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        做 wb 实验时,样本如何精准上样?

        相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

        最新修订时间:

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        合作专家 | 刘建敏博士

        病理学与病理生理 中国科学院大学

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        审核专家 | 聂壹峰博士

        纳米生物医学 中国科学院大学

        材料与仪器

        蛋白样品、移液枪;

        步骤

        1、提取时冰上操作,buffer 添加蛋白酶抑制剂;

        2、蛋白尽量同一批次提取、测定浓度,保存及使用情况尽量一致,防止部分样品有降解;

        3、蛋白提取后尽快测定浓度,添加标曲;

        4、最好调整为统一浓度后上样体积保持一致;

        5、每孔上样体积不宜过大或过少,不超过最大上样量,避免样品溢散污染;

        6、由于样品有一定粘滞性,枪头吸液后外壁会黏附一些,加样时需注意,使用长而细的枪头;

        7、相比等体积上样,如果可以,尽可能等蛋白量上样。

        来源:丁香实验

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