferase"
/note="enhanced?luc+ version of the luciferase gene"
/protein_id="
"
/translation="MEDAKNIKKGPAPFYPLEDGTAGEQLHKAMKRYALVPGTIAFTDA
HIEVDITYAEYFEMSVRLAEAMKRYGLNTNHRIVVCSENSLQFFMPVLGALFIGVAVAP
ANDIYNERELLNSMGISQPTVVFVSKKGLQKILNVQKKLPIIQKIIIMDSKTDYQGFQS
MYTFVTSHLPPGFNEYDFVPESFDRDKTIALIMNSSGSTGLPKGVALPHRTACVRFSHA
RDPIFGNQIIPDTAILSVVPFHHGFGMFTTLGYLICGFRVVLMYRFEEELFLRSLQDYK
IQSALLVPTLFSFFAKSTLIDKYDLSNLHEIASGGAPLSKEVGEAVAKRFHLPGIRQGY
GLTETTSAILITPEGDDKPGAVGKVVPFFEAKVVDLDTGKTLGVNQRGELCVRGPMIMS
GYVNNPEATNALIDKDGWLHSGDIAYWDEDEHFFIVDRLKSLIKYKGYQVAPAELESIL
LQHPNIFDAGVAGLPDDDAGELPAAVVVLEHGKTMTEKEIVDYVASQVTTAKKLRGGVV
FVDEVPKGLTGKLDARKIREILIKAKKGGKIAV"
polyA_signal 1781..1902
/note="SV40 poly(A) signal"
/note="SV40 polyadenylation signal"
rep_origin complement(2567..3155)
/direction=LEFT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(3326..4186)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/note="AmpR"
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(4187..4291)
/gene="bla"
/note="AmpR promoter"
rep_origin 4318..4773
/direction=RIGHT
/note="f1 ori"
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
polyA_signal 4904..4952
/note="synthetic polyadenylation signal"
misc_feature 4966..5057
/note="pause site"
/note="RNA polymerase II transcriptional pause signal from
the human?alpha-2 globin gene"
ORIGIN
1 ggtaccgagc tcttacgcgt gctagcccgg gctcgagatc tgcgatctaa gtaagcttgg
61 cattccggta ctgttggtaa agccaccatg gaagacgcca aaaacataaa gaaaggcccg
121 gcgccattct atccgctgga agatggaacc gctggagagc aactgcataa ggctatgaag
181 agatacgccc tggttcctgg aacaattgct tttacagatg cacatatcga ggtggacatc
241 acttacgctg agtacttcga aatgtccgtt cggttggcag aagctatgaa acgatatggg
301 ctgaatacaa atcacagaat cgtcgtatgc agtgaaaact ctcttcaatt ctttatgccg
361 gtgttgggcg cgttatttat cggagttgca gttgcgcccg cgaacgacat ttataatgaa
421 cgtgaattgc tcaacagtat gggcatttcg cagcctaccg tggtgttcgt ttccaaaaag
481 gggttgcaaa aaattttgaa cgtgcaaaaa aagctcccaa tcatccaaaa aattattatc
541 atggattcta aaacggatta ccagggattt cagtcgatgt acacgttcgt cacatctcat
601 ctacctcccg gttttaatga atacgatttt gtgccagagt ccttcgatag ggacaagaca
661 attgcactga tcatgaactc ctctggatct actggtctgc ctaaaggtgt cgctctgcct
721 catagaactg cctgcgtgag attctcgcat gccagagatc ctatttttgg caatcaaatc
781 attccggata ctgcgatttt aagtgttgtt ccattccatc acggttttgg aatgtttact
841 acactcggat atttgatatg tggatttcga gtcgtcttaa tgtatagatt tgaagaagag
901 ctgtttctga ggagccttca ggattacaag attcaaagtg cgctgctggt gccaacccta
961 ttctccttct tcgccaaaag cactctgatt gacaaatacg atttatctaa tttacacgaa
1021 attgcttctg gtggcgctcc cctctctaag gaagtcgggg aagcggttgc caagaggttc
1081 catctgccag gtatcaggca aggatatggg ctcactgaga ctacatcagc tattctgatt
1141 acacccgagg gggatgataa accgggcgcg gtcggtaaag ttgttccatt ttttgaagcg
1201 aaggttgtgg atctggatac cgggaaaacg ctgggcgtta atcaaagagg cgaactgtgt
1261 gtgagaggtc ctatgattat gtccggttat gtaaacaatc cggaagcgac caacgccttg
1321 attgacaagg atggatggct acattctgga gacatagctt actgggacga agacgaacac
1381 ttcttcatcg ttgaccgcct gaagtctctg attaagtaca aaggctatca ggtggctccc
1441 gctgaattgg aatccatctt gctccaacac cccaacatct tcgacgcagg tgtcgcaggt
1501 cttcccgacg atgacgccgg tgaacttccc gccgccgttg ttgttttgga gcacggaaag
1561 acgatgacgg aaaaagagat cgtggattac gtcgccagtc aagtaacaac cgcgaaaaag
1621 ttgcgcggag gagttgtgtt tgtggacgaa gtaccgaaag gtcttaccgg aaaactcgac
1681 gcaagaaaaa tcagagagat cctcataaag gccaagaagg gcggaaagat cgccgtgtaa
1741 ttctagagtc ggggcggccg gccgcttcga gcagacatga taagatacat tgatgagttt
1801 ggacaaacca caactagaat gcagtgaaaa aaatgcttta tttgtgaaat ttgtgatgct
1861 attgctttat ttgtaaccat tataagctgc aataaacaag ttaacaacaa caattgcatt
1921 cattttatgt ttcaggttca gggggaggtg tgggaggttt tttaaagcaa gtaaaacctc
1981 tacaaatgtg gtaaaatcga taaggatctg aacgatggag cggagaatgg gcggaactgg
2041 gcggagttag gggcgggatg ggcggagtta ggggcgggac tatggttgct gactaattga
2101 gatgcatgct ttgcatactt ctgcctgctg gggagcctgg ggactttcca cacctggttg
2161 ctgactaatt gagatgcatg ctttgcatac ttctgcctgc tggggagcct ggggactttc
2221 cacaccctaa ctgacacaca ttccacagcg gatccgtcga ccgatgccct tgagagcctt
2281 caacccagtc agctccttcc ggtgggcgcg gggcatgact atcgtcgccg cacttatgac
2341 tgtcttcttt atcatgcaac tcgtaggaca ggtgccggca gcgctcttcc gcttcctcgc
2401 tcactgactc gctgcgctcg gtcgttcggc tgcggcgagc ggtatcagct cactcaaagg
2461 cggtaatacg gttatccaca gaatcagggg ataacgcagg aaagaacatg tgagcaaaag
2521 gccagcaaaa ggccaggaac cgtaaaaagg ccgcgttgct ggcgtttttc cataggctcc
2581 gcccccctga cgagcatcac aaaaatcgac gctcaagtca gaggtggcga aacccgacag
2641 gactataaag ataccaggcg tttccccctg gaagctccct cgtgcgctct cctgttccga
2701 ccctgccgct taccggatac ctgtccgcct ttctcccttc gggaagcgtg gcgctttctc
2761 atagctcacg ctgtaggtat ctcagttcgg tgtaggtcgt tcgctccaag ctgggctgtg
2821 tgcacgaacc ccccgttcag cccgaccgct gcgccttatc cggtaactat cgtcttgagt
2881 ccaacccggt aagacacgac ttatcgccac tggcagcagc cactggtaac aggattagca
2941 gagcgaggta tgtaggcggt gctacagagt tcttgaagtg gtggcctaac tacggctaca
3001 ctagaagaac agtatttggt atctgcgctc tgctgaagcc agttaccttc ggaaaaagag
3061 ttggtagctc ttgatccggc aaacaaacca ccgctggtag cggtggtttt tttgtttgca
3121 agcagcagat tacgcgcaga aaaaaaggat ctcaagaaga tcctttgatc ttttctacgg
3181 ggtctgacgc tcagtggaac gaaaactcac gttaagggat tttggtcatg agattatcaa
3241 aaaggatctt cacctagatc cttttaaatt aaaaatgaag ttttaaatca atctaaagta
3301 tatatgagta aacttggtct gacagttacc aatgcttaat cagtgaggca cctatctcag
3361 cgatctgtct atttcgttca tccatagttg cctgactccc cgtcgtgtag ataactacga
3421 tacgggaggg cttaccatct ggccccagtg ctgcaatgat accgcgagac ccacgctcac
3481 cggctccaga tttatcagca ataaaccagc cagccggaag ggccgagcgc agaagtggtc
3541 ctgcaacttt atccgcctcc atccagtcta ttaattgttg ccgggaagct agagtaagta
3601 gttcgccagt taatagtttg cgcaacgttg ttgccattgc tacaggcatc gtggtgtcac
3661 gctcgtcgtt tggtatggct tcattcagct ccggttccca acgatcaagg cgagttacat
3721 gatcccccat gttgtgcaaa aaagcggtta gctccttcgg tcctccgatc gttgtcagaa
3781 gtaagttggc cgcagtgtta tcactcatgg ttatggcagc actgcataat tctcttactg
3841 tcatgccatc cgtaagatgc ttttctgtga ctggtgagta ctcaaccaag tcattctgag
3901 aatagtgtat gcggcgaccg agttgctctt gcccggcgtc aatacgggat aataccgcgc
3961 cacatagcag aactttaaaa gtgctcatca ttggaaaacg ttcttcgggg cgaaaactct
4021 caaggatctt accgctgttg agatccagtt cgatgtaacc cactcgtgca cccaactgat
4081 cttcagcatc ttttactttc accagcgttt ctgggtgagc aaaaacagga aggcaaaatg
4141 ccgcaaaaaa gggaataagg gcgacacgga aatgttgaat actcatactc ttcctttttc
4201 aatattattg aagcatttat cagggttatt gtctcatgag cggatacata tttgaatgta
4261 tttagaaaaa taaacaaata ggggttccgc gcacatttcc ccgaaaagtg ccacctgacg
4321 cgccctgtag cggcgcatta agcgcggcgg gtgtggtggt tacgcgcagc gtgaccgcta
4381 cacttgccag cgccctagcg cccgctcctt tcgctttctt cccttccttt ctcgccacgt
4441 tcgccggctt tccccgtcaa gctctaaatc gggggctccc tttagggttc cgatttagtg
4501 ctttacggca cctcgacccc aaaaaacttg attagggtga tggttcacgt agtgggccat
4561 cgccctgata gacggttttt cgccctttga cgttggagtc cacgttcttt aatagtggac
4621 tcttgttcca aactggaaca acactcaacc ctatctcggt ctattctttt gatttataag
4681 ggattttgcc gatttcggcc tattggttaa aaaatgagct gatttaacaa aaatttaacg
4741 cgaattttaa caaaatatta acgcttacaa tttgccattc gccattcagg ctgcgcaact
4801 gttgggaagg gcgatcggtg cgggcctctt cgctattacg ccagcccaag ctaccatgat
4861 aagtaagtaa tattaaggta cgggaggtac ttggagcggc cgcaataaaa tatctttatt
4921 ttcattacat ctgtgtgttg gttttttgtg tgaatcgata gtactaacat acgctctcca
4981 tcaaaacaaa acgaaacaaa acaaactagc aaaataggct gtccccagtg caagtgcagg
5041 tgccagaaca tttctctatc gata
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后,请先根据产品管壁标签来判断产品形式,并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒;
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42℃热激60s,不要搅动,再冰浴2min;(从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作)
③加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37℃培养45min;
④6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;(可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布,可以比传统涂布方法获得更多转化子)
⑤将平板正向培养1h,再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h;
(菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态,要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态)
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种(冰袋运输,存于-80℃,保质期90天,请务必划线挑单克隆培养)
四区划线后挑单菌落培养,酵母菌需要先液体复苏再四区划线,再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种(冰袋运输,存于4℃,保质期7天)
穿刺接种,液体培养后四区划线,再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板(冰袋运输,存于4℃,保质期7天)
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒(冰袋运输,存于-20℃,保质期90天)
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中,加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min,吸取5ul质粒转化,离心全涂。
二、转化图片
| P2984/pENTR223-CASP2(1同义突变1点突变)人源基因质粒 |
| P2985/pENTR223-AKAP17A(2点突变)人源基因质粒 |
| P2986/pENTR223-CEP57L1人源基因质粒 |
| P2987/pENTR223-ZNF556人源基因质粒 |
| P2988/pENTR223-CYP20A1人源基因质粒 |
| P2989/pENTR223-MPP1-A1247G人源基因质粒 |
| P2990/pENTR223-SLC10A3人源基因质粒 |
| P2991/pENTR223-FLI1人源基因质粒 |
| P2992/pENTR223-RRP8(1同义突变)人源基因质粒 |
| P2993/pENTR223-ENTPD3(2点突变)人源基因质粒 |
| P2994/pENTR223-SLC39A7人源基因质粒 |
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
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11 篇 Science 连发!今日特刊解析基因组的关键之处,揭示人类健康和疾病的相关信息
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EC) pEGFP-N1 Effectene Transfection Reagent pP2X2-EGFP Enhancer pGL3-BAS & pGL3-CON 1x PBS pcDNA3.1+










