B6-hPD1/hLAG3 人源化小鼠

B6-hPD1/hLAG3

品系名称：B6/JGpt-Pdcd1^{em1Cin(hPDCD1)}Lag3^emCin(hLAG3)/Gpt

品系类型：Knock-in

品系编号：T004621

背景：C57BL/6JGpt

品系描述

PD1(programmed death1)是程序性死亡受体1，是免疫球蛋白超家族I型跨膜糖蛋白，是一种重要的免疫抑制分子，为CD28超家族成员。以PD1为靶点的免疫调节对抗肿瘤、抗感染、抗自身免疫性疾病及器官移植排斥反应等均有重要的意义。

LAG3（Lymphocyteactivation protein3），淋巴细胞活化蛋白3，在活化的T淋巴细胞、B淋巴细胞、自然杀伤细胞和浆细胞样树突状细胞上表达^[1,2]。LAG3基因编码的膜蛋白包含四个免疫球蛋白超级家族结构域，在结构和染色体定位方面与CD4非常相似^[3]，但它以更高的亲和力与MHCII（主要组织相容性复合体II类分子）结合^[4]，并负调节T细胞的功能^[5,6]。

研究表明，敲除LAG3基因或体内抗体阻断LAG3功能，可使器官或肿瘤中的抗原特异的CD8+T细胞的聚集和效应功能增加^[7]。因此，阻断LAG3是一种潜在的肿瘤治疗方法。

集萃药康利用基因编辑技术将鼠Lag3基因编码胞外区的部分替换为相应的人源LAG3基因片段，同时保留了鼠Lag3基因的胞内信号转导区，保证了细胞信号的正确传导不受影响。该模型是筛选人LAG3抑制剂药物的理想动物模型。

应用领域

1. 人类LAG3抑制剂药效及安全性评价

2. 人类LAG3抑制剂与人类PD1抑制剂的联合药效评价

3. 抗肿瘤研究

4. 自身免疫病研究

验证数据

1. PD1和LAG3表达检测

 

 

 

 

图1B6-hPD1/hLAG3小鼠hPD1表达检测。B6-hPD1/hLAG3纯合小鼠在T细胞表面表达人源PD1。

图2B6-hPD1/hLAG3小鼠hLAG3表达检测。B6-hPD1/hLAG3纯合小鼠在T细胞表面表达人源LAG3。

 

 

2. T/B/NK细胞比例检测

图3B6-hPD1/hLAG3小鼠T/B/NK细胞比例检测。B6-hPD1/LAG3小鼠及野生型小鼠体内的T/B/NK细胞比例基本一致。

2. 体内药效试验

在B6-hPD1/hLAG3小鼠皮下接种MC38肿瘤细胞系后测试抗人PD1和LAG3抗体

肿瘤抑制药效

图4基于B6-hPD1/hLAG3的体内药效试验

将结肠癌细胞MC38培养至对数生长期后接种至6-8周龄的B6-hPD1/hLAG3（PD1和LAG3同时人源化小鼠）皮下，待肿瘤生长至平均体积约120mm³时随机分为Vehicle组、anti-hPD1单药组、anti-hLAG3单药组以及anti-hPD1和anti-hLAG3联用组，使用相应药物进行治疗。数据以Mean±SEM形式呈现。

结果显示anti-hPD1单药组对肿瘤生长抑制作用小（TGI=71.88%），anti-hLAG3单药组对肿瘤生长抑制作用小（TGI=63.58%）anti-hPD1和anti-hLAG3联用组对肿瘤生长抑制作用大（TGI=76.03%）（图A），小鼠体重变化趋势一致（图B）。

结果证明PD1、LAG3双人源化小鼠是评估anti-hPD1和anti-hLAG3抗体体内联合药效的有力工具。

参考文献

1. Sierro, Sophie, Pedro Romero, and Daniel E. Speiser. "The CD4-like molecule LAG-3, biology and therapeutic applications." Expert opinion on therapeutic targets 15.1 (2011): 91-101.

2. Goldberg, Monica V., and Charles G. Drake. "LAG-3 in cancer immunotherapy." Cancer Immunology and Immunotherapy. Springer, Berlin, Heidelberg, 2010. 269-278.

3. Triebel, Frederic, et al. "LAG-3, a novel lymphocyte activation gene closely related to CD4." Journal of Experimental Medicine 171.5 (1990): 1393-1405.

4. Huard, Bertrand, et al. "CD4/major histocompatibility complex class II interaction analyzed with CD4+ and lymphocyte activation gene-3 (LAG-3)-Ig fusion proteins." European journal of immunology 25.9 (1995): 2718-2721.

5. Hannier, Sigrid, et al. "CD3/TCR complex-associated lymphocyte activation gene-3 molecules inhibit CD3/TCR signaling." The Journal of Immunology 161.8 (1998): 4058-4065.

6. Hannier, Sigrid, and Frédéric Triebel. "The MHC class II ligand lymphocyte activation gene-3 is co-distributed with CD8 and CD3–TCR molecules after their engagement by mAb or peptide–MHC class I complexes." International immunology11.11 (1999): 1745-1752.

7. Grosso, Joseph F., et al. "LAG-3 regulates CD8+ T cell accumulation and effector function in murine self-and tumor-tolerance systems." The Journal of clinical investigation117.11 (2007): 3383-3392.