肿瘤细胞的原代培养方法
肿瘤细胞对培养基的要求不如正常细胞严格,最好在原代培养时能加入生长因子或原患者血清(1%-2%)以利细胞生长。培养方法很多,主要有组织块法、酶消化法、钽网法、脱落细胞法等。
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小鼠成骨细胞的培养和传代
原代培养1.取新生3d以内BALB/c小鼠,断颈处死后立即投入75%酒精中消毒5min(虽有头部皮肤保护,但时间不要过长,所以事先要把准备工作做好之后再去杀老鼠)。2.D-Hank’s液漂洗后分离颅盖骨,刮除骨膜和结缔组织,DMEM清洗颅骨骨片并剪碎。(自我感觉碎一点好一些)3.加入0.25%胰蛋白酶(含0.02EDTA),37°恒温消化20min,吸出消化液,之后1mg ...
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人前列腺癌细胞PC-3培养
丁香园网友kj7156084的培养方法:本室的PC-3来自上海细胞生物所,种是ATCC的。以10%FBS+1640或F12培养,0.25%胰酶消化。塑料瓶或玻璃瓶都可以,当然,前者效果较好。复苏时最好用塑料瓶。5-7天传一次(1:2),2-3天换一次液。尽量高密度传,因为PC-3细胞喜欢扎堆长,如果过了两三天细胞长得不均匀,可以消化离心一下。传代后一到两天不要动它,要有耐心。 人前列腺癌 ...
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细胞培养中的黑胶虫问题
我们实验室最近一次的情况:我们前后从上海细胞中心买了三批细胞,细胞刚到的时候,观察均生长良好,密度适中,培养液清亮,也没有见小黑点,但是对细胞传代以后就陆续出现多少不等的小黑点,有时候在一夜之间暴长,给培养液加庆大霉素,也无济于事,对贴壁细胞用生理盐水及D-hanks液冲洗七遍后见减少,但是随后几天又出现,刚开始怀疑操作有问题,但是由有经验的老师操作也出现这种问题,陆续对培养液,血清及胰酶进行培养 ...
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