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pGL3-Enhancer哺乳报告质粒

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  • ¥100 - 1000
  • Xybio
  • 上海
  • P1400
  • 2025年07月13日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 保存条件

      -20

    • 保质期

      2年

    • 英文名

      pGL3.0-Enhancer

    • 库存

      100

    • 供应商

      上海烜雅生物科技有限公司

    • 规格

      干粉/液体

    基本信息
    名称:pGL3-Enhancer哺乳报告质粒
    别称: pGL3.0-Enhancer
    复制子: pUC
    终止子: SV40 poly(A) signal
    质粒分类: 哺乳细胞,信号通路报告载体
    质粒大小: 5064bp
    原核抗性: Amp
    克隆菌株: DH5a
    培养条件: 37度
    表达宿主: 哺乳细胞
    诱导方式: 无须诱导,瞬时表达
    5'测序引物: RVP3:CTAGCAAAATAGGCTGTCCC
    3'测序引物: 根据序列设计引物


    质粒属性
    载体宿主: 哺乳细胞
    载体用途: 启动子检测
    基因种属:  
    基因类型: Promoter
    原核抗性: Amp
    真核抗性:  
    荧光蛋白: fLuc


    质粒简介
       The pGL3 Luciferase Reporter Vectors(a–c) provide a basis for the quantitative analysis of factors that potentially regulate mammalian gene expression. These factors may be cis-acting, such as promoters and enhancers, or trans-acting, such as various DNA-binding factors. The backbone of the pGL3 Luciferase Reporter Vectors is designed for increased expression, and contains a modified coding region for firefly (Photinus pyralis) luciferase that has been optimized for monitoring transcriptional activity in transfected eukaryotic cells. The assay of this genetic reporter is rapid, sensitive and quantitative. In addition, these Luciferase Reporter Vectors contain numerous features aiding in the structural characterization of the putative regulatory sequences under investigation.

    质粒图谱
    产品细节图片1 产品细节图片2

    质粒序列
    LOCUS       Exported File           5064 bp ds-DNA    circular SYN 23-3-2015
    DEFINITION  .
    ACCESSION   .
    VERSION     .
    KEYWORDS    Untitled
    SOURCE      synthetic DNA construct
      ORGANISM  synthetic DNA construct
    REFERENCE   1  (bases 1 to 5064)
      AUTHORS   .
      TITLE     Direct Submission
      JOURNAL   Exported 2015-3-23 from MiaoLingplasmid
                http://www.miaolingbio.com
    FEATURES             Location/Qualifiers
         source          1..5064
                         /organism="synthetic DNA construct"
                         /mol_type="other DNA"
         CDS             88..1740
                         /codon_start=1
                         /gene="luc+"
                         /product="firefly luciferase"
                         /EC_number="
                         "
                         /note="luciferase"
                         /note="enhanced?luc+ version of the luciferase gene"
                         /protein_id="
                         "
                         /translation="MEDAKNIKKGPAPFYPLEDGTAGEQLHKAMKRYALVPGTIAFTDA
                         HIEVDITYAEYFEMSVRLAEAMKRYGLNTNHRIVVCSENSLQFFMPVLGALFIGVAVAP
                         ANDIYNERELLNSMGISQPTVVFVSKKGLQKILNVQKKLPIIQKIIIMDSKTDYQGFQS
                         MYTFVTSHLPPGFNEYDFVPESFDRDKTIALIMNSSGSTGLPKGVALPHRTACVRFSHA
                         RDPIFGNQIIPDTAILSVVPFHHGFGMFTTLGYLICGFRVVLMYRFEEELFLRSLQDYK
                         IQSALLVPTLFSFFAKSTLIDKYDLSNLHEIASGGAPLSKEVGEAVAKRFHLPGIRQGY
                         GLTETTSAILITPEGDDKPGAVGKVVPFFEAKVVDLDTGKTLGVNQRGELCVRGPMIMS
                         GYVNNPEATNALIDKDGWLHSGDIAYWDEDEHFFIVDRLKSLIKYKGYQVAPAELESIL
                         LQHPNIFDAGVAGLPDDDAGELPAAVVVLEHGKTMTEKEIVDYVASQVTTAKKLRGGVV
                         FVDEVPKGLTGKLDARKIREILIKAKKGGKIAV"
         polyA_signal    1781..1902
                         /note="SV40 poly(A) signal"
                         /note="SV40 polyadenylation signal"
         rep_origin      complement(2567..3155)
                         /direction=LEFT
                         /note="ori"
                         /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 
                         replication"
         CDS             complement(3326..4186)
                         /codon_start=1
                         /gene="bla"
                         /product="beta-lactamase"
                         /note="AmpR"
                         /note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
                         related antibiotics"
                         /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
                         ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
                         PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
                         EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
                         LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
                         LIKHW"
         promoter        complement(4187..4291)
                         /gene="bla"
                         /note="AmpR promoter"
         rep_origin      4318..4773
                         /direction=RIGHT
                         /note="f1 ori"
                         /note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow 
                         indicates direction of (+) strand synthesis"
         polyA_signal    4904..4952
                         /note="synthetic polyadenylation signal"
         misc_feature    4966..5057
                         /note="pause site"
                         /note="RNA polymerase II transcriptional pause signal from 
                         the human?alpha-2 globin gene"
    ORIGIN
            1 ggtaccgagc tcttacgcgt gctagcccgg gctcgagatc tgcgatctaa gtaagcttgg
           61 cattccggta ctgttggtaa agccaccatg gaagacgcca aaaacataaa gaaaggcccg
          121 gcgccattct atccgctgga agatggaacc gctggagagc aactgcataa ggctatgaag
          181 agatacgccc tggttcctgg aacaattgct tttacagatg cacatatcga ggtggacatc
          241 acttacgctg agtacttcga aatgtccgtt cggttggcag aagctatgaa acgatatggg
          301 ctgaatacaa atcacagaat cgtcgtatgc agtgaaaact ctcttcaatt ctttatgccg
          361 gtgttgggcg cgttatttat cggagttgca gttgcgcccg cgaacgacat ttataatgaa
          421 cgtgaattgc tcaacagtat gggcatttcg cagcctaccg tggtgttcgt ttccaaaaag
          481 gggttgcaaa aaattttgaa cgtgcaaaaa aagctcccaa tcatccaaaa aattattatc
          541 atggattcta aaacggatta ccagggattt cagtcgatgt acacgttcgt cacatctcat
          601 ctacctcccg gttttaatga atacgatttt gtgccagagt ccttcgatag ggacaagaca
          661 attgcactga tcatgaactc ctctggatct actggtctgc ctaaaggtgt cgctctgcct
          721 catagaactg cctgcgtgag attctcgcat gccagagatc ctatttttgg caatcaaatc
          781 attccggata ctgcgatttt aagtgttgtt ccattccatc acggttttgg aatgtttact
          841 acactcggat atttgatatg tggatttcga gtcgtcttaa tgtatagatt tgaagaagag
          901 ctgtttctga ggagccttca ggattacaag attcaaagtg cgctgctggt gccaacccta
          961 ttctccttct tcgccaaaag cactctgatt gacaaatacg atttatctaa tttacacgaa
         1021 attgcttctg gtggcgctcc cctctctaag gaagtcgggg aagcggttgc caagaggttc
         1081 catctgccag gtatcaggca aggatatggg ctcactgaga ctacatcagc tattctgatt
         1141 acacccgagg gggatgataa accgggcgcg gtcggtaaag ttgttccatt ttttgaagcg
         1201 aaggttgtgg atctggatac cgggaaaacg ctgggcgtta atcaaagagg cgaactgtgt
         1261 gtgagaggtc ctatgattat gtccggttat gtaaacaatc cggaagcgac caacgccttg
         1321 attgacaagg atggatggct acattctgga gacatagctt actgggacga agacgaacac
         1381 ttcttcatcg ttgaccgcct gaagtctctg attaagtaca aaggctatca ggtggctccc
         1441 gctgaattgg aatccatctt gctccaacac cccaacatct tcgacgcagg tgtcgcaggt
         1501 cttcccgacg atgacgccgg tgaacttccc gccgccgttg ttgttttgga gcacggaaag
         1561 acgatgacgg aaaaagagat cgtggattac gtcgccagtc aagtaacaac cgcgaaaaag
         1621 ttgcgcggag gagttgtgtt tgtggacgaa gtaccgaaag gtcttaccgg aaaactcgac
         1681 gcaagaaaaa tcagagagat cctcataaag gccaagaagg gcggaaagat cgccgtgtaa
         1741 ttctagagtc ggggcggccg gccgcttcga gcagacatga taagatacat tgatgagttt
         1801 ggacaaacca caactagaat gcagtgaaaa aaatgcttta tttgtgaaat ttgtgatgct
         1861 attgctttat ttgtaaccat tataagctgc aataaacaag ttaacaacaa caattgcatt
         1921 cattttatgt ttcaggttca gggggaggtg tgggaggttt tttaaagcaa gtaaaacctc
         1981 tacaaatgtg gtaaaatcga taaggatctg aacgatggag cggagaatgg gcggaactgg
         2041 gcggagttag gggcgggatg ggcggagtta ggggcgggac tatggttgct gactaattga
         2101 gatgcatgct ttgcatactt ctgcctgctg gggagcctgg ggactttcca cacctggttg
         2161 ctgactaatt gagatgcatg ctttgcatac ttctgcctgc tggggagcct ggggactttc
         2221 cacaccctaa ctgacacaca ttccacagcg gatccgtcga ccgatgccct tgagagcctt
         2281 caacccagtc agctccttcc ggtgggcgcg gggcatgact atcgtcgccg cacttatgac
         2341 tgtcttcttt atcatgcaac tcgtaggaca ggtgccggca gcgctcttcc gcttcctcgc
         2401 tcactgactc gctgcgctcg gtcgttcggc tgcggcgagc ggtatcagct cactcaaagg
         2461 cggtaatacg gttatccaca gaatcagggg ataacgcagg aaagaacatg tgagcaaaag
         2521 gccagcaaaa ggccaggaac cgtaaaaagg ccgcgttgct ggcgtttttc cataggctcc
         2581 gcccccctga cgagcatcac aaaaatcgac gctcaagtca gaggtggcga aacccgacag
         2641 gactataaag ataccaggcg tttccccctg gaagctccct cgtgcgctct cctgttccga
         2701 ccctgccgct taccggatac ctgtccgcct ttctcccttc gggaagcgtg gcgctttctc
         2761 atagctcacg ctgtaggtat ctcagttcgg tgtaggtcgt tcgctccaag ctgggctgtg
         2821 tgcacgaacc ccccgttcag cccgaccgct gcgccttatc cggtaactat cgtcttgagt
         2881 ccaacccggt aagacacgac ttatcgccac tggcagcagc cactggtaac aggattagca
         2941 gagcgaggta tgtaggcggt gctacagagt tcttgaagtg gtggcctaac tacggctaca
         3001 ctagaagaac agtatttggt atctgcgctc tgctgaagcc agttaccttc ggaaaaagag
         3061 ttggtagctc ttgatccggc aaacaaacca ccgctggtag cggtggtttt tttgtttgca
         3121 agcagcagat tacgcgcaga aaaaaaggat ctcaagaaga tcctttgatc ttttctacgg
         3181 ggtctgacgc tcagtggaac gaaaactcac gttaagggat tttggtcatg agattatcaa
         3241 aaaggatctt cacctagatc cttttaaatt aaaaatgaag ttttaaatca atctaaagta
         3301 tatatgagta aacttggtct gacagttacc aatgcttaat cagtgaggca cctatctcag
         3361 cgatctgtct atttcgttca tccatagttg cctgactccc cgtcgtgtag ataactacga
         3421 tacgggaggg cttaccatct ggccccagtg ctgcaatgat accgcgagac ccacgctcac
         3481 cggctccaga tttatcagca ataaaccagc cagccggaag ggccgagcgc agaagtggtc
         3541 ctgcaacttt atccgcctcc atccagtcta ttaattgttg ccgggaagct agagtaagta
         3601 gttcgccagt taatagtttg cgcaacgttg ttgccattgc tacaggcatc gtggtgtcac
         3661 gctcgtcgtt tggtatggct tcattcagct ccggttccca acgatcaagg cgagttacat
         3721 gatcccccat gttgtgcaaa aaagcggtta gctccttcgg tcctccgatc gttgtcagaa
         3781 gtaagttggc cgcagtgtta tcactcatgg ttatggcagc actgcataat tctcttactg
         3841 tcatgccatc cgtaagatgc ttttctgtga ctggtgagta ctcaaccaag tcattctgag
         3901 aatagtgtat gcggcgaccg agttgctctt gcccggcgtc aatacgggat aataccgcgc
         3961 cacatagcag aactttaaaa gtgctcatca ttggaaaacg ttcttcgggg cgaaaactct
         4021 caaggatctt accgctgttg agatccagtt cgatgtaacc cactcgtgca cccaactgat
         4081 cttcagcatc ttttactttc accagcgttt ctgggtgagc aaaaacagga aggcaaaatg
         4141 ccgcaaaaaa gggaataagg gcgacacgga aatgttgaat actcatactc ttcctttttc
         4201 aatattattg aagcatttat cagggttatt gtctcatgag cggatacata tttgaatgta
         4261 tttagaaaaa taaacaaata ggggttccgc gcacatttcc ccgaaaagtg ccacctgacg
         4321 cgccctgtag cggcgcatta agcgcggcgg gtgtggtggt tacgcgcagc gtgaccgcta
         4381 cacttgccag cgccctagcg cccgctcctt tcgctttctt cccttccttt ctcgccacgt
         4441 tcgccggctt tccccgtcaa gctctaaatc gggggctccc tttagggttc cgatttagtg
         4501 ctttacggca cctcgacccc aaaaaacttg attagggtga tggttcacgt agtgggccat
         4561 cgccctgata gacggttttt cgccctttga cgttggagtc cacgttcttt aatagtggac
         4621 tcttgttcca aactggaaca acactcaacc ctatctcggt ctattctttt gatttataag
         4681 ggattttgcc gatttcggcc tattggttaa aaaatgagct gatttaacaa aaatttaacg
         4741 cgaattttaa caaaatatta acgcttacaa tttgccattc gccattcagg ctgcgcaact
         4801 gttgggaagg gcgatcggtg cgggcctctt cgctattacg ccagcccaag ctaccatgat
         4861 aagtaagtaa tattaaggta cgggaggtac ttggagcggc cgcaataaaa tatctttatt
         4921 ttcattacat ctgtgtgttg gttttttgtg tgaatcgata gtactaacat acgctctcca
         4981 tcaaaacaaa acgaaacaaa acaaactagc aaaataggct gtccccagtg caagtgcagg
         5041 tgccagaaca tttctctatc gata
    //

    质粒菌株产品操作说明书
    一、扩增流程
             收到产品后,请先根据产品管壁标签来判断产品形式,并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
             1、质粒干粉(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
                  收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒;
                  1100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42热激60s,不要搅动,再冰浴2min;(从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作)
                  加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37培养45min
                  6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;(可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布,可以比传统涂布方法获得更多转化子)
                  将平板正向培养1h,再倒置37培养14h。如果要求是30度则培养20h
    (菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态,要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态)
                  挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
            2、甘油菌种(冰袋运输,存于-80,保质期90天,请务必划线挑单克隆培养)
                  四区划线后挑单菌落培养,酵母菌需要先液体复苏再四区划线,再挑单菌落液体培养。
            3、穿刺菌种(冰袋运输,存于4,保质期7天)
                  穿刺接种,液体培养后四区划线,再挑单菌落液体培养。
            4、菌落平板(冰袋运输,存于4,保质期7天)
                  直接挑取单菌落至液体培养基中。
            5、液体质粒(冰袋运输,存于-20,保质期90天)
                  单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
            6、滤纸质粒(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
                  收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中,加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min,吸取5ul质粒转化,离心全涂。

    二、转化图片
    产品细节图片3
    产品细节图片4
    P2984/pENTR223-CASP2(1同义突变1点突变)人源基因质粒
    P2985/pENTR223-AKAP17A(2点突变)人源基因质粒
    P2986/pENTR223-CEP57L1人源基因质粒
    P2987/pENTR223-ZNF556人源基因质粒
    P2988/pENTR223-CYP20A1人源基因质粒
    P2989/pENTR223-MPP1-A1247G人源基因质粒
    P2990/pENTR223-SLC10A3人源基因质粒
    P2991/pENTR223-FLI1人源基因质粒
    P2992/pENTR223-RRP8(1同义突变)人源基因质粒
    P2993/pENTR223-ENTPD3(2点突变)人源基因质粒
    P2994/pENTR223-SLC39A7人源基因质粒

     

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