B6-hPD1/hCD28

B6-hPD1/hCD28

 

品系名称：B6/JGpt-Pdcd1 ^{em1Cin(hPDCD1)} Cd28 ^{em1Cin(hCD28)}/Gpt

品系类型：Knock-in

品系编号：T004279

背景：C57BL/6JGpt

 

品系描述

PD1(programmed death 1)是程序性死亡受体1，是免疫球蛋白超家族I型跨膜糖蛋白，是一种重要的免疫抑制分子，为CD28超家族成员。以PD1为靶点的免疫调节对抗肿瘤、抗感染、抗自身免疫性疾病及器官移植排斥反应等均有重要的意义。

大量研究证实，肿瘤微环境中的肿瘤细胞表面PDL1 增高，同时与活化的T细胞上的PD1 结合，传递负调控信号，导致肿瘤抗原特异性T 细胞的凋亡或免疫无能，从而抑制免疫反应，进而促使肿瘤细胞的逃逸^[1]。阻断PD1或PDL1的抗体可能成为肿瘤免疫治疗的新标准。目前已有上市并用于临床的成功药物，如默沙东公司的抗PD-1人源化抗体Keytruda（pembrolizumab，MK-3475）及百时美施贵宝公司的Opdivo (nivolumab)，作为FDA批准上市的的一线肿瘤治疗药物，有稳健的抗肿瘤作用。

CD28是免疫球蛋白超家族（IgSF）成员，表达于90%CD4+T细胞、50% CD8+T细胞、浆细胞和部分活化的B细胞，是协同刺激分子B7的受体。CD28分子与B7分子结合产生的协同刺激信号在T细胞活化中发挥重要作用，能够诱导T细胞表达抗细胞凋亡蛋白（Bcl-XL等），刺激T细胞合成IL-2及其他细胞因子，并促进T细胞的增殖和分化。

肿瘤患者CD8+T细胞上CD28分子在肿瘤免疫中发挥着重要作用：当杀伤性T细胞（CTL，是体内杀伤肿瘤细胞的主要功能性细胞之一）与肿瘤接触时,通过共刺激信号而被激活,从而发挥其对肿瘤细胞的杀伤作用。

集萃药康利用基因编辑技术在PD1人源化成功的小鼠上将人源CD28基因编码的胞外区替换小鼠的胞外区，获得CD28胞外区人源化小鼠。通过表型分析验证的hPD1/hCD28小鼠可用作肿瘤和自身免疫研究，成为筛选治疗癌症与自身免疫疾病药物的动物模型。

 

品系策略

图1 PDCD1人源策略示意图

图2 CD28人源策略示意图

 

 

应用领域

1.anti-hPD1和anti-hCD28联合药效评价；

2.anti-hCD28安全性评价；

3.抗肿瘤研究；

4.免疫系统相关研究。

 

 

验证数据

1.PD1与CD28表达检测

 

图3 B6-hPD1/hCD28小鼠PD1与CD28表达检测。B6-hPD1/hCD28纯合小鼠可同时表达人源PD1和CD28。

 

2.T/B/NK细胞比例检测

 

图4 B6-hPD1/hCD28小鼠T/B/NK细胞比例检测。B6-hPD1/hCD28小鼠与野生型小鼠体内的T/B/NK细胞比例基本一致。

 

参考文献

1.Burr JS, Savage ND, Messah GE, Kimzey SL, Shaw AS, Arch RH, Green JM. Cutting edge: distinct motifs within CD28 regulate T cell proliferation and induction of Bcl-XL. J Immunol.2001;166(9):5331–5335.

2.Riley JL, June CH. The CD28 family: a T-cell rheostat for therapeutic control of T-cell activation.Blood. 2005;105(1):13–21.

3.Friend LD, Shah DD, Deppong C, Lin J, Bricker TL, Juehne TI, Rose CM, Green JM. A dose-dependent requirement for the proline motif of CD28 in cellular and humoral immunity revealed by a targeted knockin mutant. J Exp Med. 2006;203(9):2121–2133.

4.Carl H June,Jeffrey A Ledbetter,Peter S Linsley,Craig B Thompson.Role of the CD28 receptor in T-cell activation.Immunology Today.Volume 11, 1990, Pages 211-216.

5.Xuehui He , Ruben L. Smeets3, Esther van Rijssen , et al. Single CD28 stimulation inducesstable and polyclonal expansion of human regulatory T cells . Scientific reports.

6.Filaci G,Fravega M,Negrini S,Procopio F,Fenoglio D,Rizzi M,Brenci S,Contini P,Olive D,Ghio M,Setti M,Accolla RS,Puppo F,Indiveri F . Nonantigen specific CD8(+) T suppressor lymphocytes originate from CD8(+)CD28(-) T cells and inhibit both T-Cell proliferation and CTL function. Human Immunology65 ,2004,Pages 142-156.

7.https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT01990157

8.Alice O. Kamphorst,1 Andreas Wieland,1 Tahseen Nasti,1 Shu Yang,1,2 Ruan ZhangRescue of exhausted CD8 T cells by PD-1–targeted therapies is CD28-dependent.Science.9 March 2017.

9.Zhou Q，Munger ME，Veenstra RG，et al． Coexpression of Tim-3and PD-1 identifies a CD8+ T-cell exhaustion phenotype in mice with disseminated acute myelogenous leukemia［J］． Blood，2011，117( 17) : 4501-4510