BALB/c-hPD1/hTIGIT
品系名称:BALB/cGpt-Pdcd1em1Cin(hPDCD1)Tigitem1Cin(hTIGIT)/Gpt
品系类型:Knock-in
品系编号:T004023
背景:BALB/cJGpt
品系描述
PD1(programmed death1)是程序性死亡受体1,是免疫球蛋白超家族I型跨膜糖蛋白,是一种重要的免疫抑制分子,为CD28超家族成员。以PD1为靶点的免疫调节对抗肿瘤、抗感染、抗自身免疫性疾病及器官移植排斥反应等均有重要的意义。
TIGIT (T cell immunoglobulin andITIMdomain),是一个Ⅰ型跨膜蛋白,胞外区带有一个免疫球蛋白结构域,胞内含有ITIM结构域,主要在T-cell和NK-cell表面表达。体外阻断TIGIT后能增强NK和T细胞的活化及脱颗粒水平,并且也能增加细胞因子如IFN-γ的分泌[1];不同小鼠肿瘤模型中,如CT26结肠癌、4T1乳腺癌和B16/F10黑色素瘤,体内单独注射TIGIT阻断性单克隆抗体,肿瘤的增长与转移显著减缓;联合Flt3L治疗后,小鼠基本不形成肿瘤,生存率也显著增加。
默沙东(Merck)及百时美施贵宝公司(BMS)的两款针对PD-1靶点的抗体药Keytruda(Pembrolizumab,MK-3475)及Opdivo(Nivolumab),均于2014年由FDA批准上市,用于一线肿瘤治疗,有稳健的抗肿瘤作用。目前在临床研究的TIGIT抗体主要是Genentech的MTIG7192A,单独或者和PD-1抗体Atezolizumab联用治疗晚期或转移性肿瘤。
集萃药康自主研发了BALB/c-hPD1/hTIGIT人源化小鼠模型。通过表型分析验证的BALB/c-hPD1/hTIGIT将成为评价TIGIT、PD1或两种抗体药物联合给药评价的动物模型。
应用领域
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TIGIT抑制剂、PD1抑制剂筛选及性能评价,如肿瘤治疗药物或中和性抗体的筛选;
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免疫耐受抑制剂筛选;
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毒理学临床前评价;
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TIGIT靶向药物与PD1药物联合用药的筛选开发;
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免疫系统相关的研究。
验证数据
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BALB/c-hPD1/hTIGIT表达检测
图1BALB/c-hPD1/hTIGIT小鼠hPD1表达检测。
BALB/c-hPD1/hTIGIT小鼠T细胞表面能成功表达hPD1,且比例与野生型雌鼠表达mPD1的比例类似。
图2BALB/c-hPD1/hTIGIT小鼠hTIGIT表达检测。
BALB/c-hPD1/hTIGIT小鼠T细胞表面能成功表达hTIGIT,且比例与野生型小鼠表达mTIGIT的比例类似。
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T/B/NK细胞比例检测
图3BALB/c-hPD1/hTIGIT小鼠T/B/NK细胞比例检测。
BALB/c-hPD1/hTIGIT纯合与野生型小鼠体内的T/B/NK细胞比例基本一致。
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体内药效实验
抗人TIGIT抗体在接种CT26的BALB/c-hPD1/hTIGIT小鼠模型上药效对比试验
图4BALB/c-hPD1/hTIGIT的体内药效试验(Tiragolumabanalogue)
基于BALB/c-hPD1/hTIGIT小鼠药效实验。对数生长期的结肠癌细胞CT26.WT皮下接种至BALB/c-hPD1/hTIGIT小鼠。待肿瘤平均体积生长至80-120mm3时,随机分为HumanIgG1组,Keytruda单药组、Tiragolumab单药组、MTiragolumab单药组及Keytruda+Tiragolumab联合给药组(n=8),每周给药2次,共给药6次。数据以Mean± SEM形式呈现。
结果显示:Keytruda治疗组和Tiragolumab治疗组,其肿瘤体积的抑制率(TGI)分别为56.79%、75.34%,显示对肿瘤的生长有一定的抑制作用;联合用药组Keytruda+Tiragolumab联合给药组显示出更为显著的肿瘤抑制作用,TGI为88.49%。MTiragolumab将Tiragolumab的Fc部分进行突变,从而消除Tiragolumab介导ADCC(抗体依赖性细胞介导的细胞毒性作用),无法有效抑制肿瘤生长(TGI=10.04%)。【TIGIT抗体:Tiragolumabanalogue,与第三方合作验证】
结果证明:BALB/c-hPD1/hTIGIT小鼠是筛选和评价人源PD1、TIGIT抗体及联合用药的理想动物模型,同时可以用于抗体药物ADCC作用的评价。
参考文献
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Joller, Nicole, et al. "Cutting edge: TIGIT has T cell-intrinsic inhibitory functions."The Journal of Immunology186.3 (2011): 1338-1342.