这一刻,我才发现眼高手低的师弟师妹根本没做过实验

这一刻,我才发现眼高手低的师弟师妹根本没做过实验

关键词: 实验

来源: 丁香园

2019-01-14 3631 阅读

新来的师弟师妹,郎才女貌,甚是般配。同样的爱好,同样的啥都不会。我一直以为配制培养基平板是最简单的事情了,称量、兑水、灭菌、倒制就行了,直到这俩活宝的到来。

< 1 >

在三角瓶里配制培养基,如果在一个三角瓶灭菌,那么体积有点大,灭菌过程可能会溢出,所以要加热至澄清透明,完全溶解后,分装到两个三角瓶中,结果加热到这样子就打算分装。

这样根本没溶解好不好?师弟说培养基怎么可能会澄清透明?还和我举例子,红酒是澄清的,也不可能完全透明啊,我这好为人师的重大疾病立马犯了。别整这么多没用的,接着加热。

终于守得云开见月明,一杯澄清赛啤酒的 TSA 培养基问世了。


< 2 >

实验室没捆扎用的粗棉线了,告诉他们去买点棉线,因为棉线和尼龙线不太容易区分,特意告诉他们带上打火机,点一下,如果绳头点燃后有硬疙瘩,那就是尼龙绳,尼龙绳不耐高温灭菌。所以必须要棉线,粗的棉线!棉线点燃后会有灰烬,但不会出现硬疙瘩。

于是棉线买来了,嗯,确实是棉线,但不粗,是缝衣线!


缝衣线能不能用?能用,但太细了,这东西捆扎瓶口勒的手指头疼,而且在超净工作台里,戴着手套,不好捏住绳子头。不便于操作。不过,没买回来尼龙绳,大家表示很满意了。大不了后面有空了,把缝衣线搓成粗线用就是了。


< 3 >

下一步应该是放进灭菌锅湿热灭菌,然后在超净工作台倒制平板冷却凝固。但师妹却告诉我培养基是应该先倒进平皿,等凝固了再用报纸包起来放进灭菌锅灭菌,这样的好处是省去了后面的超净工作台操作,不用再倒制。

这一刹那,我产生了郎才女貌,天作之合的惊愕感。我说培养基会在灭菌过程沸腾出来的,不能这么干,除非是培养基不想要了。师妹恍然大悟,对对对,我说的是销毁染菌的培养皿的操作方式。


< 4 >

在超净工作台倒制平板,不是什么困难事,所以直接让这俩活宝去操作了。等我进洁净室看他们操作时,真的慌了,二位开着紫外灯!开着紫外灯就上手倒平板了!赶紧关上紫外灯,看了下包裹的严严实实,还戴着近视镜的俩活宝,「如果,你们眼睛没有红肿,记得感谢自己的近视镜!」


< 5 >

安排他俩把灭培养基的三角瓶清洗一下,忘了多做交代,然后发现把棉塞给洗了。无语问青天,这得啥时候干!?


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新人嘛,首次倒制平皿,染菌也是情有可原。但我后悔带菌物质销毁没解释清楚。是的,带菌的平皿放在灭菌锅里 121℃ 30 分钟,但平皿是要放进搪瓷杯或者大烧杯里。没告诉他烧杯是必须的,接下来的事立马警示我,说话要说全!因为他把平皿直接堆在灭菌锅里灭菌,灭菌效果不错,但锅里全是培养基溶液,高压沸腾使得培养基进入了灭菌锅的沸水区域,然后在冷却的过程中,二次凝固的培养基把排水口堵住了!

当然,处理起来也不是太难,把灭菌锅里的水加热,趁热把水全部排出,然后继续加水再加热,往复几次也就行了。

< 7 >

刷完培养皿,直接全部倒扣在试验台上。嗯,标准的倒扣。这得啥时候才能干燥

正确的明明是这样的好不好?依次倾斜罗列,才便于干燥。



< 8 >

为了分别不同的平板培养基,大家都习惯于在培养皿上标上培养基名称,比如 TSA,SIM 什么的标识,都是用油性笔写的。没觉得清洗起来是件困难的事,但师弟表示这太困难了,并特意去买了餐洗净来洗。把大家吓了一跳,毕竟我们已经习惯了用 95% 乙醇来擦去字迹的。


当然,师弟师妹虚心接受了教育,但有一事不明,为啥他们的培养基会被污染了呢?明明带了口罩手套,还穿了无菌衣?


此时我们放出了在洁净室窗口拍下的画面


手套没戴好,导致有些精细操作无法正常完成;再就是口罩和无菌衣未准确穿着,可以看到前额的头发是露出的,而且口罩没有完全遮挡面部。

师弟师妹表示,之前做的实验太少了,也没领会到要领,这才一下子出了这么多的错误。没想到配个培养基还有这么多道道。确实如此,做实验步步小心谨慎,眼高手低要不得。

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