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- 2025年07月12日
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- 详细信息
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- 保质期：
2年
- 英文名：
pGL3.0-Basic
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：pGL3-Basic哺乳报告质粒
别称: pGL3.0-Basic
质粒属性
质粒简介
The pGL3 Luciferase Reporter Vectors(a–c) provide a basis for the quantitative analysis of factors that potentially regulate mammalian gene expression. These factors may be cis-acting, such as promoters and enhancers, or trans-acting, such as various DNA-binding factors. The backbone of the pGL3 Luciferase Reporter Vectors is designed for increased expression, and contains a modified coding region for firefly (Photinus pyralis) luciferase that has been optimized for monitoring transcriptional activity in transfected eukaryotic cells. The assay of this genetic reporter is rapid, sensitive and quantitative. In addition, these Luciferase Reporter Vectors contain numerous features aiding in the structural characterization of the putative regulatory sequences under investigation.
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported File 4818 bp ds-DNA circular SYN 23-3-2015
KEYWORDS pGL3-basic
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 4818)
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported 2015-3-23 from MLCC
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4818
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
CDS 88..1740
/codon_start=1
/gene="luc+"
/product="firefly luciferase"
/EC_number="
"
/note="luciferase"
/note="enhanced?luc+ version of the luciferase gene"
/protein_id="
"
/translation="MEDAKNIKKGPAPFYPLEDGTAGEQLHKAMKRYALVPGTIAFTDA
HIEVDITYAEYFEMSVRLAEAMKRYGLNTNHRIVVCSENSLQFFMPVLGALFIGVAVAP
ANDIYNERELLNSMGISQPTVVFVSKKGLQKILNVQKKLPIIQKIIIMDSKTDYQGFQS
MYTFVTSHLPPGFNEYDFVPESFDRDKTIALIMNSSGSTGLPKGVALPHRTACVRFSHA
RDPIFGNQIIPDTAILSVVPFHHGFGMFTTLGYLICGFRVVLMYRFEEELFLRSLQDYK
IQSALLVPTLFSFFAKSTLIDKYDLSNLHEIASGGAPLSKEVGEAVAKRFHLPGIRQGY
GLTETTSAILITPEGDDKPGAVGKVVPFFEAKVVDLDTGKTLGVNQRGELCVRGPMIMS
GYVNNPEATNALIDKDGWLHSGDIAYWDEDEHFFIVDRLKSLIKYKGYQVAPAELESIL
LQHPNIFDAGVAGLPDDDAGELPAAVVVLEHGKTMTEKEIVDYVASQVTTAKKLRGGVV
FVDEVPKGLTGKLDARKIREILIKAKKGGKIAV"
polyA_signal 1781..1902
/note="SV40 poly(A) signal"
/note="SV40 polyadenylation signal"
rep_origin complement(2321..2909)
/direction=LEFT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(3080..3940)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/note="AmpR"
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(3941..4045)
/gene="bla"
/note="AmpR promoter"
rep_origin 4072..4527
/direction=RIGHT
/note="f1 ori"
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
polyA_signal 4658..4706
/note="synthetic polyadenylation signal"
misc_feature 4720..4811
/note="pause site"
/note="RNA polymerase II transcriptional pause signal from
the human?alpha-2 globin gene"
ORIGIN
1 ggtaccgagc tcttacgcgt gctagcccgg gctcgagatc tgcgatctaa gtaagcttgg
61 cattccggta ctgttggtaa agccaccatg gaagacgcca aaaacataaa gaaaggcccg
121 gcgccattct atccgctgga agatggaacc gctggagagc aactgcataa ggctatgaag
181 agatacgccc tggttcctgg aacaattgct tttacagatg cacatatcga ggtggacatc
241 acttacgctg agtacttcga aatgtccgtt cggttggcag aagctatgaa acgatatggg
301 ctgaatacaa atcacagaat cgtcgtatgc agtgaaaact ctcttcaatt ctttatgccg
361 gtgttgggcg cgttatttat cggagttgca gttgcgcccg cgaacgacat ttataatgaa
421 cgtgaattgc tcaacagtat gggcatttcg cagcctaccg tggtgttcgt ttccaaaaag
481 gggttgcaaa aaattttgaa cgtgcaaaaa aagctcccaa tcatccaaaa aattattatc
541 atggattcta aaacggatta ccagggattt cagtcgatgt acacgttcgt cacatctcat
601 ctacctcccg gttttaatga atacgatttt gtgccagagt ccttcgatag ggacaagaca
661 attgcactga tcatgaactc ctctggatct actggtctgc ctaaaggtgt cgctctgcct
721 catagaactg cctgcgtgag attctcgcat gccagagatc ctatttttgg caatcaaatc
781 attccggata ctgcgatttt aagtgttgtt ccattccatc acggttttgg aatgtttact
841 acactcggat atttgatatg tggatttcga gtcgtcttaa tgtatagatt tgaagaagag
901 ctgtttctga ggagccttca ggattacaag attcaaagtg cgctgctggt gccaacccta
961 ttctccttct tcgccaaaag cactctgatt gacaaatacg atttatctaa tttacacgaa
1021 attgcttctg gtggcgctcc cctctctaag gaagtcgggg aagcggttgc caagaggttc
1081 catctgccag gtatcaggca aggatatggg ctcactgaga ctacatcagc tattctgatt
1141 acacccgagg gggatgataa accgggcgcg gtcggtaaag ttgttccatt ttttgaagcg
1201 aaggttgtgg atctggatac cgggaaaacg ctgggcgtta atcaaagagg cgaactgtgt
1261 gtgagaggtc ctatgattat gtccggttat gtaaacaatc cggaagcgac caacgccttg
1321 attgacaagg atggatggct acattctgga gacatagctt actgggacga agacgaacac
1381 ttcttcatcg ttgaccgcct gaagtctctg attaagtaca aaggctatca ggtggctccc
1441 gctgaattgg aatccatctt gctccaacac cccaacatct tcgacgcagg tgtcgcaggt
1501 cttcccgacg atgacgccgg tgaacttccc gccgccgttg ttgttttgga gcacggaaag
1561 acgatgacgg aaaaagagat cgtggattac gtcgccagtc aagtaacaac cgcgaaaaag
1621 ttgcgcggag gagttgtgtt tgtggacgaa gtaccgaaag gtcttaccgg aaaactcgac
1681 gcaagaaaaa tcagagagat cctcataaag gccaagaagg gcggaaagat cgccgtgtaa
1741 ttctagagtc ggggcggccg gccgcttcga gcagacatga taagatacat tgatgagttt
1801 ggacaaacca caactagaat gcagtgaaaa aaatgcttta tttgtgaaat ttgtgatgct
1861 attgctttat ttgtaaccat tataagctgc aataaacaag ttaacaacaa caattgcatt
1921 cattttatgt ttcaggttca gggggaggtg tgggaggttt tttaaagcaa gtaaaacctc
1981 tacaaatgtg gtaaaatcga taaggatccg tcgaccgatg cccttgagag ccttcaaccc
2041 agtcagctcc ttccggtggg cgcggggcat gactatcgtc gccgcactta tgactgtctt
2101 ctttatcatg caactcgtag gacaggtgcc ggcagcgctc ttccgcttcc tcgctcactg
2161 actcgctgcg ctcggtcgtt cggctgcggc gagcggtatc agctcactca aaggcggtaa
2221 tacggttatc cacagaatca ggggataacg caggaaagaa catgtgagca aaaggccagc
2281 aaaaggccag gaaccgtaaa aaggccgcgt tgctggcgtt tttccatagg ctccgccccc
2341 ctgacgagca tcacaaaaat cgacgctcaa gtcagaggtg gcgaaacccg acaggactat
2401 aaagatacca ggcgtttccc cctggaagct ccctcgtgcg ctctcctgtt ccgaccctgc
2461 cgcttaccgg atacctgtcc gcctttctcc cttcgggaag cgtggcgctt tctcaatgct
2521 cacgctgtag gtatctcagt tcggtgtagg tcgttcgctc caagctgggc tgtgtgcacg
2581 aaccccccgt tcagcccgac cgctgcgcct tatccggtaa ctatcgtctt gagtccaacc
2641 cggtaagaca cgacttatcg ccactggcag cagccactgg taacaggatt agcagagcga
2701 ggtatgtagg cggtgctaca gagttcttga agtggtggcc taactacggc tacactagaa
2761 ggacagtatt tggtatctgc gctctgctga agccagttac cttcggaaaa agagttggta
2821 gctcttgatc cggcaaacaa accaccgctg gtagcggtgg tttttttgtt tgcaagcagc
2881 agattacgcg cagaaaaaaa ggatctcaag aagatccttt gatcttttct acggggtctg
2941 acgctcagtg gaacgaaaac tcacgttaag ggattttggt catgagatta tcaaaaagga
3001 tcttcaccta gatcctttta aattaaaaat gaagttttaa atcaatctaa agtatatatg
3061 agtaaacttg gtctgacagt taccaatgct taatcagtga ggcacctatc tcagcgatct
3121 gtctatttcg ttcatccata gttgcctgac tccccgtcgt gtagataact acgatacggg
3181 agggcttacc atctggcccc agtgctgcaa tgataccgcg agacccacgc tcaccggctc
3241 cagatttatc agcaataaac cagccagccg gaagggccga gcgcagaagt ggtcctgcaa
3301 ctttatccgc ctccatccag tctattaatt gttgccggga agctagagta agtagttcgc
3361 cagttaatag tttgcgcaac gttgttgcca ttgctacagg catcgtggtg tcacgctcgt
3421 cgtttggtat ggcttcattc agctccggtt cccaacgatc aaggcgagtt acatgatccc
3481 ccatgttgtg caaaaaagcg gttagctcct tcggtcctcc gatcgttgtc agaagtaagt
3541 tggccgcagt gttatcactc atggttatgg cagcactgca taattctctt actgtcatgc
3601 catccgtaag atgcttttct gtgactggtg agtactcaac caagtcattc tgagaatagt
3661 gtatgcggcg accgagttgc tcttgcccgg cgtcaatacg ggataatacc gcgccacata
3721 gcagaacttt aaaagtgctc atcattggaa aacgttcttc ggggcgaaaa ctctcaagga
3781 tcttaccgct gttgagatcc agttcgatgt aacccactcg tgcacccaac tgatcttcag
3841 catcttttac tttcaccagc gtttctgggt gagcaaaaac aggaaggcaa aatgccgcaa
3901 aaaagggaat aagggcgaca cggaaatgtt gaatactcat actcttcctt tttcaatatt
3961 attgaagcat ttatcagggt tattgtctca tgagcggata catatttgaa tgtatttaga
4021 aaaataaaca aataggggtt ccgcgcacat ttccccgaaa agtgccacct gacgcgccct
4081 gtagcggcgc attaagcgcg gcgggtgtgg tggttacgcg cagcgtgacc gctacacttg
4141 ccagcgccct agcgcccgct cctttcgctt tcttcccttc ctttctcgcc acgttcgccg
4201 gctttccccg tcaagctcta aatcgggggc tccctttagg gttccgattt agtgctttac
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4321 gatagacggt ttttcgccct ttgacgttgg agtccacgtt ctttaatagt ggactcttgt
4381 tccaaactgg aacaacactc aaccctatct cggtctattc ttttgattta taagggattt
4441 tgccgatttc ggcctattgg ttaaaaaatg agctgattta acaaaaattt aacgcgaatt
4501 ttaacaaaat attaacgttt acaatttccc attcgccatt caggctgcgc aactgttggg
4561 aagggcgatc ggtgcgggcc tcttcgctat tacgccagcc caagctacca tgataagtaa
4621 gtaatattaa ggtacgggag gtacttggag cggccgcaat aaaatatctt tattttcatt
4681 acatctgtgt gttggttttt tgtgtgaatc gatagtacta acatacgctc tccatcaaaa
4741 caaaacgaaa caaaacaaac tagcaaaata ggctgtcccc agtgcaagtg caggtgccag
4801 aacatttctc tatcgata
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：pGL3-Basic哺乳报告质粒
别称: pGL3.0-Basic
| 复制子: | pUC |
|---|---|
| 终止子: | SV40 poly(A) signal |
| 质粒分类: | 哺乳细胞，信号通路报告载体 |
| 质粒大小: | 4818bp |
| 原核抗性: | Amp |
| 筛选标记: | 荧光素酶Luc |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
| 表达宿主: | 哺乳细胞 |
| 诱导方式: | 无须诱导，瞬时表达 |
| 5'测序引物: | RVP3:CTAGCAAAATAGGCTGTCCC |
| 3'测序引物: | GLP2:CTTTATGTTTTTGGCGTCTTCC |
质粒属性
| 质粒宿主： | 哺乳细胞 |
|---|---|
| 质粒用途： | 信号报告 |
| 片段类型： | Promoter |
| 片段物种： | 空载体 |
| 原核抗性： | Amp |
| 真核抗性： | |
| 荧光标记： | Fluc |
质粒简介
The pGL3 Luciferase Reporter Vectors(a–c) provide a basis for the quantitative analysis of factors that potentially regulate mammalian gene expression. These factors may be cis-acting, such as promoters and enhancers, or trans-acting, such as various DNA-binding factors. The backbone of the pGL3 Luciferase Reporter Vectors is designed for increased expression, and contains a modified coding region for firefly (Photinus pyralis) luciferase that has been optimized for monitoring transcriptional activity in transfected eukaryotic cells. The assay of this genetic reporter is rapid, sensitive and quantitative. In addition, these Luciferase Reporter Vectors contain numerous features aiding in the structural characterization of the putative regulatory sequences under investigation.
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported File 4818 bp ds-DNA circular SYN 23-3-2015
KEYWORDS pGL3-basic
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 4818)
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported 2015-3-23 from MLCC
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4818
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/mol_type="other DNA"
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/gene="luc+"
/product="firefly luciferase"
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/note="luciferase"
/note="enhanced?luc+ version of the luciferase gene"
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/translation="MEDAKNIKKGPAPFYPLEDGTAGEQLHKAMKRYALVPGTIAFTDA
HIEVDITYAEYFEMSVRLAEAMKRYGLNTNHRIVVCSENSLQFFMPVLGALFIGVAVAP
ANDIYNERELLNSMGISQPTVVFVSKKGLQKILNVQKKLPIIQKIIIMDSKTDYQGFQS
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replication"
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related antibiotics"
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LIKHW"
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rep_origin 4072..4527
/direction=RIGHT
/note="f1 ori"
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
polyA_signal 4658..4706
/note="synthetic polyadenylation signal"
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/note="pause site"
/note="RNA polymerase II transcriptional pause signal from
the human?alpha-2 globin gene"
ORIGIN
1 ggtaccgagc tcttacgcgt gctagcccgg gctcgagatc tgcgatctaa gtaagcttgg
61 cattccggta ctgttggtaa agccaccatg gaagacgcca aaaacataaa gaaaggcccg
121 gcgccattct atccgctgga agatggaacc gctggagagc aactgcataa ggctatgaag
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241 acttacgctg agtacttcga aatgtccgtt cggttggcag aagctatgaa acgatatggg
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361 gtgttgggcg cgttatttat cggagttgca gttgcgcccg cgaacgacat ttataatgaa
421 cgtgaattgc tcaacagtat gggcatttcg cagcctaccg tggtgttcgt ttccaaaaag
481 gggttgcaaa aaattttgaa cgtgcaaaaa aagctcccaa tcatccaaaa aattattatc
541 atggattcta aaacggatta ccagggattt cagtcgatgt acacgttcgt cacatctcat
601 ctacctcccg gttttaatga atacgatttt gtgccagagt ccttcgatag ggacaagaca
661 attgcactga tcatgaactc ctctggatct actggtctgc ctaaaggtgt cgctctgcct
721 catagaactg cctgcgtgag attctcgcat gccagagatc ctatttttgg caatcaaatc
781 attccggata ctgcgatttt aagtgttgtt ccattccatc acggttttgg aatgtttact
841 acactcggat atttgatatg tggatttcga gtcgtcttaa tgtatagatt tgaagaagag
901 ctgtttctga ggagccttca ggattacaag attcaaagtg cgctgctggt gccaacccta
961 ttctccttct tcgccaaaag cactctgatt gacaaatacg atttatctaa tttacacgaa
1021 attgcttctg gtggcgctcc cctctctaag gaagtcgggg aagcggttgc caagaggttc
1081 catctgccag gtatcaggca aggatatggg ctcactgaga ctacatcagc tattctgatt
1141 acacccgagg gggatgataa accgggcgcg gtcggtaaag ttgttccatt ttttgaagcg
1201 aaggttgtgg atctggatac cgggaaaacg ctgggcgtta atcaaagagg cgaactgtgt
1261 gtgagaggtc ctatgattat gtccggttat gtaaacaatc cggaagcgac caacgccttg
1321 attgacaagg atggatggct acattctgga gacatagctt actgggacga agacgaacac
1381 ttcttcatcg ttgaccgcct gaagtctctg attaagtaca aaggctatca ggtggctccc
1441 gctgaattgg aatccatctt gctccaacac cccaacatct tcgacgcagg tgtcgcaggt
1501 cttcccgacg atgacgccgg tgaacttccc gccgccgttg ttgttttgga gcacggaaag
1561 acgatgacgg aaaaagagat cgtggattac gtcgccagtc aagtaacaac cgcgaaaaag
1621 ttgcgcggag gagttgtgtt tgtggacgaa gtaccgaaag gtcttaccgg aaaactcgac
1681 gcaagaaaaa tcagagagat cctcataaag gccaagaagg gcggaaagat cgccgtgtaa
1741 ttctagagtc ggggcggccg gccgcttcga gcagacatga taagatacat tgatgagttt
1801 ggacaaacca caactagaat gcagtgaaaa aaatgcttta tttgtgaaat ttgtgatgct
1861 attgctttat ttgtaaccat tataagctgc aataaacaag ttaacaacaa caattgcatt
1921 cattttatgt ttcaggttca gggggaggtg tgggaggttt tttaaagcaa gtaaaacctc
1981 tacaaatgtg gtaaaatcga taaggatccg tcgaccgatg cccttgagag ccttcaaccc
2041 agtcagctcc ttccggtggg cgcggggcat gactatcgtc gccgcactta tgactgtctt
2101 ctttatcatg caactcgtag gacaggtgcc ggcagcgctc ttccgcttcc tcgctcactg
2161 actcgctgcg ctcggtcgtt cggctgcggc gagcggtatc agctcactca aaggcggtaa
2221 tacggttatc cacagaatca ggggataacg caggaaagaa catgtgagca aaaggccagc
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2461 cgcttaccgg atacctgtcc gcctttctcc cttcgggaag cgtggcgctt tctcaatgct
2521 cacgctgtag gtatctcagt tcggtgtagg tcgttcgctc caagctgggc tgtgtgcacg
2581 aaccccccgt tcagcccgac cgctgcgcct tatccggtaa ctatcgtctt gagtccaacc
2641 cggtaagaca cgacttatcg ccactggcag cagccactgg taacaggatt agcagagcga
2701 ggtatgtagg cggtgctaca gagttcttga agtggtggcc taactacggc tacactagaa
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2881 agattacgcg cagaaaaaaa ggatctcaag aagatccttt gatcttttct acggggtctg
2941 acgctcagtg gaacgaaaac tcacgttaag ggattttggt catgagatta tcaaaaagga
3001 tcttcaccta gatcctttta aattaaaaat gaagttttaa atcaatctaa agtatatatg
3061 agtaaacttg gtctgacagt taccaatgct taatcagtga ggcacctatc tcagcgatct
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4801 aacatttctc tatcgata
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质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P2901/pENTR223-ASTN2-C1262T人源基因质粒 |
| P2902/pENTR223-SLC30A4人源基因质粒 |
| P2903/pENTR223-CLASP2人源基因质粒 |
| P2904/pENTR223-KLHDC3人源基因质粒 |
| P2905/pENTR223-KRR1-T617C人源基因质粒 |
| P2906/pENTR223-SEPT6-T1217C人源基因质粒 |
| P2907/pENTR223-COPS2人源基因质粒 |
| P2908/pENTR223-DNAJA4-A7（1同义突变）人源基因质粒 |
| P2909/pENTR223-FAM53C人源基因质粒 |
| P2910/pENTR223-ANKMY1（240-1551bp）人源基因质粒 |
| P2911/pENTR223-CHID1人源基因质粒 |
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文献和实验相关实验
水仙子2005 我想分别构建FOXO1 和 SIRT1基因启动子/luciferase报告质粒，用于研究X基因是否能够调控这两个启动子。但是不知道该扩增两个基因启动子区域的哪一段插入pGL3（promega）中。 另外，promega的pGL3有pGL3-basic和pGL3-enhancer，该选择哪个？ 水仙子2005 继续求助 sxd5266 pGL3-basic 没有SV
、RNA剪接研究。 萤光素酶是理想的报告基因，因为哺乳动物细胞中不含内源性萤光素酶，一旦转录完成立刻就生成功能性的萤光素酶。单报告基因实验往往会受到各种实验条件的影响，而双报告基因则通过共转染的“对照”作为内参为试验提供一基准线，从而可以在最大程度上减小细胞活性和转染效率等外在因素对实验的影响，使得数据结果更为可信。Dual-Luciferase®双萤光素酶报告基因检测系统在细胞中同时表达萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶，两者没有种源同源性并对应不同的反应底物，故而没有交叉干扰。得益于超强的光
. coli/mammals pECFP-C1 pECFPN1 表达 青色 荧光蛋白和目的基因的融合蛋白，目的基因位于N端 kan/neo 4.7kb E. coli/mammals pEYFP-C1 pEYFPC1 表达 黄色 荧光蛋白和目的基因的融合蛋白，目的基因位于C端 kan/neo 4.7kb E. coli/mammals 4)、哺乳动物/真核荧光素酶载体（研究启动子专用）来自荧火虫的化学发光剂，加入底物后发光，不适合追踪单个细胞。 PGL3-basic PGL
pGL3-Basic哺乳报告质粒
￥100 - 1000
